厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中濃度與其療效的相關性研究

李曉琴　王秀麗　朱紅革　展翼翼　劉春玲

830011 新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院

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厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中濃度與其療效的相關性研究

李曉琴王秀麗朱紅革展翼翼劉春玲

830011 新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院

【摘要】目的檢測厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度，并對其與NSCLC患者療效間的相關性進行分析。方法隨機選取40只健康大鼠，雌雄各半。實驗前1日禁食12 h，實驗當日分別按照10 mg/kg的劑量注入大鼠尾靜脈。另外選取2011年1月至2014年12年收治的110例NSCLC患者作為研究對象，對其臨床資料進行回顧性分析。對比大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平，并對兩者間相關性進行分析；參照評價標準將110例NSCLC患者分為CR組、PR組、SD組及PD組，對比不同組間的血漿厄洛替尼濃度，并對臨床療效與血漿厄洛替尼濃度的相關性進行分析。結果大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)。不同時刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間均呈顯著正相關(P<0.05)。不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度存在顯著性差異(P<0.05)，組間多重比較結果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組> PR組> SD組> PD組(P<0.05)。結論厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度呈顯著正相關，且患者療效與其血漿中藥物濃度具有相關性，血漿濃度越高，療效越好，故厄洛替尼在治療非小細胞肺癌腦轉(zhuǎn)移中具有重要的臨床意義，可作為放療等治療手段的有力補充。

【關鍵詞】厄洛替尼；腦脊液；血漿；療效；相關性

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:353～355)

肺癌是臨床最常見的惡性腫瘤之一，非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占到80%左右[1]，其中30%的病例會在疾病不同階段發(fā)生腦轉(zhuǎn)移[2]。近年來隨著肺部原發(fā)病灶治療手段的日趨完善，腦轉(zhuǎn)移病灶的局控率成為臨床研究的熱點[3]。患者常出現(xiàn)原發(fā)灶穩(wěn)定或好轉(zhuǎn)，而顱內(nèi)病灶治療失敗的異質(zhì)性現(xiàn)象[4]。本研究擬在使用高效液相色譜法測定大鼠體內(nèi)血漿中與腦脊液中厄洛替尼含量，其數(shù)據(jù)進行對比，以分析厄洛替尼的療效、毒性作用及在腦脊液和血漿中濃度的差異，從而解釋NSCLC腦轉(zhuǎn)移患者在臨床治療中所出現(xiàn)的異質(zhì)性現(xiàn)象，為臨床用藥提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物隨機選取40只健康大鼠，雌雄各半。實驗前1日禁食12 h，實驗當日將厄洛替尼按照10 mg/kg的劑量注入大鼠尾靜脈。

1.1.2臨床資料選取2011年1月至2014年12年我院收治的110例NSCLC患者作為研究對象，對其臨床資料進行回顧性分析。所有患者均經(jīng)組織病理或細胞學確診為NSCLC，并經(jīng) CT或MRI檢查證實存在腦轉(zhuǎn)移。110例患者中男性42例，女性68例；年齡31～75歲，平均年齡(55.45±6.84)歲；其中腺癌97例、大細胞癌13例。所有患者均進行厄洛替尼口服治療，并在治療過程中進行厄洛替尼血漿濃度檢測。治療2個月后進行療效分析，參照RECIST評價標準，將臨床療效分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病灶穩(wěn)定(SD)及疾病進展(PD)。

1.2檢測方法

選取10只大鼠(5雄5雌)分別于1、4、12、24 h后取靜脈血和腦脊液。將標本5 000 r/min 進行離心10 min，提取上清液，于-20 ℃保存。用于高效液相色譜測取厄洛替尼含量。大鼠及NSCLC患者血漿厄洛替尼含量測定：取400 μL血漿置肝素抗凝管中，加100 μL內(nèi)標溶液，5 mL混合溶液(乙腈一二氯甲烷=1∶4，v/v)，振蕩混合10 min，3 000 r/min離心10 min。取上清液于45 ℃氮氣吹干，殘渣用100 μL流動相復溶，過微孔濾膜(0.45 μm)，取20 μL進HPLC分析。腦脊液不需抗凝劑，其他同上。

1.3研究方法

對比大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平；并對兩者間相關性進行分析?；仡櫺苑治?10例NSCLC患者的臨床資料，參照評價標準將其分為CR組、PR組、SD組及PD組，對比不同組間的血漿厄洛替尼濃度，并對臨床療效與血漿厄洛替尼濃度的相關性進行分析。

1.4統(tǒng)計學分析

2結果

2.1大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平比較及相關性分析

大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)。見表1。不同時刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間呈顯著正相關(P<0.05)。見表1。

表1　大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度

2.2不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度比較

不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度存在統(tǒng)計學差異(P<0.05)，組間多重比較結果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組>PR組>SD組>PD組(P<0.05)。見表2。

表2　不同療效患者組間血漿中厄洛替尼

3討論

非小細胞肺癌一旦發(fā)生腦轉(zhuǎn)移后則中位生存時間較短，預后較差。一般認為，由于血腦屏障的存在，在肺癌腦轉(zhuǎn)移時，絕大部分化療藥物均無法在腦脊液中達到有效的藥物濃度，因此對腦轉(zhuǎn)移灶作用有限[5]。隨著研究的進展，小分子酪氨酸激酶抑制劑(TKI)逐漸受到人們關注。厄洛替尼是目前臨床上治療表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)敏感突變的非小細胞肺癌的一線用藥[6]。作為1種新型小分子EGFR-TKI，能透過血腦屏障，在EGFR過量表達的實體瘤細胞中穿過細胞膜，與ATP競爭性結合EGFR胞內(nèi)部分，并與腦內(nèi)EGFR分子的酪氨酸結構域特異性結合，阻斷信號傳導，進而抑制酪氨酸激酶活性，降低腫瘤細胞黏附能力、促進腫瘤細胞凋亡[7-8]。與吉非替尼相比，厄洛替尼與表皮生長因子受體酪氨酸激酶區(qū)ATP結合的親和力更高、特異性更強[9]。

本研究中，對大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平比較，結果顯示大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)，且不同時刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間均呈顯著正相關(P<0.05)。符合藥物的代謝動力學特點。此外對不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度進行比較，結果顯示組間存在顯著性差異(P<0.05)，組間多重比較結果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組> PR組> SD組> PD組(P<0.05)。提示患者的治療療效與其血漿中的厄洛替尼濃度呈正相關，血漿中濃度越高，療效越好，進一步印證了厄洛替尼在殺滅腫瘤細胞中的積極作用。而對于厄洛替尼治療顱內(nèi)轉(zhuǎn)移失敗者，可采用高劑量脈沖式的給藥方法，以提高腦脊液濃度，縮小腦部轉(zhuǎn)移病灶[10]。

綜上所述，厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度呈顯著正相關，且患者療效與其血漿中藥物濃度具有相關性，血漿濃度越高，療效越好，故厄洛替尼在治療非小細胞肺癌腦轉(zhuǎn)移中具有重要的臨床意義，可作為放療等治療手段的有力補充。

參考文獻

[1]嚴麗華，吳向坤.化療間期序貫應用厄洛替尼治療晚期非小細胞肺癌的臨床療效觀察〔J〕.中國實用醫(yī)藥，2015，11(7)：144-145.

[2]張潔霞，蔡迪，李時悅，等.非小細胞肺癌腦轉(zhuǎn)移厄洛替尼和吉非替尼治療臨床比較〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2015，8(4)：285-288.

[3]何志惠，洪濤，蘇群豪，等.自體DC/CIK聯(lián)合厄洛替尼維持治療老年晚期非小細胞肺癌的臨床療效分析〔J〕.腫瘤防治研究，2014，10(6)：645-648.

[4]郝艷坤，杜宇，王涓.厄洛替尼輔助全腦放療治療肺癌腦轉(zhuǎn)移療效分析〔J〕.醫(yī)學綜述，2014，14(6)：2660-2661.

[5]展翼翼，顧國民.厄洛替尼治療化療后進展的晚期非小細胞肺癌的臨床療效觀察〔J〕.吉林醫(yī)學，2014，35(26)：5800.

[6]劉姣.厄洛替尼在Lewis肺癌小鼠時辰藥代動力學特點及相關代謝酶晝夜節(jié)律性的研究〔D〕.青島大學，2014.

[7]傅小龍，牛飛玉.吉非替尼/厄洛替尼聯(lián)合同期放療治療晚期肺癌〔J〕.循證醫(yī)學，2013，4(1)：41-42.

[8]占美，劉瀟，盧靜，等.厄洛替尼治療老年非小細胞肺癌的系統(tǒng)評價〔J〕.中國循證醫(yī)學雜志，2013，14(9)：1084-1089.

[9]周迪.厄洛替尼聯(lián)合全腦放療治療非小細胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的臨床研究〔D〕.吉林大學，2013.

[10]劉璐，王永生，何雅億，等.晚期非小細胞肺癌患者血清細胞因子IL-1β、IL-2R、IL-6及TNF-α水平與厄洛替尼療效的相關性研究〔J〕.第三軍醫(yī)大學學報，2012，20(9)：2056-2059.

(編輯：甘艷)

Concentration of Erlotinib in Rat Cerebrospinal Fluid and Plasma and its Correlation with Efficacy

LIXiaoqin，WANGXiuli，ZHUHongge，etal.

AffiliatedTumorHospitalofXinjiangMedicalUniversity，Urumqi，830011

【Abstract】ObjectiveTo detect the concentration of Erlotinib in rat cerebrospinal fluid and plasma and its correlation with efficacy.Methods40 healthy rats were selected，half male and half female rats.Before testing，the rats took absolute diet for 12 h.10 mg/kg of Erlotinib were separately injected into the tail vein of rats.The clinical data of 110 NSCLC patients were reviewed.The concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 and 24 h were compared and their correlations were analyzed；according to evaluation criterion，110 NSCLC patients were divided into CR group，PR group，SD group and PD group.The concentration of Erlotinib of the 3 groups were compared.The correlation of clinical effects with the concentration of Erlotinib in plasma was analyzed.ResultsThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 h and 24 h were significantly different.As time passed，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma was gradually reduced(P<0.05)；at different moments，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma had a significant positive correlation (P<0.05)；the concentration levels of Erlotinib in plasma was significantly different(P<0.05)；based on the multiple comparisons，the plasma concentration was arranged from high to low：CR group> PR group > SD group > PD group (P<0.05).ConclusionThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma have a significant positive relationship while the clinical efficacy is correlated with the concentration of Erlotinib in plasma.The higher concentration is，the better the clinical efficacy is.Erlotinib has an important clinical significance in the treatment of NSCLC metastasis and can be supplementary to radiation treatment and others.

【Key words】Erlotinib；Cerebrospinal fluid；Plasma；Curative effect；Correlation

(收稿日期2015-05-07修回日期 2015-09-10)

中圖分類號：R734.2

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2016)03-0353-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.03.002

通訊作者：劉春玲

基金項目：新疆醫(yī)科大學創(chuàng)新基金課題(編號：XJC201282)；吳階平醫(yī)學基金會臨床科研專項資助基金(編號：320.6750.13136)