原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞作用的meta分析

許　宏，楊佳卉，楊景麗（蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅　蘭州730020）

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原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞作用的meta分析

許宏，楊佳卉，楊景麗
（蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州730020）

摘要：利用Meta分析方法評(píng)價(jià)原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的作用。meta分析結(jié)果顯示：原人參二醇[20(S)-原人參二醇或20(R)-原人參二醇]對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞在阻滯細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡不同方面有明顯的作用,且隨著濃度增大，作用隨之更加明顯。

關(guān)鍵詞：原人參二醇；人肺腺癌A549細(xì)胞；細(xì)胞周期；細(xì)胞存活率；細(xì)胞凋亡

肺癌是一種嚴(yán)重影響人類生命健康的疾病之一，目前已成為世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。肺腺癌惡性程度較高，近年來(lái)全球范圍內(nèi)發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，已經(jīng)超越鱗癌成為最常見(jiàn)的肺癌，A549細(xì)胞是人肺腺癌的細(xì)胞株，屬于常見(jiàn)的惡性腫瘤類型。目前，肺癌病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但從腫瘤細(xì)胞學(xué)來(lái)看，肺癌發(fā)生的本質(zhì)在于細(xì)胞增殖與凋亡的調(diào)節(jié)失控。近年來(lái)中藥的抗癌機(jī)制研究取得了很大進(jìn)展，尤其對(duì)肺癌細(xì)胞增殖周期的調(diào)控與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡兩方面內(nèi)容。積極尋找特效和低毒的腫瘤防治藥物成為當(dāng)今我國(guó)乃至世界面臨的緊迫任務(wù)之一[1]。人參作為中國(guó)傳統(tǒng)中藥，在中藥史上占有重要的地位，具有大補(bǔ)元?dú)?、補(bǔ)氣益肺、安神益智的功效，被用于多種古方驗(yàn)方的主藥，人參為五加科多年生草本植物,其成分具有諸多生物活性[2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，人參具有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物活性作用[3]。原人參二醇為從人參中提取出的有效成分之一。為了客觀的評(píng)價(jià)原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的作用，本研究采用meta分析的方法合并分析當(dāng)前所有原人參二醇與A549細(xì)胞的關(guān)系的研究，期望為原人參二醇在肺腺癌治療中的價(jià)值提供證據(jù)。

1　資料與方法

1.1納入排除標(biāo)準(zhǔn)

納入原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞周期，細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡影響的研究，原人參二醇的濃度不限。排除：①聯(lián)合其他化學(xué)藥；②數(shù)據(jù)不完整或有錯(cuò)誤。對(duì)重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)僅保留最先發(fā)表的一篇。對(duì)同一研究多次發(fā)表，僅保留樣本量最大和信息最全的一篇。

1.2文獻(xiàn)檢索

利用“人參”、“A549”、“肺癌”、“肺腺癌”檢索萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)、維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取有關(guān)原人參二醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞周期，細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡影響的研究，檢索實(shí)施時(shí)間為2015年5月，所有檢索策略均通過(guò)多次預(yù)檢索后確定，檢索式根據(jù)具體數(shù)據(jù)庫(kù)做相應(yīng)的調(diào)整。此外，追查已納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)，以獲取以上檢索未發(fā)現(xiàn)的相關(guān)信息。

1.3資料提取

提取內(nèi)容主要包括：①一般資料：題目、作者姓名、發(fā)表日期和文獻(xiàn)來(lái)源。②人肺腺癌A549細(xì)胞周期，細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡情況。③實(shí)驗(yàn)的方法。如遇分歧通過(guò)討論或根據(jù)第3位研究人員的意見(jiàn)協(xié)商處理。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)不同濃度原人參二醇對(duì)的人肺腺癌A549細(xì)胞周期，細(xì)胞存活率和細(xì)胞凋亡影響采用RevMan5.2統(tǒng)計(jì)軟件Meta分析，以均數(shù)差（MD）為效應(yīng)量，效應(yīng)量以95%CI表示。

2　結(jié)果

2.120(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞細(xì)胞周期的影響[4-5]

由表1可知，在20 (S)-原人參二醇作用24h時(shí)，檢測(cè)G0/G1期時(shí)，對(duì)照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。檢測(cè)G2/M期時(shí)，對(duì)照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，20μmol/mL和40μmol/mL組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。檢測(cè)S期時(shí)，對(duì)照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1　20(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞細(xì)胞周期的影響

2.220(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞存活率的影響[5-65]

由2表可知，在20 (R)-原人參二醇作用72h時(shí)，檢測(cè)細(xì)胞存活率，對(duì)照組分別和1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P＜0.05）；1μmol/mL分和10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 10μmol/ml分和50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 50μmol/mL和100μmol/mL相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2　20(R)一原人參二醇對(duì)對(duì)A549細(xì)胞存活率的影響

2.320(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞凋亡率的影響[4,5]

由表3可知，在20(S)-原人參二醇作用24h時(shí)，定量分析G0/G1期前的亞二倍體凋亡峰（SubG1)得到細(xì)胞凋亡率。對(duì)照組分別和10μmol/mL、20μmol/ mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表3　20(S)-原人參二醇A549細(xì)胞凋亡率的影響

3　討論

人參被人們稱為“百草之王”,是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴藥材。人參含有多種人參皂苷單體及人參倍半萜稀、人參酸、人參英、人參奎酮、人參寧、人參多糖、B族維生素、煙酸、膽堿、多種氨基酸以及微量元素鍺等成分[7]。其主要活性成分是人參皂苷,人參皂苷具有抗疲勞、延緩衰老、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足等作用。關(guān)于抗腫瘤作用方面研究最多的是二醇組人參皂苷，20(S)-人參皂苷Rg3和Rh2,它們?cè)谝种颇[瘤血管生成、降低腫瘤微血管密度、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抗腫瘤轉(zhuǎn)移、對(duì)化療藥物減毒增效等方面具有較廣泛的抗腫瘤功效[8,9]。將人參皂苷Rg3的3位上的末端葡萄糖水解掉可得到人參皂苷Rh2,再把人參皂苷Rh2的3位上的最后一個(gè)葡萄糖水解掉就得到20(S)-原人參二醇,20(S)-原人參二醇作為人參二醇組皂苷化學(xué)水解及人腸道菌代謝的最終產(chǎn)物,有可能比人參皂苷Rg3和人參皂苷Rh2具有更強(qiáng)的抗癌活性、抗癌增效減毒作用以及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用,而且生物利用度可能更高[10]。20(S)-原人參二醇的分子式為C30H52O3。

本研究結(jié)果顯示，20(S)-原人參二醇以0μmol/ mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/ mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細(xì)胞24h后，實(shí)驗(yàn)組G0/G1期細(xì)胞與對(duì)照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增，而G2/M期與S期細(xì)胞數(shù)目相應(yīng)減少，提示20(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞的周期調(diào)控作用主要發(fā)生于Gl期，阻止其向G2/M期與S期發(fā)展,即可將細(xì)胞阻滯于Gl期，從而抑制細(xì)胞的增值。張銳等研究結(jié)果表明20(S)-原人參二醇對(duì)A549細(xì)胞的殺傷作用可能由于其對(duì)A549細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。

20 (R)-原人參二醇以分別以對(duì)照組以0μmol/ mL、1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL作用于A549細(xì)胞72h后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增。

20 (S)-原人參二醇以0μmol/mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細(xì)胞24h后，實(shí)驗(yàn)組G0/G1細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增。有文獻(xiàn)報(bào)道AKT活性的下調(diào)可能是PPD誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的一個(gè)關(guān)鍵步驟，PPD可通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)途徑作用線粒體通路誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡。

參考文獻(xiàn)：

[1]張春晶,于海濤,侯金才等. S型與R型人參皂Rh2對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2011，36（12）:1670-1674.

[2]周琳.人參皂昔Rh2誘導(dǎo)HeLa和A549細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[D].湖南：中南大學(xué)，2010.

[3]潘正安.中藥大辭典.上海:上?？萍汲霭嫔?2003:3-5.

[4]張銳.20(S)-原人參二醇誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞凋亡及抑制PI3K/AKT信號(hào)途徑的研究[D].長(zhǎng)春：吉林大學(xué)，2009.

[5]張銳,徐華麗,曲紹春等. 20(S)-原人參二醇對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖和荷瘤裸小鼠腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用[J].中草藥，2008，39（12）：1838-1841.

[6]劉娜.西洋參莖葉皂昔水解產(chǎn)物化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究[D].延吉：延邊大學(xué)，2008.

[7]徐曉軍，石文，湯永民等.人參皂苷Rh2抗白血病多藥耐藥細(xì)胞K562/NCR作用研究[J].中草藥,2010,41(7): 1131-1135.

[8] Zhao J S, Huang L Y, Belmar N,et al. Oral RDP58 al lowCPT -11 dose intensification for enhanced tumor re sponse by decreasing gastrointestinal toxicity [J].Clin Can cer Res,2004, 10: 2851-2859.

[9]陳婷梅,王亞平,陳地龍,等.人參總皂苷誘K562細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J].中草藥, 2003,34(3): 235-237.

[10] Eun-Ah B, Han M J. Metabolish of 20(S)-and 20 (R)-ginsenoside Rg3by human intestinal bacteria and its relation to in vitro biological activities [J].Biol Pharm Bull, 2002, 25:58-63.

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