儀器分析方法在食品微生物快速檢測(cè)方面的應(yīng)用研究

梁國(guó)添

食品質(zhì)量與人們?nèi)粘Ｉ钯|(zhì)量息息相關(guān)，所以要通過(guò)各種形式來(lái)保證食品安全，提升人們的健康水平。當(dāng)前國(guó)內(nèi)食品安全發(fā)展形式并不樂(lè)觀，全球每年會(huì)有15億左右人次，會(huì)感染食源性疾病，其中大部分的食物中毒都是因?yàn)槲⑸镂廴緦?dǎo)致的。傳統(tǒng)微生物食品檢測(cè)工作方法的操作時(shí)間比較長(zhǎng)，而且靈敏度低，整個(gè)過(guò)程十分繁瑣，經(jīng)常出現(xiàn)假陽(yáng)性等問(wèn)題。所以必須要尋找安全高效、快準(zhǔn)確的微生物分析檢測(cè)方式來(lái)提升工作質(zhì)量，下文將對(duì)相關(guān)方法進(jìn)行分析。

毛細(xì)管電泳技術(shù)在微生物分離分析檢測(cè)中的應(yīng)用方式

近年來(lái)隨著毛細(xì)管電泳技術(shù)的不斷發(fā)展，不論是偽固定相技術(shù)還是如膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜技術(shù)，都是通過(guò)相輔相成分離原理完成日常工作的，是一種最基本的色譜以及電泳機(jī)制形式。毛細(xì)管電泳代指在高壓場(chǎng)驅(qū)動(dòng)力條件作用影響下，將毛細(xì)管作為主要通道，根據(jù)樣品分組情況而實(shí)現(xiàn)的一種分離技術(shù)形式。CE和傳統(tǒng)平板電泳工作模式相比，不僅分離柱效比較強(qiáng)，而且分析速度也比較快，整體自動(dòng)化水平比較高，分析對(duì)象也相對(duì)比較廣闊。毛細(xì)管電泳經(jīng)過(guò)多年來(lái)的發(fā)展，已經(jīng)成功應(yīng)用到各種食品微生物分析檢測(cè)當(dāng)中，和CC以及HPLC等方式相比，處理起來(lái)更加簡(jiǎn)單，而且無(wú)需提取物，速度更快。CE可以將細(xì)菌當(dāng)成離子來(lái)處理，而且細(xì)菌在特定條件下，表面的基團(tuán)會(huì)受到電離狀態(tài)以及雙電層厚度等方面的影響，不論是離子強(qiáng)度還是溫度闡述函數(shù)，都可以通過(guò)優(yōu)化參數(shù)的方式來(lái)分離不同細(xì)菌種群的。CE的理論指出，分離柱效會(huì)隨著樣品分子的擴(kuò)散系數(shù)或者是分子量的不斷提升而發(fā)生改變，這也代表了CE在細(xì)胞分離過(guò)程中有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)?？梢苑謩e采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳以及毛細(xì)管凝膠電泳等形式，單獨(dú)培養(yǎng)纖維單細(xì)胞菌，對(duì)根癌土壤進(jìn)行分離處理?；旌暇涸诮?jīng)過(guò)一段時(shí)間的分離之后，可以分別對(duì)其進(jìn)行收集。從整體情況上來(lái)看，經(jīng)毛細(xì)管區(qū)帶電泳分離之后的不同菌純度都在90%以上。

CE將細(xì)菌表面特征信息作為分析的基礎(chǔ)，所以CE是可以反饋出細(xì)菌特征信息的，比如表達(dá)產(chǎn)物表面累計(jì)程度等。不同的發(fā)育階段菌體細(xì)胞對(duì)應(yīng)不同狀態(tài)下的特征峰，并且絕大部分細(xì)菌在受到電泳的影響之后還是可以繼續(xù)保持活體狀態(tài)的?；铙w狀態(tài)的在線監(jiān)測(cè)也可以為當(dāng)前微生物分析工作提供許多切實(shí)可行的分析方式。

經(jīng)過(guò)總結(jié)近期來(lái)的工作情況發(fā)現(xiàn)，藍(lán)細(xì)菌是導(dǎo)致飲用水出現(xiàn)毒性污染的主要因素之一，可以通過(guò)對(duì)藍(lán)細(xì)菌毒素進(jìn)行檢測(cè)和鑒定的方式來(lái)評(píng)判飲用水安全性。EC可以通過(guò)毛細(xì)管區(qū)帶電泳以及毛細(xì)管等速聚焦電泳等，對(duì)飲用水中的各種藍(lán)細(xì)菌毒素進(jìn)行檢驗(yàn)。

毛細(xì)管電色譜

毛細(xì)管電色譜也是近年來(lái)比較流行的一種分離技術(shù)，對(duì)蛋白質(zhì)以及多肽、生物分子的探索也已經(jīng)得到了相關(guān)人員的肯定。在毛細(xì)管的兩側(cè)位置增加高電壓，通過(guò)EOF對(duì)其進(jìn)行處理。作為推動(dòng)力的一組，工作你人員可以根據(jù)樣品不同組別的情況，在固定相以及流動(dòng)相間分配系數(shù)差異，并且在電場(chǎng)當(dāng)中控制遷移速率。利用不同遷移速率來(lái)實(shí)現(xiàn)微分離，是一種將高效液相色譜與高校毛細(xì)管電泳相互結(jié)合的工作技術(shù)。這種工作模式不僅可以打譜液相色譜當(dāng)中存在的壓力流問(wèn)題以及流速問(wèn)題，同時(shí)還能控制峰擴(kuò)展。峰擴(kuò)展和溶質(zhì)擴(kuò)散系數(shù)之間存在一定的關(guān)聯(lián)，所以相關(guān)工作人員可以通過(guò)該方式來(lái)獲取一些和毛細(xì)管電泳水平高柱效相同的結(jié)果，還可以具備液相色譜選擇性特點(diǎn)。CEC通過(guò)高壓直流電源來(lái)代替高壓泵進(jìn)行工作，并利用電滲流等實(shí)現(xiàn)流向的驅(qū)動(dòng)。流蘇在管中不會(huì)呈現(xiàn)拋物輪廓，而譜帶的寬展效應(yīng)是比較小的，這也是導(dǎo)致CEC比HPLC柱效高的原因之一。

儀器分析方法在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用效果是比較理想的，并且可以從根本上提升食品微生物檢測(cè)工作效率。上文分別從毛細(xì)管電色譜、毛細(xì)管電泳技術(shù)在微生物分離分析檢測(cè)中的應(yīng)用方式兩個(gè)方面，對(duì)工作模式進(jìn)行了闡述。希望可以為相關(guān)工作人員提供日后工作參考，促進(jìn)行業(yè)更好更快的發(fā)展。

（作者單位：佛山市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)中心）