• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    豐年蟲卵殼色素的制備及穩(wěn)定性與體外抗氧化活性研究

    2016-04-15 08:55:14許彥騰張建新何秋芬西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院陜西楊凌712100
    食品科學(xué) 2016年5期
    關(guān)鍵詞:色素穩(wěn)定性

    許彥騰,張建新,何秋芬,文 歡(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,陜西 楊凌 712100)

    ?

    豐年蟲卵殼色素的制備及穩(wěn)定性與體外抗氧化活性研究

    許彥騰,張建新*,何秋芬,文 歡
    (西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,陜西 楊凌 712100)

    摘 要:利用超聲波輔助乙醇溶液提取豐年蟲卵殼色素,采用紅外光譜對色素結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步鑒定,通過紫外-可見掃描光譜分別研究光照、溫度、pH值、食品添加劑、金屬離子及氧化還原劑對色素穩(wěn)定性的影響,分別測定色素的總抗氧化能力、羥自由基(·OH)與2,2’-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)free radical,ABTS+·)清除活性,以考察色素體外抗氧化活性。結(jié)果表明:豐年蟲卵殼色素為黑褐色粉末,可能由一類含有羥基、烷烴—CH2、碳碳三鍵及醚鍵的酰胺-芳香族復(fù)合物組成,其提取液在397 nm波長處獲得最大吸收峰。色素對光和高溫敏感,pH值變化、蔗糖、碳酸鈉、碳酸氫鈉、檸檬酸鈉、Na+及K+對色素穩(wěn)定性影響較小,苯甲酸鈉、Ca2+、Zn2+、Fe3+、Fe2+、Cu2+及Pb2+則對色素均具有一定程度的破壞,酸性條件、檸檬酸、酒石酸、可溶性淀粉、Mg2+及Al3+則對色素具有增色效應(yīng)。豐年蟲卵殼色素容易被氧化劑破壞,但具有較高的耐還原性和良好的體外抗氧化活性,清除·OH與ABTS+·的IC50分別為6.104、0.377 mg/mL。說明該色素可作為天然添加劑應(yīng)用于食品中,起到一定的抗氧化作用。

    關(guān)鍵詞:豐年蟲卵殼;色素;穩(wěn)定性;體外抗氧化

    引文格式:

    許彥騰,張建新,何秋芬,等.豐年蟲卵殼色素的制備及穩(wěn)定性與體外抗氧化活性研究[J].食品科學(xué),2016,37(5):94-101.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605018.http://www.spkx.net.cn

    XU Yanteng,ZHANG Jianxin,HE Qiufen,et al.Preparation,stability and in vitro antioxidant activity of pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell[J].Food Science,2016,37(5):94-101.(in Chinese with English abstract)DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605018.http://www.spkx.net.cn

    食用色素按照來源途徑可分為兩大類:合成色素和天然色素。合成色素由于其色澤艷麗、著色力強(qiáng)、穩(wěn)定性好、成本較低等優(yōu)點(diǎn),在食品行業(yè)應(yīng)用較為廣泛。但越來越多的研究表明不少合成色素具有慢性毒性,甚至可致癌[1-2]。天然色素主要是從植物[3-7]與微生物[8-11]中獲取,具有較高的食用安全性,部分天然色素還具有保健功能活性[12-16]。因此,隨著科技的進(jìn)步和生活水平的提高,天然色素越來越被人們關(guān)注[3,12-19 ]。

    豐年蟲(Chirocephalus diaphanous),又名豐年蝦、仙女蝦[20-21],常見于中亞、歐洲、北美西部、非洲干旱地帶及澳大利亞的淡水池塘中。我國豐年蟲主要分布在西部內(nèi)陸鹽井、鹽湖等高鹽分水體中[22]。豐年蟲生命力旺盛,生活周期短,多以浮游生物為食物,且進(jìn)食量較大[23]。我國豐年蟲資源豐富,開發(fā)潛力大。然而,豐年蟲主要作為漁業(yè)飼料,利用途徑少,造成大量寶貴的資源被浪費(fèi)[23]。有關(guān)豐年蟲的研究,目前還主要集中在養(yǎng)殖技術(shù)、生理生化及生態(tài)與習(xí)性等方面,缺乏對其營養(yǎng)價值及工業(yè)應(yīng)用的深入研究,對豐年蟲卵殼色素的研究還未見報道。本實(shí)驗利用超聲波輔助乙醇-水體系提取、制備豐年蟲卵殼色素,研究了光照、溫度、pH值、食品添加劑、金屬離子及氧化還原劑對該色素穩(wěn)定性的影響,并從總抗氧化能力、羥自由基(·OH)與2,2’-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)free radical,ABTS+·)清除活性對該色素體外抗氧化能力進(jìn)行了初步探索,以期為豐年蟲卵殼色素的深入研發(fā)提供一定數(shù)據(jù)參考。

    1 材料與方法

    1.1材料與試劑

    豐年蟲卵殼,陜西省定邊縣華威生物科技有限公司提供。

    ABTS(純度>98%) 上海如吉生物科技發(fā)展有限公司;KBr(光譜純) 美國PIKE Technologies公司;其他化學(xué)試劑均為分析純。

    1.2儀器與設(shè)備

    101-2型電熱鼓風(fēng)干燥箱、HH-4型電熱恒溫水浴鍋北京科偉永興儀器有限公司;JP-100A-2型高速多功能粉碎機(jī) 上海市永久品工貿(mào)有限公司;100 目(孔徑約0.1 mm)標(biāo)準(zhǔn)檢驗篩 浙江省上虞市大亨橋化驗儀器廠;FA2004型電子分析天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;KQ-600DB型數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;SC-3610型低速離心機(jī) 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司;HS-840u型超凈工作臺 蘇州凈化儀器設(shè)備有限公司;R250型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海申生科技有限公司;SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長城科工貿(mào)有限公司;LGJ-100型冷凍干燥機(jī) 北京四環(huán)科學(xué)儀器廠;UV-2550型紫外-可見分光光度計 日本島津公司;Avatar330型紅外光譜儀 美國尼高力儀器公司。

    1.3方法

    1.3.1豐年蟲卵殼預(yù)處理

    將豐年蟲卵殼于50℃鼓風(fēng)干燥至恒質(zhì)量,粉碎。干粉于40 ℃索氏抽提10 h,除去脂肪,室溫自然干燥至恒質(zhì)量,過篩,密封,冷藏備用。

    1.3.2豐年蟲卵殼色素提取液的制備

    根據(jù)之前的提取工藝優(yōu)化實(shí)驗結(jié)果,準(zhǔn)確稱取1 g豐年蟲卵殼脫脂粉,溶于50 mL的體積分?jǐn)?shù)60%乙醇,于80℃、360 W條件下超聲輔助提取49 min,之后4 500 r/min離心10 min,將上清液稀釋于200~700 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外-可見光譜掃描,觀察提取溶液的吸收峰。

    1.3.3豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性研究

    色素保存率計算公式如下:

    式中:A0為初始色素溶液或空白對照色素溶液在最大吸收峰處吸光度;At為色素溶液在最大吸收峰處t時間后的吸光度。

    1.3.3.1光照對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    將相同體積稀釋后的色素溶液,裝入具塞比色管中,分別置于室內(nèi)暗處(柜內(nèi),報紙包扎)、室外自然光下及超凈工作臺紫外燈下,及時記錄溶液初始吸光度,之后每1 d取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.3.2溫度對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    將相同體積稀釋后的色素溶液,裝入具塞比色管中,分別置于4、40、60、80 ℃的避光環(huán)境中,及時記錄溶液初始吸光度,之后每1 h取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.3.3pH值對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    將稀釋后的色素溶液分裝于6 個錐形瓶,分別用移液器吸取1 mol/L的HCl和NaOH將其pH值分別調(diào)節(jié)至2、4、6、8、10、12,用相同體積蒸餾水代替酸堿溶液加入色素溶液,作為空白對照。色素溶液置于避光環(huán)境中,每1 h取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.3.4食品添加劑對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    準(zhǔn)確稱取蔗糖、葡萄糖、苯甲酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、酒石酸均0.2 g及可溶性淀粉0.05 g,定容于100 mL。將各添加劑溶液與稀釋后的色素溶液等體積混合,用蒸餾水代替添加劑溶液作空白對照?;旌先芤褐糜诒芄猸h(huán)境中,及時記錄溶液初始吸光度,之后每1 h取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.3.5 金屬離子對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    分別用NaCl、KCl、CaCl2、MgSO4、ZnCl2、FeCl3、FeSO4·7H2O、CuSO4、(CH3COO)2Pb及AlCl3配制0.05 mol/L的Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe3+、Fe2+、Cu2+、Pb2+及Al3+溶液并與稀釋后的色素溶液等體積混合,用蒸餾水代替添加劑溶液做空白對照?;旌先芤褐糜诒芄猸h(huán)境中,及時記錄溶液初始吸光度,之后每1 h取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.3.6氧化還原劑對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    分別配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%、0.2%、1%、2%、10%的過氧化氫溶液與質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.002%、0.01%、0.02%、0.1%、0.2%的抗壞血酸溶液,并與稀釋后的色素溶液等體積混合,用蒸餾水代替添加劑溶液做空白對照?;旌先芤褐糜诒芄猸h(huán)境中,及時記錄溶液初始吸光度,之后每1 h取樣觀察顏色變化,并測定吸光度。

    1.3.4豐年蟲卵殼色素固體的制備

    將1.3.2節(jié)制備的色素提取液于35 ℃條件下120 r/min旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)2 h進(jìn)行濃縮。濃縮液于-20 ℃冷凍2 d,之后冷凍干燥24 h(真空度5 Pa),得色素固體。

    1.3.5豐年蟲卵殼色素體外抗氧化活性研究

    分別配制一系列質(zhì)量濃度的豐年蟲卵殼色素溶液,采用抗壞血酸作為陽性對照。IC50表示樣品對自由基清除達(dá)到50%時的最低有效濃度[24-25]。

    1.3.5.1總抗氧化能力的測定

    分別吸取樣液、0.2 mol/L pH 6.6的磷酸鹽緩沖液、1 g/100 mL鐵氰化鉀溶液各1 mL于具塞比色管中,搖勻,50 ℃恒溫水浴20 min,之后加入1 mL的10 g/100 mL三氯乙酸,振蕩均勻,4 500 r/min離心5 min。取2 mL上清液與2 mL蒸餾水混勻,加入的400 μL的0.1 g/100 mL三氯化鐵溶液,搖勻后,于700 nm波長處測定吸光度AX。樣品對照組(Ax0)用蒸餾水代替鐵氰化鉀溶液??偪寡趸芰Ρ硎緸椋篈700 nm=Ax-Ax0,差值越大代表總抗氧化能力越強(qiáng)。

    1.3.5.2·OH清除活性的測定

    依次吸取樣液、9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液、9 mmol/L硫酸亞鐵溶液及8.8 mmol/L過氧化氫溶液1 mL于比色管中,37 ℃恒溫水浴30 min,4 500 r/min離心5 min,取上清液,于510 nm波長處測定吸光度(Ax),樣品對照組(Ax0)用蒸餾水代替過氧化氫溶液,再用蒸餾水代替色素溶液作為模型對照組(A0)?!H清除率計算公式如下。

    1.3.5.3ABTS+·清除活性的測定

    參照文獻(xiàn)[24]的方法,并稍作修改:將14.8 mmol/L ABTS溶液與5.2 mmol/L過硫酸鉀溶液等體積混合,于避光環(huán)境中室溫反應(yīng)過夜,即得母液。將1 mL母液用一定體積的甲醇稀釋,得ABTS工作液,并確保工作液在734 nm波長處吸光度為1.10±0.02。分別吸取1 mL樣液與3 mL ABTS工作液于比色管中,混勻,避光反應(yīng)10 min,4 500 r/min離心5 min,于734 nm波長處測定上清液吸光度Ax。樣品對照組(Ax0)用甲醇代替ABTS工作液,用蒸餾水代色素溶液作為模型對照組(A0)。ABTS+·清除率計算公式如下。

    1.3.6紅外光譜掃描

    將2 mg干燥的豐年蟲卵殼色素與200 mg溴化鉀(120 ℃干燥3 h)混勻,研磨,壓片,于分辨率2 cm-1、4 000~400 cm-1范圍內(nèi)進(jìn)行紅外光譜掃描。

    2 結(jié)果與分析

    2.1豐年蟲卵殼色素紫外-可見與紅外光譜特性

    豐年蟲卵殼色素提取液為黃褐色。由圖1可知,色素提取液分別在397 nm和661 nm波長處出現(xiàn)吸收峰,其中397 nm波長處吸收峰非常明顯。因此,將397 nm波長作為豐年蟲卵殼色素檢測波長。

    圖1 豐年蟲卵殼色素提取液紫外-可見光譜圖Fig.1 Ultraviolet-visible spectrum of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    豐年蟲卵殼色素為黑褐色。由圖2可知,色素在3 400 cm-1處出現(xiàn)典型的—OH吸收峰,在2 922 cm-1處出現(xiàn)—CH2—吸收峰,在2 365 cm-1處出現(xiàn)—C≡C—吸收峰,1 655 cm-1處吸收峰可能由酰胺特征基團(tuán)R—CO—NH2中—C=O—伸縮振動產(chǎn)生,1 420 cm-1處吸收峰可能由芳香族亞硝基—N=O伸縮振動產(chǎn)生,1 113 cm-1處吸收峰可能由醚類特征基團(tuán)—C—O—C—伸縮振動產(chǎn)生。對1 600~1 400 cm-1范圍內(nèi)光譜的雜峰進(jìn)行放大分析,發(fā)現(xiàn)1 560、1 543、1 491、1 458 cm-1處均出現(xiàn)吸收峰,符合苯環(huán)的振動吸收峰特征,同時增加了芳香族亞硝基存在的可能性。

    圖2 豐年蟲卵殼色素紅外光譜Fig.2  Infrared spectrum for the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    2.2豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性分析

    2.2.1光照對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    圖3 光照對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Fig.3 Effect of light on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    由圖3可知,豐年蟲卵殼色素對光照較為敏感。其中,室外自然光對色素的破壞程度最大,僅在2 d時間內(nèi)色素保存率便下降至36.73%,7 d后色素溶液接近無色透明。而紫外光照射下色素保存率基本呈線性下降趨勢,在第7天剩余47.21%。暗處的色素基本穩(wěn)定,保存率幾乎沒有變化,7 d后仍為95.23%。所以,豐年蟲卵殼色素在貯藏和使用時應(yīng)避免長時間接觸光照。

    2.2.2溫度對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    圖4 溫度對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Fig.4 Effect of temperature on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    圖5 不同溫度下處理1 h的豐年蟲卵殼色素溶液紫外-可見掃描光譜Fig.5 Ultraviolet-visible spectra of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell at different temperatures for 1 h

    由圖4、5可知,豐年蟲卵殼色素在4、40、60℃環(huán)境中較為穩(wěn)定,6 h后色素保存率仍分別為99.72%、96.60%、96.67%。80 ℃對色素穩(wěn)定性影響十分明顯,由圖4可知,僅1 h后,色素保存率便上升至153.97%,之后一直居高不下,但色素溶液剛從80 ℃水浴中取出時呈澄清的淺黃色,冷卻至室溫后則變混濁。由圖5可知,80 ℃水浴1 h的色素溶液紫外-可見光譜掃描與其他樣液有很大區(qū)別,且雜峰較多,故可推測色素長時間在80 ℃環(huán)境中被一定程度破壞,色素不穩(wěn)定。

    2.2.3pH值對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    圖6 pH值對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Fig.6 Effect of pH on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    由圖6可知,pH值為2、4、6時,豐年蟲卵殼色素保存率顯著提高,1 h后即分別達(dá)到138.99%、131.28%、119.04%,之后趨于穩(wěn)定。pH值為8、10時,色素基本穩(wěn)定,保存率變化不大,6 h后仍為98.90%、98.67%。pH值為12時,色素保存率略有下降,6 h后為92.86%。因此,pH值對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性影響不大,且酸性環(huán)境具有增色效果。

    2.2.4食品添加劑對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    由表1可知,葡萄糖對色素基本沒影響,6 h后色素保存率仍為96.74%。其他食品添加劑對色素穩(wěn)定性均有一定影響。其中,蔗糖、碳酸鈉、碳酸氫鈉、檸檬酸鈉對色素穩(wěn)定性影響較低,6 h后色素保存率分別為93.71%、90.38%、90.41%、93.87%;苯甲酸鈉對色素破壞較大,6 h后色素保存率為84.50%。并且,以上添加劑對色素的減色效果隨著時間延長逐漸增大。而可溶性淀粉對色素有較弱的增色作用,1 h后色素保存率為102.08%,之后趨于穩(wěn)定;檸檬酸和酒石酸對色素增色效果明顯,1 h后色素保存率分別為143.74%和145.92%,之后隨時間延長緩慢增加。綜上,食品添加劑對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性影響不大,適當(dāng)使用酸性添加劑可起到良好的增色效果。

    表1 食品添加劑對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Table 1 Effect of food additives on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    2.2.5金屬離子對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    表2 金屬離子對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Table 2 Effect of metal ions on the stability of the pigment from ous eggsshheellll

    表3 金屬離子對豐年蟲卵殼色素溶液顏色的影響Table 3 Effect of metal ions on the color of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    結(jié)合表2、3和圖7可知,Na+和K+對色素穩(wěn)定性基本沒有影響,其掃描光譜基本與空白對照完全吻合,6 h內(nèi)色素保存率均在95%以上,變化不大。Mg2+和Al3+對色素均具有一定增色效果,6 h內(nèi),Mg2+處理色素后的保存率在109.66%~120.37%之間浮動,而Al3+處理色素后的保存率在131.56%~146.23%之間浮動。其余金屬離子對色素均有一定破壞作用。Ca2+起初有一定增色效果,但在2~3 h出現(xiàn)沉淀后,減色效果隨時間延長越來越明顯,6 h后色素保存率為60.74%。Zn2+加入色素溶液后立即產(chǎn)生沉淀,并且色素特征吸收峰消失,在397 nm波長處檢測的色素保存率隨時間延長逐漸下降,6 h后僅為30.87%。Fe3+和Fe2+均導(dǎo)致色素吸收峰消失,并自身顏色蓋過色素顏色,其中Fe2+還陸續(xù)致使沉淀出現(xiàn)。Cu2+和Pb2+開始時均導(dǎo)致色素溶液混濁,后續(xù)產(chǎn)生沉淀,其中,Cu2+自身顏色蓋過色素顏色,但保留了色素吸收峰,隨時間延長峰值逐漸降低,6 h后色素保存率為48.77%;Pb2+于1 h產(chǎn)生大量沉淀后,色素吸收峰消失,于397 nm波長處檢測的色素保存率急劇下降,6 h后色素保存率僅為16.48%。因此,豐年蟲卵殼色素在貯藏和使用過程中避免接觸對其穩(wěn)定性影響較大的金屬鹽類。

    圖7 不同金屬離子處理1 h(A)與6 h(B)時的豐年蟲卵殼色素溶液紫外-可見掃描光譜Fig.7 Ultraviolet-visible spectra of the pigment from Chirocephalus diaphanous with different metal ions for 1 h(A)and 6 h(B)

    2.2.6氧化劑過氧化氫對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    圖8 過氧化氫對豐年蟲卵殼色素溶液紫外-可見掃描光譜的影響Fig.8 Effect of H2O2on the ultraviolet-visible spectrum of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    由圖8可知,過氧化氫處理后的色素溶液,特征吸收峰消失。由表4可知,不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的過氧化氫對色素穩(wěn)定性均具有顯著影響,且色素保存率隨著時間的延長不斷下降,且該降低趨勢隨著過氧化氫質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加愈發(fā)明顯,過氧化氫質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%時,6 h后的色素保存率僅為21.86%。所以,豐年蟲卵殼色素耐氧化性較差,并可初步推斷該色素具有一定的抗氧化活性基團(tuán)。

    表4 過氧化氫對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Table 4 Effect of H on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    2.2.7還原劑抗壞血酸對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響

    表5 抗壞血酸對豐年蟲卵殼色素穩(wěn)定性的影響Table 5 Effect of ascorbic acid on the stability of the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell

    由表5可知,不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的抗壞血酸對色素起初均有一定增色效果,其中0.001%的抗壞血酸處理6 h后,色素保存率降至87.51%,反而在一定程度上破壞了色素穩(wěn)定性;0.005%的抗壞血酸處理6 h后,色素保存率為97.99%,下降不明顯;而0.01%、0.05%和0.1%的抗壞血酸處理過程中增色效果較為明顯,并且色素保存率下降趨勢緩慢,6 h后分別為106.50%、120.56%和123.82%。所以,豐年蟲卵殼色素具有較高的耐還原性,并且在加工使用時,適量添加還原劑可產(chǎn)生一定的增色效果。

    2.3豐年蟲卵殼色素體外抗氧化活性分析

    2.3.1總抗氧化能力

    由圖9可知,豐年蟲卵殼色素與抗壞血酸均具有一定的抗氧化能力,且隨著質(zhì)量濃度的增加而上升。其中,豐年蟲卵殼色素在質(zhì)量濃度0.2~10.0 mg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系,線性擬合方程為y=0.109 9x+0.080 6(R2=0.988 8);抗壞血酸則在質(zhì)量濃度0.02~0.20 mg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系,擬合方程為 y=9.246 7x+0.144 1(R2=0.994 5)。通過擬合方程分別計算出各樣品在A700 nm=1時的質(zhì)量濃度:色素8.366 mg/mL、抗壞血酸0.093 mg/mL,說明豐年蟲卵殼色素總抗氧化能力弱于抗壞血酸,約是抗壞血酸的0.011 倍。

    圖9 抗壞血酸(A)與豐年蟲色素(B)總抗氧化能力Fig.9 Total antioxidant activities of ascorbic acid(A)and the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell(B)

    2.3.2·OH清除活性

    圖10 抗壞血酸(A)與豐年蟲色素(B)的·OH清除活性Fig.10 Hydroxyl radical scavenging activity of ascorbic acid(A)and the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell(B)

    由圖10可知,豐年蟲卵殼色素與抗壞血酸均具有一定的·OH清除活性,且隨著質(zhì)量濃度的增加而逐漸增強(qiáng)。其中,豐年蟲卵殼色素在質(zhì)量濃度0.4~10.0 mg/mL范圍內(nèi)與·OH清除率呈良好線性關(guān)系,線性擬合方程為y=7.915 3x+1.683 1(R2=0.994 5);抗壞血酸則在質(zhì)量濃度0.1~0.5 mg/mL范圍內(nèi)與·OH清除率呈良好線性關(guān)系,擬合方程為y=186.558 1x+1.357 4(R2=0.983 5)。通過擬合方程分別計算出各樣品的IC50:色素6.104 mg/mL、抗壞血酸0.261 mg/mL,說明豐年蟲卵殼色素·OH清除活性弱于抗壞血酸,約是抗壞血酸的0.043 倍。

    2.3.3ABTS+·清除活性

    圖11 抗壞血酸(A)與豐年蟲色素(B)對ABBTTSS+·的清除活性Fig.11 ABTS radical scavenging activity of ascorbic acid(A)and the pigment from Chirocephalus diaphanous eggshell(B)

    由圖11可知,豐年蟲卵殼色素與抗壞血酸均具有一定的ABTS+·清除活性,且隨著質(zhì)量濃度的增加而逐漸增強(qiáng)。其中,色素在質(zhì)量濃度0.2~1.0 mg/mL范圍內(nèi)與ABTS+·清除率呈良好線性關(guān)系,線性擬合方程為y=66.351 0x+25.016 7(R2=0.939 8);抗壞血酸則在質(zhì) 量濃度0.005~0.025 mg/mL范圍內(nèi)與ABTS+·清除率呈良好線性關(guān)系,擬合方程為y=2 234.181 6x+13.327 3 (R2=0.942 5)。通過擬合方程分別計算出各樣品的IC50:色素0.377 mg/mL、抗壞血酸0.016 mg/mL,說明豐年蟲卵殼色素ABTS+·清除活性弱于抗壞血酸,約是抗壞血酸的0.042 倍。

    3 結(jié) 論

    豐年蟲卵殼色素為黑褐色粉末,其溶液在397 nm波長處具有最大吸收峰。紅外光譜表明豐年蟲卵殼色素可能是由一類含有羥基、烷烴—CH2、碳碳三鍵及醚鍵的酰胺-芳香族復(fù)合物組成的混合物。

    豐年蟲卵殼色素對光較為敏感,避光環(huán)境中很穩(wěn)定。4、40、60 ℃及室溫對色素基本無影響,80 ℃會一定程度影響色素穩(wěn)定性。pH值變化對色素穩(wěn)定性影響較小,且酸性條件對其具有增色效應(yīng)。不同食品添加劑對色素穩(wěn)定性影響不同:蔗糖、碳酸鈉、碳酸氫鈉及檸檬酸鈉對色素穩(wěn)定性影響較低,苯甲酸鈉對色素破壞較大,檸檬酸、酒石酸及可溶性淀粉則對色素具有增色效應(yīng)。不同金屬離子對色素穩(wěn)定性影響也不同:Na+和K+對色素穩(wěn)定性影響很小,Mg2+和Al3+對色素均具有增色效應(yīng),Ca2+、Zn2+、Fe3+、Fe2+、Cu2+及Pb2+則對色素均具有一定程度的破壞。色素容易被氧化劑破壞,卻具有較高的耐還原性,適量的還原劑對其具有增色效應(yīng)。

    豐年蟲卵殼色素具有一定的總抗氧化能力,清除·OH與ABTS+·的IC50分別為6.104、0.377 mg/mL,雖均弱于抗壞血酸,但作為天然添加劑應(yīng)用于食品中,仍可起到一定的抗氧化作用。

    參考文獻(xiàn):

    [1]李永祥,詹少華,蔡永萍,等.板栗殼色素的提取,純化及穩(wěn)定性[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報,2008,24(9):298-302.DOI:10.3321/j.issn:1002-6819.2008.09.060.

    [2]喬華,張生萬,李美萍,等.天然色素穩(wěn)定性研究及其新的類型劃分[J].食品科學(xué),2006,27(9):69-73.DOI:10.3321/j.issn:1002-6630.2006.09.011.

    [3]KHAN A A,IQBAL N,ADEEL S,et al.Extraction of natural dye from red calico leaves:gamma ray assisted improvements in colour strength and fastness properties[J].Dyes and Pigments,2014,103:50-54.DOI:10.1016/j.dyepig.2013.11.024.

    [4]呂曼曼,劉航,苗修港,等.超聲波輔助提取高粱全粉色素工藝及其體外抗氧化性分析[J].食品科學(xué),2014,35(16):39-45.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201416008.

    [5]SWAMY G J,SANGAMITHRA A,CHANDRASEKAR V.Response surface modeling and process optimization of aqueous extraction of natural pigments from Beta vulgaris using Box-Behnken design of experiments[J].Dyes and Pigments,2014,111:64-74.DOI:10.1016/j.dyepig.2014.05.028

    [6]曾惠琴,張艷明,金輝.黑米色素穩(wěn)定性研究[J].食品研究與開發(fā),2014,35(19):17-20.DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2014.19.005.

    [7]丁月,徐超,陳霞霞,等.正交試驗優(yōu)化鼠曲草色素提取及其穩(wěn)定性[J].食品科學(xué),2013,34(10):103-106.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201310022.

    [8]張慶慶,張帝,湯文晶,等.水溶性和醇溶性紅曲色素的光穩(wěn)定性[J].食品科學(xué),2015,36(1):94-98.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201501018.

    [9]VELMURUGAN P,KAMALA-KANNAN S,BALACHANDAR V,et al.Natural pigment extraction from five filamentous fungi for industrial applications and dyeing of leather[J].Carbohydrate Polymers,2010,79(2):262-268.DOI:10.1016/j.carbpol.2009.07.058.

    [10]徐春明,李丹,王英英,等.食品色素的生物合成研究進(jìn)展[J].中國食品學(xué)報,2014,14(2):225-233.

    [11]魏娜,徐瓊,張寧,等.擲孢酵母類胡蘿卜素的提取與鑒定[J].食品科學(xué),2014,35(19):133-137.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201419028.

    [12]SANT’ANNA V,GURAK P D,FERREIRA MARCZAK L D,et al.Tracking bioactive compounds with colour changes in foods:a review[J].Dyes and Pigments,2013,98(3):601-608.DOI:10.1016/j.dyepig.2013.04.011.

    [13]李宗哲,李德遠(yuǎn),蘇丹,等.天然色素加工新進(jìn)展及發(fā)展對策研究[J].中國食物與營養(yǎng),2015,21(2):39-42.DOI:10.3969/j.issn.1006-9577.2015.02.010.

    [14]李鵬霄,茆廣華,趙婷,等.火棘果紅色素的提取及抗氧化活性[J].食品科學(xué),2013,34(17):116-119.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201317026.

    [15]盛瑋,高翔,薛建平,等.黑糯玉米色素清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的研究[J].食品科學(xué),2013,34(17):92-95.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201317021.

    [16]王威.常用天然色素抗氧活性的研究[J].食品科學(xué),2003,24(6):96-100.DOI:10.3321/j.issn:1002-6630.2003.06.022.

    [17]CEVALLOS-CASALS B A,CISNEROS-ZEVALLOS L.Stability of anthocyanin-based aqueous extracts of Andean purple corn and red-fleshed sweet potato compared to synthetic and natural colorants[J].Food Chemistry,2004,86(1):69-77.DOI:10.1016/j.foodchem.2003.08.011.

    [18]LEITNER P,FITZ-BINDER C,MAHMUD-ALI A,et al.Production of a concentrated natural dye from Canadian Goldenrod(Solidago canadensis)extracts[J].Dyes and Pigments,2012,93(1):1416-1421.DOI:10.1016/j.dyepig.2011.10.008.

    [19]張水軍,張軍兵,熊勇.天然食用色素的研究進(jìn)展[J].中國食品添加劑,2014(8):172-177.

    [20]張建新,王欣.豐年蟲油對高血脂癥小鼠降血脂及抗氧化作用[J].食品科學(xué),2014,35(1):258-260.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201323051.

    [21]聶路,張建新,李文學(xué),等.豐年蟲水溶性蛋白的分離純化及體外抗氧化性研究[J].食品科學(xué),2012,33(15):122-126.

    [22]黃曉燕.豐年蟲卵殼殼聚糖的提取工藝優(yōu)化與功能性研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2012.

    [23]謝紅民,刁治民,鄧君,等.青海鹵蟲資源現(xiàn)狀,開發(fā)利用及可持續(xù)發(fā)展[J].四川理工學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版),2006,19(1):93-96.DOI:10.3969/j.issn.1673-1549.2006.01.027.

    [24]許彥騰,張建新,宋真真,等.黑水虻幼蟲蛋白質(zhì)的制備及體外抗氧化活性[J].核農(nóng)學(xué)報,2014,28(11):2001-2009.DOI:10.11869/j.issn.100-8551.2014.11.2001.

    [25]劉洪對,于麗娜,高俊安,等.五種花生抗氧化肽體外抗氧化活性比較[J].核農(nóng)學(xué)報,2013,27(8):1162-1167; 1172.DOI:10.11869/hnxb.2013.08.1162.

    Preparation,Stability and in Vitro Antioxidant Activity of Pigment from Chirocephalus diaphanous Eggshell

    XU Yanteng,ZHANG Jianxin*,HE Qiufen,WEN Huan
    (College of Food Science and Engineering,Northwest A&F University,Yangling 712100,China)

    Abstract:Chirocephalus diaphanous eggshell was ground,defatted and sieved before being subjected to ultrasonic-assisted extraction with 60% ethanol solution as the solvent to obtain pigment.The structure of the pigment as well as its maximum absorption peak was determined by infrared and ultraviolet-visible spectroscopy.Then effects of light,temperature,pH,food additives,metal ions,oxidant and reductant on its stability were investigated.Total antioxidant capacity and hydroxyl and ABTS radical scavenging activities of the pigment were measured by in vitro.The results showed that the pigment was a dark brown powder composed of amide-aromatic compounds with –OH,–CH2–,–C≡C– and –C–O–C–,and the maximum absorption peak appeared at 397 nm.The pigment was sensitive to outdoor natural light,ultraviolet light and high temperature.pH,sacrose,sodium carbonate,sodium bicarbonate,sodium citrate,Na+and K+could affect the stability of the pigment.Acidic environment,citric acid,tartaric acid,soluble starch,Mg2+and Al3+had a hyperchromic effect on the pigment.However,sodium benzoate,Ca2+,Zn2+,Fe3+,Fe2+,Cu2+and Pb2+could destroy the pigment in different degrees.The pigment could be easily damaged by oxidant,but it had high capacity to resist reduction.The pigment possessed favorable total antioxidant activity,and its IC50for scavenging hydroxyl and ABTS radicals were 6.104 and 0.377 mg/mL,respectively.Therefore,the pigment can be used as a natural antioxidant.

    Key words:Chirocephalus diaphanous eggshell; pigment; stability; in vitro antioxidant activity

    中圖分類號:TS202

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號:1002-6630(2016)05-0094-08

    DOI:10.7506/spkx1002-6630-201605018

    *通信作者:張建新(1959—),男,教授,碩士,主要從事食品營養(yǎng)與安全及標(biāo)準(zhǔn)化研究。E-mail:zhangjx59@foxmail.com

    作者簡介:許彥騰(1989—),男,碩士研究生,主要從事食品營養(yǎng)與安全研究。E-mail:xuyanteng89@gmail.com

    收稿日期:2015-03-11

    猜你喜歡
    色素穩(wěn)定性
    娃娃樂園·綜合智能(2022年9期)2022-08-16 02:00:08
    一類k-Hessian方程解的存在性和漸近穩(wěn)定性
    SBR改性瀝青的穩(wěn)定性評價
    石油瀝青(2021年4期)2021-10-14 08:50:44
    “聽話”的色素
    非線性中立型變延遲微分方程的長時間穩(wěn)定性
    美發(fā)布允許果蔬汁作為食品色素添加劑使用指南
    甜油的生產(chǎn)及色素控制
    半動力系統(tǒng)中閉集的穩(wěn)定性和極限集映射的連續(xù)性
    天然色素及紅色素的研究進(jìn)展
    模糊微分方程的一致穩(wěn)定性
    日韩欧美一区视频在线观看| 一区在线观看完整版| 美女午夜性视频免费| 亚洲一区中文字幕在线| 日韩免费高清中文字幕av| 两个人看的免费小视频| 久久久国产一区二区| 国产麻豆69| 午夜av观看不卡| 亚洲第一区二区三区不卡| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 人体艺术视频欧美日本| 熟女av电影| 欧美日韩亚洲高清精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品一区二区三卡| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 日本wwww免费看| a级片在线免费高清观看视频| 99久久人妻综合| 伊人久久国产一区二区| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲成人手机| 一本久久精品| 一级a爱视频在线免费观看| 久久久久网色| 日本欧美国产在线视频| 又黄又粗又硬又大视频| 国产成人免费无遮挡视频| 日日撸夜夜添| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产片特级美女逼逼视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲经典国产精华液单| 久久精品夜色国产| 一二三四在线观看免费中文在| 色视频在线一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久久久久久久精品精品| 97在线视频观看| 免费观看无遮挡的男女| 亚洲色图综合在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| av国产久精品久网站免费入址| 午夜福利影视在线免费观看| 又黄又粗又硬又大视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 少妇熟女欧美另类| 国产乱来视频区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产成人aa在线观看| 中文字幕制服av| 日日啪夜夜爽| 丝瓜视频免费看黄片| 男女午夜视频在线观看| 亚洲国产看品久久| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲成人av在线免费| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美精品一区二区免费开放| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 七月丁香在线播放| 日韩中文字幕视频在线看片| 免费av中文字幕在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 高清不卡的av网站| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲国产精品成人久久小说| 一二三四在线观看免费中文在| 久久久精品区二区三区| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩一区二区视频免费看| 色94色欧美一区二区| 欧美精品一区二区大全| 久久人妻熟女aⅴ| 波多野结衣一区麻豆| 一区二区av电影网| 看非洲黑人一级黄片| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 有码 亚洲区| 26uuu在线亚洲综合色| 成人影院久久| 一级毛片我不卡| 欧美亚洲日本最大视频资源| 免费少妇av软件| 久久亚洲国产成人精品v| 久久久国产精品麻豆| 国产成人精品在线电影| 久久女婷五月综合色啪小说| 中文天堂在线官网| 精品久久久久久电影网| 男女国产视频网站| 国产视频首页在线观看| av卡一久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 波多野结衣av一区二区av| 国产精品一区二区在线不卡| 一级毛片我不卡| 晚上一个人看的免费电影| 国产日韩欧美在线精品| 国产精品久久久av美女十八| 丝瓜视频免费看黄片| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品久久久久久精品电影小说| 美女国产高潮福利片在线看| 热99国产精品久久久久久7| 9191精品国产免费久久| 久久久久久久精品精品| 国产精品欧美亚洲77777| 日韩大片免费观看网站| 一级毛片 在线播放| 26uuu在线亚洲综合色| 国产熟女午夜一区二区三区| 只有这里有精品99| av网站免费在线观看视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 在线精品无人区一区二区三| 国产一区有黄有色的免费视频| 婷婷成人精品国产| 美女视频免费永久观看网站| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日本欧美国产在线视频| 美女福利国产在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| av国产精品久久久久影院| 国产综合精华液| 一个人免费看片子| 最近的中文字幕免费完整| 美女国产高潮福利片在线看| 欧美人与性动交α欧美软件| 久久国内精品自在自线图片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 看非洲黑人一级黄片| 日本av免费视频播放| 亚洲天堂av无毛| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产成人精品久久久久久| 看十八女毛片水多多多| 亚洲在久久综合| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 香蕉精品网在线| 在线观看www视频免费| 亚洲精品第二区| 欧美日韩亚洲高清精品| 免费看av在线观看网站| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 热99国产精品久久久久久7| 美国免费a级毛片| av国产久精品久网站免费入址| 久久青草综合色| 在线观看国产h片| 久久久国产一区二区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 考比视频在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 大陆偷拍与自拍| 国产毛片在线视频| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 中文欧美无线码| 成人手机av| 又大又黄又爽视频免费| 少妇人妻 视频| 色吧在线观看| 丰满乱子伦码专区| 亚洲 欧美一区二区三区| 观看美女的网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲av综合色区一区| 超碰97精品在线观看| 晚上一个人看的免费电影| videos熟女内射| 久久狼人影院| 成年动漫av网址| 久久久久国产网址| 免费观看在线日韩| 亚洲人成电影观看| 国产精品国产三级专区第一集| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲伊人久久精品综合| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美精品av麻豆av| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 在线精品无人区一区二区三| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 久久久久久久久久久久大奶| 又大又黄又爽视频免费| 精品国产一区二区久久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 伦理电影免费视频| 在线观看免费高清a一片| 一本大道久久a久久精品| 少妇人妻精品综合一区二区| 久热久热在线精品观看| 97精品久久久久久久久久精品| av天堂久久9| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美中文综合在线视频| 欧美激情高清一区二区三区 | 欧美黄色片欧美黄色片| 18禁国产床啪视频网站| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 999久久久国产精品视频| 欧美人与性动交α欧美软件| 高清欧美精品videossex| 2018国产大陆天天弄谢| av福利片在线| 一级,二级,三级黄色视频| 老鸭窝网址在线观看| 色网站视频免费| 国产成人精品在线电影| 国产在线免费精品| 欧美xxⅹ黑人| av福利片在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| av片东京热男人的天堂| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美精品国产亚洲| 亚洲国产av新网站| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 满18在线观看网站| 美女大奶头黄色视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 天堂中文最新版在线下载| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美精品国产亚洲| 免费在线观看黄色视频的| 狂野欧美激情性bbbbbb| 看非洲黑人一级黄片| 黄频高清免费视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚洲三级黄色毛片| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品偷伦视频观看了| 久久久久精品人妻al黑| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲av福利一区| 日韩伦理黄色片| 在线看a的网站| 欧美日本中文国产一区发布| 国产av精品麻豆| 看免费成人av毛片| 美女高潮到喷水免费观看| 久久久久久久久久久免费av| 大陆偷拍与自拍| 成年美女黄网站色视频大全免费| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲天堂av无毛| 美女大奶头黄色视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久精品久久久久久久性| 久久人人97超碰香蕉20202| 伊人久久国产一区二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 欧美日韩视频高清一区二区三区二| www.熟女人妻精品国产| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲精品久久午夜乱码| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国精品久久久久久国模美| 亚洲国产精品一区三区| 在线 av 中文字幕| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产xxxxx性猛交| 久久精品久久精品一区二区三区| 超碰成人久久| 亚洲精品在线美女| 亚洲人成网站在线观看播放| 男女下面插进去视频免费观看| 两性夫妻黄色片| 亚洲精品自拍成人| 国产精品成人在线| 国产精品成人在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久久久精品久久久久真实原创| 超色免费av| 中国三级夫妇交换| 国产精品人妻久久久影院| xxx大片免费视频| 一本大道久久a久久精品| 丝袜在线中文字幕| 男女无遮挡免费网站观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产成人91sexporn| 最近中文字幕高清免费大全6| 在线免费观看不下载黄p国产| 少妇精品久久久久久久| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品一国产av| www.熟女人妻精品国产| 久久久久精品性色| 国产成人精品一,二区| 国产精品一区二区在线观看99| 日本午夜av视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲精品国产一区二区精华液| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲综合色网址| 丝袜人妻中文字幕| 日本av免费视频播放| 日韩av免费高清视频| 在线观看免费高清a一片| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 老女人水多毛片| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 丝袜美腿诱惑在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 满18在线观看网站| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久影院123| 亚洲精品国产色婷婷电影| 69精品国产乱码久久久| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 高清av免费在线| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产av一区二区精品久久| 男女啪啪激烈高潮av片| 一边亲一边摸免费视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 高清在线视频一区二区三区| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲欧洲国产日韩| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 97在线人人人人妻| 免费看不卡的av| 欧美在线黄色| 欧美激情极品国产一区二区三区| 又大又黄又爽视频免费| 搡老乐熟女国产| 婷婷成人精品国产| 国产成人精品在线电影| 女人精品久久久久毛片| 国产成人aa在线观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 黄色一级大片看看| 日韩中字成人| 好男人视频免费观看在线| 国产乱人偷精品视频| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲欧洲日产国产| 最近的中文字幕免费完整| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲精品,欧美精品| 午夜日韩欧美国产| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品福利永久在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 人妻少妇偷人精品九色| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲美女黄色视频免费看| www.熟女人妻精品国产| 一级黄片播放器| 久久久久精品人妻al黑| 欧美日本中文国产一区发布| 在线看a的网站| 日日撸夜夜添| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品一区蜜桃| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产欧美亚洲国产| 电影成人av| 国产国语露脸激情在线看| xxx大片免费视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 成年av动漫网址| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品欧美亚洲77777| 97精品久久久久久久久久精品| 深夜精品福利| 亚洲伊人久久精品综合| 丝袜脚勾引网站| 欧美人与善性xxx| 99热网站在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| av在线老鸭窝| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲国产精品一区三区| 久久久久久久国产电影| 国产免费福利视频在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 日本欧美视频一区| 久久久久精品人妻al黑| 母亲3免费完整高清在线观看 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 一级毛片 在线播放| tube8黄色片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲三级黄色毛片| 母亲3免费完整高清在线观看 | 亚洲成人手机| 成人二区视频| 女人久久www免费人成看片| 极品人妻少妇av视频| 亚洲欧美清纯卡通| 国产亚洲精品第一综合不卡| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产亚洲最大av| 久久久久精品性色| 午夜免费男女啪啪视频观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产一区二区 视频在线| 秋霞在线观看毛片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久婷婷青草| 母亲3免费完整高清在线观看 | 在现免费观看毛片| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 欧美日韩视频精品一区| 在现免费观看毛片| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 啦啦啦在线观看免费高清www| 99香蕉大伊视频| 日本欧美国产在线视频| 国产一级毛片在线| 欧美最新免费一区二区三区| av免费观看日本| 色视频在线一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 韩国高清视频一区二区三区| 国产探花极品一区二区| 免费在线观看黄色视频的| 99久久精品国产国产毛片| 欧美97在线视频| 只有这里有精品99| 最近手机中文字幕大全| 国产精品二区激情视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 午夜精品国产一区二区电影| 精品国产乱码久久久久久男人| 夫妻午夜视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 人人妻人人澡人人看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 在线看a的网站| 最近手机中文字幕大全| 波野结衣二区三区在线| av在线播放精品| 尾随美女入室| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女中出高潮动态图| 最近最新中文字幕免费大全7| 成年av动漫网址| 欧美日韩精品成人综合77777| 少妇熟女欧美另类| 欧美激情高清一区二区三区 | 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品一二三区在线看| 男女边摸边吃奶| 老司机影院成人| 亚洲,欧美精品.| 久久亚洲国产成人精品v| 国产成人91sexporn| 亚洲成人一二三区av| 中文天堂在线官网| 日日摸夜夜添夜夜爱| 考比视频在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 久久精品夜色国产| 国产白丝娇喘喷水9色精品| av一本久久久久| 国产深夜福利视频在线观看| 90打野战视频偷拍视频| av网站在线播放免费| 亚洲精品成人av观看孕妇| 考比视频在线观看| 久久这里只有精品19| 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品酒店卫生间| 免费观看性生交大片5| 99re6热这里在线精品视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产精品 欧美亚洲| 青春草视频在线免费观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲 欧美一区二区三区| a 毛片基地| 丝瓜视频免费看黄片| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产深夜福利视频在线观看| 久久久久久久久久人人人人人人| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 青春草亚洲视频在线观看| 在现免费观看毛片| 久久狼人影院| 久久99一区二区三区| 成人手机av| 美女福利国产在线| 国产午夜精品一二区理论片| 国产亚洲欧美精品永久| 丝袜脚勾引网站| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产精品 国内视频| 日韩免费高清中文字幕av| 久久精品国产亚洲av涩爱| 免费在线观看黄色视频的| 久久久久网色| 婷婷成人精品国产| 交换朋友夫妻互换小说| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产日韩欧美视频二区| 叶爱在线成人免费视频播放| www.精华液| 亚洲少妇的诱惑av| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲国产欧美网| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 亚洲伊人久久精品综合| 秋霞在线观看毛片| 欧美xxⅹ黑人| 久久97久久精品| 另类亚洲欧美激情| 精品一区二区免费观看| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人精品久久二区二区91 | 五月开心婷婷网| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 男女啪啪激烈高潮av片| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲国产精品999| 少妇人妻 视频| 大片免费播放器 马上看| 亚洲,欧美,日韩| 2018国产大陆天天弄谢| av在线app专区| 精品国产乱码久久久久久小说| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久精品国产亚洲av高清一级| 一区二区三区四区激情视频| 18禁国产床啪视频网站| av免费在线看不卡| 午夜精品国产一区二区电影| av在线观看视频网站免费| 不卡av一区二区三区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 中国国产av一级| 美女中出高潮动态图| 爱豆传媒免费全集在线观看| 免费观看av网站的网址| 看免费av毛片| 亚洲国产日韩一区二区| 久久 成人 亚洲| 成人亚洲精品一区在线观看| 精品国产国语对白av| 在线天堂最新版资源| 免费观看无遮挡的男女| 成年人免费黄色播放视频| 国产成人免费无遮挡视频| 国产免费现黄频在线看| 午夜福利影视在线免费观看| 黄频高清免费视频| 99久久精品国产国产毛片| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 亚洲内射少妇av| 十八禁高潮呻吟视频| 高清av免费在线| 18禁国产床啪视频网站| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久久久久久久久免费av| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产精品熟女久久久久浪| 老司机影院毛片| 国产免费视频播放在线视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 日本爱情动作片www.在线观看| av有码第一页| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜日本视频在线| 99热全是精品| 美女大奶头黄色视频| 在现免费观看毛片| 国产一区二区三区av在线| 亚洲精品国产av蜜桃| 在线观看三级黄色| 国产探花极品一区二区| 亚洲情色 制服丝袜| 久久久国产精品麻豆|