泰山赤靈芝多糖提取物對骨質(zhì)疏松大鼠骨量的影響

葛凡，葛孚章

( 1．泰安市第一中學(xué)，山東泰安271000; 2．泰山醫(yī)學(xué)院運(yùn)動醫(yī)學(xué)研究所)

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泰山赤靈芝多糖提取物對骨質(zhì)疏松大鼠骨量的影響

葛凡1，葛孚章2*

( 1．泰安市第一中學(xué)，山東泰安271000; 2．泰山醫(yī)學(xué)院運(yùn)動醫(yī)學(xué)研究所)

摘要目的:研究泰山赤靈芝多糖提取物對去卵巢雌性Wistar大鼠全身骨大小及骨量的影響。方法:選用4月齡雌性Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為5組，10只為正常對照組，40只大鼠去除雙側(cè)卵巢，其中30只分別注射不同劑量( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg)的泰山赤靈芝多糖提取物，剩余10只為模型組。實驗結(jié)束后，取大鼠右股骨進(jìn)行骨大小、骨量的測定。結(jié)果:去卵巢大鼠骨大小、骨量均低于正常對照組;但給予泰山赤靈芝多糖提取物干預(yù)后，骨大小、骨量均較模型組增加。結(jié)論:泰山赤靈芝多糖提取物具有抑制骨量丟失、預(yù)防骨質(zhì)疏松的良好作用。

關(guān)鍵詞骨質(zhì)疏松;泰山赤靈芝多糖提取物;骨量;骨大小

骨質(zhì)疏松癥是主要發(fā)生在絕經(jīng)后婦女和老年人中的一種代謝性骨病。隨著我國人口的老齡化，骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率日益增高，它的的高致殘率和高病死率，嚴(yán)重威脅著中老年人的健康，對于它的防治是全社會關(guān)注的問題。

泰山赤靈芝是著名的泰山特產(chǎn)，為我國醫(yī)藥寶庫中的珍品，《本草綱目》記載它具有“堅筋骨、利關(guān)節(jié)”的功效［1］，如果實驗研究能證明泰山赤靈芝確實能夠改善骨質(zhì)疏松癥，重視它的藥用、市場價值，對其開發(fā)、保護(hù)具有重要意義。

1　材料與方法

1.1實驗動物及儀器實驗動物: 4月齡雌性Wistar大鼠60只，體重200～250 g，購于泰山醫(yī)學(xué)院動物中心。

主要儀器:電子分析天平(上海FA1104B)、電子透射電鏡(日本日立H-9500)。

1.2制備泰山赤靈芝多糖提取物( Taishan Ganoderma lucidum Extract，TGLE)按參考文獻(xiàn)［2］采用水提法從泰山赤靈芝中制備提取物，采用蒽酮法［3］測定TGLE中靈芝多糖含量為20%。

1.3分組及骨質(zhì)疏松模型的建立將實驗大鼠隨機(jī)分為5組:正常對照組、橫型組、TGLE高劑量組、TGLE中劑量組、TGLE低劑量組。

骨質(zhì)疏松模型的建立［4］:除正常對照組外，所有大鼠均用戊巴比妥鈉( 40 mg/kg)腹腔內(nèi)注射麻醉，除正常對照組單純開腹手術(shù)外，其他組在無菌條件下切除雙側(cè)卵巢，羊腸線縫合，為預(yù)防感染，在切口縫合時敷少量青霉素粉，術(shù)后2萬單位青霉素注射1次。

1.4干預(yù)術(shù)后第2天，稱取TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組的Wistar大鼠的體重，每只大鼠腹部皮下注射TGLE滅菌生理鹽水溶液，高劑量組10 mg/kg體重，中劑量組5 mg/kg體重，低劑量組1 mg/kg體重;各組每日定量喂食，飲用水量不限。室溫( 25±2)℃，相對濕度( 45±10) %，保持良好通風(fēng)。

1.5評價指標(biāo)各組大鼠分別于實驗后第12周末行動脈放血處死，摘取右股骨，測量骨大小及骨量。體重:每只大鼠動脈放血處死前稱其體重。骨長度:用游標(biāo)卡尺量取右股骨的長度。骨直徑:分別于右股骨的近端1/3點(diǎn)、中點(diǎn)、遠(yuǎn)端1/3點(diǎn)，用游標(biāo)卡尺量取其最大外徑及最小外徑，將6個數(shù)值相加后平均，作為骨直徑的數(shù)值。骨體積:用阿基米德( Archimedes)原理測量右股骨的體積。骨濕重:右股骨剝凈軟組織后，即置于1/ 100 000分析天平上稱其質(zhì)量。骨干重:右股骨剝凈軟組織后置烤箱中于110℃下烤48 h至恒重，于1/100 000分析天平上稱骨干重。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x ±s)表示，數(shù)據(jù)分析采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

實驗過程中無大鼠死亡。模型組的骨直徑和骨體積較正常對照組降低( P＜0.05) ;骨長度、骨濕重、骨干重較正常對照組明顯降低( P＜0.01)，說明去卵巢可使大鼠的骨大小和骨量下降。見表1。

TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組的骨直徑和骨體積較模型組增加( P＜0.05) ;骨長度、骨濕重、骨干重較去卵巢組明顯增加( P＜0.01) ;與正常對照組比較，上述各指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義( P＞0.05)。見表1。

TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組在骨直徑、骨體積、骨長度、骨濕重、骨干重方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P＜0.05)，見表1。

表1　TGLE不同劑量注射對骨大小和骨量的影響(±s)

表1　TGLE不同劑量注射對骨大小和骨量的影響(±s)

注:與正常對照組比較，1)P＜0.05，2)P＜0.01;與模型組比較，3)P＜0.05，4)P＜0.01;與高劑量比較，5)P＜0.05

組別　　體重( g)骨長度( mm)骨直徑( mm)骨體積( cm3)骨濕重( mg)骨干重( mg)正常對照組　326.47±17.21　 37.54±1.24　3.90±0.15　0.72±0.09　781.47±24.31　 574.76±23模型組　325.47±15.33　 37.45±1.232)　3.73±0.191)　0.67±0.111)　731.47±24.222)　514.76±23.312)高劑量組　326.23±11.24　 37.53±1.194)　3.88±0.073)　0.71±0.083)　777.47±24.194)　569.52±23.404)中劑量組　325.91±19.13　 37.51±1.144) 5)　3.86±0.133) 5)　0.70±0.123) 5)　762.47±24.274) 5)　564.63±234) 5)低劑量組　325.74±13.19　 37.49±1.094) 5)　3.81±0.073) 5)　0.69±0.053) 5)　760.47±24.174) 5)　551.77±23.224) 5)

3　討論

骨質(zhì)疏松癥一般發(fā)病緩慢，早期無明顯臨床表現(xiàn)，隨著病情進(jìn)展逐漸出現(xiàn)腰背疼痛、身長縮短、駝背、骨折、呼吸功能下降等癥狀［5］，嚴(yán)重威脅患者的正常生活質(zhì)量，需積極進(jìn)行治療。骨質(zhì)疏松癥及其并發(fā)癥，正成為亟待解決的現(xiàn)實問題。

《本草綱目》中記載:靈芝性溫、味甘、微苦，有益心氣、生血、助心安神、益肺氣、堅筋骨、利關(guān)節(jié)、安神補(bǔ)肝等多種功能［1］，現(xiàn)在被國際醫(yī)學(xué)界公認(rèn)為最理想的人體整體平衡的調(diào)節(jié)劑，現(xiàn)代科學(xué)研究表明，靈芝含有多糖、多種氨基酸、甾類、三萜類、生物堿、有機(jī)酸、甘露醇等多種生物活性物質(zhì)，最近的研究表明靈芝多糖有廣泛免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、降血脂、神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)等藥理活性，具有成為治療骨質(zhì)疏松癥的潛在能力［6－7］。

本研究從骨大小及骨量2個方面檢測，能夠較完整顯示TGLE在不同劑量時對骨質(zhì)疏松癥的治療效果。表1數(shù)據(jù)對比可以發(fā)現(xiàn)TGLE高劑量組效果最好，并且稍微優(yōu)于TGLE中劑量組、TGLE低劑量組，但明顯高于模型組，說明TGLE對大鼠骨質(zhì)疏松模型有良好的治療作用;其中應(yīng)用高劑量TGLE，治療骨質(zhì)疏松癥效果最佳。

本實驗初步表明，TGLE對大鼠激素性骨質(zhì)疏松具有促進(jìn)其骨生成作用，可有效治療激素性骨質(zhì)疏松，對于它的臨床應(yīng)用、開發(fā)研究提供重要的參考數(shù)據(jù)。TGLE治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)理，有待進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn):

［1］李時珍．《本草綱目》(校點(diǎn)本)［M］．2版．北京:人民衛(wèi)生出版社，2005: 1985－912．

［2］李兆蘭，鄭濤．靈芝菌絲體和發(fā)酵液有效成分及含量分析［J］．中草藥，1994，25 ( 1) : 17－19．

［3］汪沛洪．基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗指導(dǎo)［M］．西安:陜西科學(xué)技術(shù)出版社，1986: 16－182．

［4］鄧軒賡，陳建庭，查丁勝．低強(qiáng)度復(fù)合振動治療去卵巢老齡大鼠骨質(zhì)疏松實驗研究［J］．中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志，2011，30 ( 3) : 265－269，274．

［5］常志芳，馮成龍，史曉霞，等．免疫與骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展［J］．中國骨質(zhì)疏松雜志，2015，( 21) 4: 508－513．

［6］張維珂，黃文建，崔長松，等．泰山赤靈芝對提高運(yùn)動員大強(qiáng)度訓(xùn)練中的免疫機(jī)能預(yù)防運(yùn)動性疾病的實驗研究［J］．體育科技文獻(xiàn)通報，2014，22 ( 7) : 116－117．

［7］董少斌．補(bǔ)充番茄紅素對籃球運(yùn)動員大強(qiáng)度訓(xùn)練后免疫機(jī)能的影響［J］．北京體育大學(xué)學(xué)報，2008，31 ( 3) : 351－352，358．

(吳迪編輯)

Effect of Taishan Red Ganoderma Lucidum Extract on Bone Mass in Rats with Osteoporosis

GE Fan1，Ge Fuzhang2*
( 1．Middle School of Tai'an，Tai'an 271000，China; 2．Institute of Sports Medicine，Taishan Medical University)

AbstractObjective: To study the effect of Taishan red ganoderma lucidum extract ( TGLE) on bone size and bone mass in the whole body of ovariectomized female Wistar rats．Methods: A total of 50 female Wistar rats were randomly divided into 5 groups．There were 10 in normal control group．And bilateral ovaries in 40 rats were removed，30 of which were injected with different doses ( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg) of TGLE，and the remaining 10 were the control group．The bone size and bone mass of the right femur were measured after the experiment．Results: The bone size and bone mass in ovariectomized rats were lower than those in normal control group，but the bone size and bone mass were increased by TGLE．Conclusion: TGLE have good effect in inhibiting bone loss，preventing osteoporosis．

Key wordsosteoporosis; Taishan red ganoderma lucidum extract; bone mass; bone size

收稿日期2015－06－29

通訊作者葛孚章( 1971—)，男(漢)，副教授，研究方向:運(yùn)動醫(yī)學(xué)．E-mail: gefuzhang@ 163.com

基金項目泰安市2012年科技發(fā)展計劃課題( No.20123052)

doi:10.16753/j.cnki.1008－2344.2016.01.006

中圖分類號R681

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號1008－2344( 2016) 01－0021－02