PCR檢驗法用于細菌檢驗的效果評價

王琦

【摘要】 目的 探討分析PCR檢驗法對于細菌檢驗的效果， 為臨床實踐提供可靠依據(jù)。方法 86例陰道炎患者， 按照隨機數(shù)表法分成對照組和試驗組， 各43例。對照組患者的陰道分泌物接受細菌培養(yǎng)法， 試驗組接受PCR檢驗， 對比兩組患者的檢查結果。結果 試驗組的陽性檢出率為86.0%， 明顯高于對照組的67.4%， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 PCR檢驗法能明顯提高陰道細菌的檢驗效果， 結果更可靠， 具有廣泛推廣的臨床價值。

【關鍵詞】 細菌檢驗；PCR檢驗；細菌培養(yǎng)法；陰道炎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.069

在臨床婦科的范疇內， 陰道炎作為一種發(fā)病緩慢的疾病， 不易被患者察覺與重視[1]。主要致病因素是陰道感染細菌， 主要臨床癥狀是白帶分泌異常、產(chǎn)生異味以及瘙癢， 嚴重時可能侵犯患者的盆腔與腹部， 甚至導致不孕或者異位妊娠， 因此， 對于陰道炎患者臨床上應及時給予診斷與治療[2]。診斷的方式主要是檢查陰道分泌物， 能夠有效直接的反應被檢者的感染菌種、感染情況與病情發(fā)展。常用的檢查方式為細菌培養(yǎng)法與PCR檢驗法。本文圍繞這兩種方法的檢查效果開展研究， 取得了較為滿意的結果， 現(xiàn)具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 隨機選取本院2013年2月～2015年9月收治的86例陰道炎患者， 均對本研究知情， 且均處于育齡期。按照隨機數(shù)表法分成對照組和試驗組， 各43例。對照組年齡20～46歲， 平均年齡（30.6±6.1）歲；試驗組年齡21～48歲， 平均年齡（31.5±5.9）歲。所有患者臨床癥狀均表現(xiàn)為白帶分泌異常、出現(xiàn)異味、瘙癢等。兩組患者年齡、病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 納入及排除標準

1. 2. 1 納入標準 所有患者均符合中華婦科學會制定的陰道炎診斷標準， 經(jīng)婦科檢查、病理檢查等一系列相關檢查后確診為陰道炎。

1. 2. 2 排除標準 哺乳期與妊娠期婦女， 最近一次同房在3 d之內， 處于例假期間， 嚴重心、肝、腎器官功能不全的患者以及半月內接受過抗菌治療的患者。

1. 3 方法

1. 3. 1 對照組 用棉簽蘸取患者陰道穹窿處的分泌物， 保存于生理鹽水中， 對照組患者的陰道分泌物接受細菌培養(yǎng)法， 從生理鹽水中取出患者的陰道分泌物， 置于培養(yǎng)基內， 在CO2恒溫培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)。2 d后， 在培養(yǎng)基中選出菌群中呈光滑灰色半透明雨滴狀的菌落， 送于檢驗科檢驗。

1. 3. 2 試驗組 用棉簽蘸取患者陰道穹窿處的分泌物， 保存于生理鹽水中， 試驗組患者的陰道分泌物接受PCR檢驗法， 具體方法如下：離心含分泌物的生理鹽水， 轉速為1200 r/min， 時長15 min。離心后， 取上清液往其中添加組織裂解液， 水浴15 min， 溫度為60℃。隨后再離心， 轉速為1200 r/min， 時長10 min。取離心后的上清液加入PCR試劑進行DNA模板的擴增， 同時設置空白對照組， 即不含有DNA模板， 其他條件相同， 加入雙蒸餾水、引物、緩沖液、模板。均置于PCR儀中。

1. 4 觀察指標 對比記錄兩組患者細菌培養(yǎng)結果中菌類數(shù)。

1. 5 評價標準[3] 滿足以下條件即可視為陽性：①邊緣整齊， 有≤1 mm的條帶；②條帶符合期望的堿基， 若在這范圍之外， 則作為人工假象處理， 不計數(shù)；③背景沒有出現(xiàn)SMEARS與引物二聚體。

1. 6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

兩組患者在經(jīng)細菌檢驗后， 試驗組患者陽性37例， 檢出率為86.0%， 包括5例腸球菌， 23例戛納桿菌， 9例棒狀桿菌；對照組患者陽性29例， 檢出率為67.4%， 包括5例腸球菌， 18例戛納桿菌， 6例棒狀桿菌。試驗組的陽性檢出率明顯高于對照組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快、婦女不良的生活習慣等個人因素普遍化， 陰道炎等婦科疾病的發(fā)病率逐年上升。陰道炎因病程發(fā)展緩慢、癥狀普通， 易被育齡期婦女忽視， 但隨著發(fā)展的嚴重化， 可導致患者的盆腔與腹部遭受感染， 甚至出現(xiàn)異位妊娠與不孕的情況。臨床上常對陰道分泌物進行檢驗來診斷此病， 常以白帶來間接反應婦女的陰道健康狀況， 當白帶分泌出現(xiàn)異常時應到醫(yī)院進行檢查， 防止可能存在的疾病惡化， 從而影響到日常的生活質量。

陰道炎的主要致病因素是菌群平衡被打亂， 在健康的狀態(tài)下， 各菌群相互制約， 分泌的各種物質能夠得到一個平衡狀態(tài)， 從而共同維護陰道環(huán)境。若這一平衡狀態(tài)被打破， 大量桿菌死亡， 致病菌大量繁殖， 導致陰道上皮細胞死亡， 失去原有的保護屏障[4]。診斷陰道炎的關鍵在于菌群的檢驗， 只有高準確率才能對患者的病情做出準確有效的判斷。常用的臨床檢驗方法主要為細菌培養(yǎng)法與PCR檢驗法。PCR檢驗的主要原理是在體外經(jīng)體外酶對細菌DNA進行復制， 快速簡便， 靈敏特異。細菌培養(yǎng)法對培養(yǎng)的條件較為苛刻， 而具有和細菌培養(yǎng)法相同結果的PCR檢驗， 操作條件較為簡便， 且檢測結果更有效， 陽性檢出率較高， 提高了陰道炎診斷的效率， 為患者下一步治療提供了方便。本文研究結果顯示， 兩組患者在經(jīng)細菌檢驗后， 試驗組患者陽性37例， 檢出率為86.0%， 對照組患者陽性29例， 檢出率為67.4%， 試驗組的陽性檢出率明顯高于對照組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。與王一葉[5]學者研究結果一致。

綜上所述， PCR檢驗法能明顯提高陰道細菌檢驗的效果， 結果更可靠， 具有廣泛推廣的臨床價值。

參考文獻

[1] 歐志方.三種不同檢驗方法用于陰道細菌檢驗的比較分析.中外醫(yī)療， 2013， 32（7）：171-172.

[2] 姚虹， 呂治， 閻東輝.實時熒光定量PCR檢測陰道加德納菌的方法及其臨床應用.中國醫(yī)刊， 2013， 48（11）：70-72.

[3] 樂杰.婦產(chǎn)科學.北京：人民衛(wèi)生出版社， 2008：241.

[4] 張潔.陰道分泌物常規(guī)檢驗的臨床探析.中外醫(yī)學研究， 2014， 12（3）：65-66.

[5] 王一葉.比較PCR 檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果.中外醫(yī)療， 2013， 32（24）：192-193.

[收稿日期：2015-11-16]