竹筍殼廢棄物栽培平菇試驗

李海彬，鄭鋼勇，羅集豐，羅潔彬，李曉波，陳少雄*

（1.揭陽職業(yè)技術(shù)學院 師范教育系，廣東 揭陽 522000；2.北良初級中學，廣東 揭陽 522000；3.普寧市廣太中學，廣東 揭陽 522000）

竹筍殼廢棄物栽培平菇試驗

李海彬1，鄭鋼勇1，羅集豐1，羅潔彬2，李曉波3，陳少雄1*

（1.揭陽職業(yè)技術(shù)學院 師范教育系，廣東 揭陽 522000；2.北良初級中學，廣東 揭陽 522000；3.普寧市廣太中學，廣東 揭陽 522000）

通過向原種培養(yǎng)基、栽培種培養(yǎng)基和木屑栽培基質(zhì)中加入不同含量的竹筍殼廢棄物，探索竹筍殼廢棄物對平菇菌絲生長和產(chǎn)量的影響.結(jié)果表明：向原種和栽培種培養(yǎng)基添加竹筍殼廢棄物均能促進菌絲的生長發(fā)育，最佳添加質(zhì)量分數(shù)均為60%；菌絲體對竹筍殼的分解和利用能力是可通過對母種的適應性誘導化培養(yǎng)而形成；添加竹筍殼廢棄物的栽培生產(chǎn)基質(zhì)能有效地提高平菇對栽培料的生物轉(zhuǎn)化率，生產(chǎn)試驗C和生產(chǎn)試驗T的最佳添加質(zhì)量分數(shù)分別為80%和60%，分別增加49.37%和43.36%的生物轉(zhuǎn)化率；試驗表明竹筍殼廢棄物可作為平菇生產(chǎn)的栽培基質(zhì)原料.

竹筍殼；平菇；栽培生產(chǎn)

在竹筍生產(chǎn)和加工過程中，被剔除并丟棄的筍殼和不宜食用的筍節(jié)與筍頭下腳料占50%以上[1].據(jù)報道，2011年全國竹筍干年生產(chǎn)量達581871噸[2]，鮮筍含水量平均值達92.71%[3]，根據(jù)行業(yè)標準《無公害食品——竹筍干》（NY5232-2004）[4]，可知全國僅用于生產(chǎn)筍干的鮮筍年用量達598萬噸以上，加上鮮食消耗的竹筍，全國竹筍年產(chǎn)量遠超過600萬噸.大量筍業(yè)加工廢棄物的丟棄，不但形成生物資源的浪費，更因腐爛霉變而造成嚴重的環(huán)境污染.平菇具有較強的植物纖維分解和利用能力，為解決筍業(yè)加工廢棄物對環(huán)境的污染問題，同時緩解食用菌栽培原料緊缺問題.試驗以平菇為對象，探索竹筍殼廢棄物在平菇生長和栽培生產(chǎn)中的應用.

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種

平菇（Pleurotus ostreatus）品種名為華平115，購自華中農(nóng)業(yè)大學菌種實驗中心.

1.1.2 培養(yǎng)基原料來源

竹筍殼廢棄物取自廣東省揭陽市揭東縣埔田鎮(zhèn)麻竹筍基地，切碎曬干備用.木屑為桉樹木屑，粉碎成約5目以下大小，麩皮和粗米糠購自市場.

1.2 實驗方法

1.2.1 培養(yǎng)基的配制

1.2.1.1 母種培養(yǎng)基的配制

以含60 g/L濃度的竹筍殼提取液的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基（PDA）作為母種培養(yǎng)基[5].

將所需干竹筍殼切成約1 cm2大小的小碎片，室溫浸泡12 h，煮沸30 min，過濾，對濾渣重煮1次，混合兩次過濾液，制得竹筍殼提取液.向制得的竹筍殼提取液中加入適量馬鈴薯進行煮制，配制成含竹筍殼提取液的PDA培養(yǎng)基.

1.2.1.2 原種培養(yǎng)基的配制

采用小麥培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，以不同比例竹筍殼廢棄物代替小麥配制不同培養(yǎng)基質(zhì)，各配方成份見表1.

表1 不同原種培養(yǎng)基質(zhì)配方Tab.1Ingredientin theculture medium ofstock spawns

將各配方中的竹筍殼粉碎化處理后（切成0.5 cm2左右大?。?，進行室溫預濕12 h；小麥提前浸透，煮熟，要求麥粒熟透而不開裂；將每個配方中各成份進行混勻，分別裝入18mm×180mm試管中，培養(yǎng)基上方離硅膠塞距離為2 cm，高壓蒸汽滅菌（121℃，2 h）.

1.2.1.3 栽培種培養(yǎng)基的配制

栽培種培養(yǎng)基以木屑培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，以不同比例竹筍殼廢棄物代替木屑配制不同培養(yǎng)基質(zhì)，各配方成份見表2.

將各配方中的竹筍殼粉碎化處理后（切成0.5 cm2左右大?。渌覝亟?2 h，瀝干與其它各成份混均，室溫預濕24 h，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為8.5和含水量為65%，分別裝入18mm×180mm試管，培養(yǎng)基離硅膠塞距離為2 cm，高壓蒸汽滅菌（121℃，2 h）.

1.2.1.4 生產(chǎn)培養(yǎng)基的配制

生產(chǎn)培養(yǎng)基的配方與栽培種培養(yǎng)基配方相同，各配方成份見表2.

表2 不同栽培種培養(yǎng)基質(zhì)配方Tab.2 Ingredient in the culture medium of culture spawns

稱取所需干竹筍殼，切成約1～2 cm寬和2～3 cm長的小碎片，冷水室溫浸泡12 h，瀝干備用.稱取其它所需原材料，與竹筍殼充分混合，預濕24 h，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值和含水量分別為8.5和65%.將培養(yǎng)基料裝于17 cm×35 cm聚丙烯袋中，121℃蒸汽滅菌2.5 h.

1.2.2 實驗設計

1.2.2.1 母種對竹筍殼提取液的適應性誘導化培養(yǎng)

用打孔器（內(nèi)徑為6mm）取在PDA平板上已活化的菌絲體，接種于含竹筍殼提取液PDA平板培養(yǎng)基中央，菌絲面向上，25℃恒溫避光培養(yǎng).同時依對照組，每個處理設8個重復.其中任1皿最先出現(xiàn)菌絲長滿培養(yǎng)皿時進行各生長數(shù)據(jù)的采集.利用統(tǒng)計軟件SPSS 13.0對菌絲的平均生長速率進行單因素方差分析，使用Tukey或Dunnett’s C方法進行多重比較.計算和調(diào)查菌絲的生長性狀，包括生長速率、菌落圓整度、菌落邊緣整齊度以及菌絲生長勢.

采用十字交叉法測量菌落平均直徑，并按下述公式計算菌絲生長速率，菌絲生長速率（mm/d）=（平均菌落直徑-6）/（菌絲生長天數(shù)×2）.用“+”符號的數(shù)量表示菌絲生長勢，“+”、“++”、“+++”、“++++”和“+++++”分別表示為稀疏、較稀疏、較濃密、濃密和非常濃密.菌落半徑達培養(yǎng)皿一半時觀察菌落邊緣整齊度，用“+”符號的數(shù)量表示其程度，“+”、“++”、“+++”和“-”分別表示不整齊、較整齊、整齊和菌絲不生長.用“圓整、較圓整、不規(guī)則”描述菌落的圓整程度.

1.2.2.2 原種對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)

將經(jīng)含竹筍殼提取物和對照組培養(yǎng)的母種培養(yǎng)物分別命名為母種T和母種C，分別向不同配方濃度的原種培養(yǎng)基試管中接入直徑為6mm的菌絲塊，菌絲面向上，25℃恒溫避光培養(yǎng)，誘導培養(yǎng)物分別對應稱為原種T和原種C，每組試驗均設5個重復.

數(shù)據(jù)測量與分析：于生長速度最快的培養(yǎng)試管的菌絲體距離試管底部約2 cm時，測量菌絲體的長度，計算菌絲體生長速率，并對其進行方差分析，比較不同母種種源（母種T和母種C）對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)效果，方法同1.2.2.1.同時觀察菌絲體的生長勢和潔白度.用“+”符號的數(shù)量表示菌絲生長勢的濃密度，“+++”、“++”、“+”和“-”分別表示濃密、較密、稀疏和不生長；菌絲潔白度使用潔白和灰白色表示.

1.2.2.3 栽培種對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)

將經(jīng)竹筍殼誘導培養(yǎng)的原種T和C分別向不同配方濃度栽培種試管培養(yǎng)基中接入約為黃豆顆粒大小的菌絲塊團，25℃恒溫避光培養(yǎng)，誘導培養(yǎng)物分別對應稱為栽培種T和栽培種C，每組試驗均設5個重復.

數(shù)據(jù)測量與分析：測量菌絲體生長速率，將各配方相對應的栽培種T和栽培種C的生長速率進行方差分析和多重比較，以比較不同原種種源（原種T和原種C）對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)效果方法同1.2.2.1；觀察菌絲體的生長勢和潔白度，方法同1.2.2.2.

1.2.2.4 不同生產(chǎn)配方培養(yǎng)基對平菇產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的影響

取經(jīng)含最佳濃度竹筍殼培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)的栽培種T和栽培種C進行生產(chǎn)試驗，采用兩端接種，常規(guī)栽培管理，雙側(cè)出菇,試驗結(jié)果分別對應稱為生產(chǎn)T和生產(chǎn)C.計算第1和第2潮菇的鮮菇總產(chǎn)量和培養(yǎng)基的生物轉(zhuǎn)化率[6]，生物轉(zhuǎn)化率=袋產(chǎn)量/袋干料重量×100%.每種配方裝料干重1000 g，設3個重復.對各配方的產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率進行方差分析和多重比較，方法同1.2.2.1.

2 結(jié)果與分析

2.1 母種對竹筍殼提取液的適應性誘導化培養(yǎng)

由表3和表4可知，與對照組相比，含60 g/L濃度的竹筍殼提取液PDA培養(yǎng)基對菌絲的生長速率具顯著促進作用.實驗組的菌絲生長勢較對照組強，但菌落的邊緣整齊度和圓整度性狀在實驗組與對照組之間均表現(xiàn)一致.

表3 竹筍殼提取液對母種菌絲體生長速率影響的方差分析Tab.3 Anova of the effects of bamboo shoot shell extract?ing solution on mycelial growth rate in original spawn

表4 竹筍殼提取液對母種菌絲體生長的影響Tab.4 The effects of bamboo shoot shell extracting solution on mycelial growth characteristics in original spawn

2.2 原種對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)

根據(jù)統(tǒng)計分析（表5、表6和表7），不論經(jīng)含竹筍殼提取液誘導培養(yǎng)的母種T還是不經(jīng)誘導培養(yǎng)的母種C，添加ω=60%竹筍殼廢棄物的原種培養(yǎng)基均有利于提高菌絲體的生長速率，且對來自母種T的原種菌絲體的促進效果優(yōu)于來自母種C的原種菌絲體；添加ω=20%和ω=40%竹筍殼廢棄物培養(yǎng)基有利于增強原種菌絲體的生長勢；是否添加竹筍殼廢棄物對菌絲體潔白度無產(chǎn)生明顯影響.

表5 不同培養(yǎng)基配方對原種T菌絲生長的影響Tab.5 Effects of different culture medium on mycelial growth characteristics in stock spawn T

表6 不同培養(yǎng)基配方對原種C菌絲生長的影響Tab.6 Effects of different culture medium on mycelial growth characteristics in stock spawn C

表7 不同母種種源對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)效果Tab.7 Effects of adaptive culture between stock spawn T and stock spawn C

2.3 栽培種對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)

據(jù)表8和表9可知，添加ω=60%竹筍殼廢棄物的培養(yǎng)基均有利于提高栽培種T和栽培種C菌絲體的生長速率，但對不同原種來源的栽培種菌絲體生長速率的促進效果無明顯差異；通過性狀觀察，是否添加竹筍殼廢棄物對不同原種來源的栽培種菌絲體的生長勢和潔白度均無產(chǎn)生明顯影響.

表8 不同培養(yǎng)基配方對栽培種菌絲生長速率的影響Tab.8 Effects of different culture medium on mycelial growth rate(mm/d)in culture spawn

表9 不同原種種源對竹筍殼的適應性誘導化培養(yǎng)效果Tab.9 Effects of adaptive culture between culture spawn T and culture spawn C

表10 不同生產(chǎn)配方培養(yǎng)基對平菇產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的影響Tab.10 Effects of different culture medium on fruit body yields andbiotransformation rates in culture

2.4 不同生產(chǎn)配方培養(yǎng)基對平菇產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的影響

結(jié)果表明（見表10），向常見的木屑栽培基質(zhì)添加竹筍殼廢棄物能有效提高平菇產(chǎn)量和對栽培料的生物轉(zhuǎn)化率，且隨著竹筍殼廢棄物添加濃度的增加，對產(chǎn)量和栽培料生物轉(zhuǎn)化率的促進效果相應增強；對生產(chǎn)C的產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的增加效果最好的竹筍殼廢棄物添加質(zhì)量分數(shù)為80%，分別比對照組提高493.67 g的產(chǎn)量和49.37%的生物轉(zhuǎn)化率；對生產(chǎn)T的產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的最佳增加效果均為竹筍殼廢棄物添加質(zhì)量分數(shù)為60%，分別比對照組提高433.66 g的產(chǎn)量和43.36%的生物轉(zhuǎn)化率.通過方差分析（見表11和表12）表明，是否添加竹筍殼廢棄物對不同栽培種來源的生產(chǎn)產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率均無明顯影響.

3 討論

含60 g/L竹筍殼提取液的PDA培養(yǎng)基對平菇（黑平38）菌絲體的生長發(fā)育具有促進作用[5].通過平菇品種華平115試驗表明，60 g/L竹筍殼提取液的PDA培養(yǎng)基可促進菌絲體的生長發(fā)育，顯示竹筍殼提取液對平菇菌絲體生長發(fā)育的促進作用具有一定的穩(wěn)定性.

本試驗結(jié)果表明，在培養(yǎng)基中添加ω=60%的竹筍殼廢棄物均有利于提高原種菌絲體和栽培種菌絲體的生長速率.添加竹筍殼廢棄物對原種T菌絲體的生長速率促進效果優(yōu)于原種C，原因可能是母種T經(jīng)過含竹筍殼提取液的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，其菌絲體被誘導產(chǎn)生較強的對竹筍殼廢棄物的分解和利用能力.

表11 不同栽培種種源對竹筍殼的生產(chǎn)產(chǎn)量適應性誘導化培養(yǎng)效果Tab.11 Effects of adaptive culture on fruit body yields between culture T and culture C

表12 不同栽培種種源對竹筍殼的生物轉(zhuǎn)化率適應性誘導化培養(yǎng)效果Tab.12 Effects of adaptive culture onbiotransformation rates between culture T and culture C

添加竹筍殼廢棄物對栽培種T和栽培種C菌絲體生長速率均產(chǎn)生促進作用，但在栽培種T和栽培種C之間的促進效果無顯著性差異.原因可能是經(jīng)過含有竹筍殼廢棄物原種培養(yǎng)基的適應性誘導化培養(yǎng)后的原種T和原種C菌絲體均產(chǎn)生了較一致的分解和利用塊狀竹筍殼的能力；也可能是與原種的粉狀物相比，栽培種培養(yǎng)基中所含竹筍殼廢棄物為塊狀的固體物，被菌絲體分解和利用的難度較大且足以掩蓋不同來源菌絲體分解和利用能力的差異性；還可能是與原種的粉狀物相比，因含塊狀的竹筍殼固體物，栽培種培養(yǎng)基的結(jié)構(gòu)較疏松，具有較好的疏松性和透氣性，能更好地促進菌絲體生長，其促進作用遠大于菌絲體對竹筍殼廢棄物分解和利用能力的差異性，因而未能顯示出不同來源菌絲體對竹筍殼廢棄物的分解和利用能力的差異性.

竹筍外殼廢棄物含有高于農(nóng)作物廢料等飼料3倍的營養(yǎng)成分，其中，粗蛋白含量約比糠粉高6倍，富含15種氨基酸和19種以上微量元素[7]；同時，質(zhì)地結(jié)構(gòu)疏松，含有豐富的木質(zhì)素（20.34%）[8]、半纖維素（35%～46%）和纖維素（36%～40%）[9].本試驗發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)的木屑栽培基質(zhì)對比，添加竹筍殼廢棄物的栽培基質(zhì)均能有效地提高平菇的產(chǎn)量和對培養(yǎng)基質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化率，隨著添加量的增加，平菇的產(chǎn)量和對培養(yǎng)基質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化率不斷增加.原因可能是平菇具有較強的植物纖維分解能力，能較好地分解和利用竹筍殼中的植物纖維和有機營養(yǎng)要素；添加竹筍殼廢棄物后，木屑栽培基質(zhì)疏松性和透氣性得到改善，有利于平菇的生長和生產(chǎn).

竹筍加工廢棄物在食用菌栽培基質(zhì)的開發(fā)與利用，不僅可以解決竹筍加工廢棄物造成的系列環(huán)境問題，還可提高竹筍資源的利用率.同時，竹筍加工廢棄物經(jīng)食用菌的生物轉(zhuǎn)化后成為有機肥料，不僅可減少無機肥對土壤和水資源的污染，有利于發(fā)展無公害綠色農(nóng)業(yè)，而且實現(xiàn)了農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈的內(nèi)部循環(huán)，提高資源利用率.

[1]王衛(wèi)民，趙關(guān)木，劉根生，等.鮮筍殼綜合開發(fā)利用[J].杭州科技，1992（1）：12-13.

[2]國家統(tǒng)計局.中國農(nóng)村統(tǒng)計年鑒[M].北京：中國統(tǒng)計出版社，2012：117.

[3]陳玉惠，劉翠，王文久，等.云南12種食用竹筍營養(yǎng)成分研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1998，10（1）：25-30.

[4]NY5232-2004,無公害食品竹筍干[S].

[5]李海彬，陳少雄，楊培新，等.竹筍殼對平菇菌絲生長和產(chǎn)量的影響[J].海南師范大學學報（自然科學版），2013，26（3）：296-298；302.

[6]王謙，李天月，張國顯.黃白側(cè)耳栽培條件優(yōu)化[J].食用菌學報，2010，17（4）：26-29.

[7]周兆祥，田荊祥，賴椿根.竹筍殼的化學成分[J].浙江林學院學報，1991，8（1）：54-59.

[8]周曉潔，李建強，陳延興.竹筍殼化學成分分析[J].武漢科技學院學報，2010，23（1）：1-3.

[9]賈燕芳，石偉勇.幾種筍殼的化學成分及其纖維素特征[ J].浙江大學學報（農(nóng)業(yè)與生命科學版），2011，37（3）：338-342.

責任編輯：劉 紅

Study on Cultivating Pleurotus ostreatus with Bamboo Shoot Shell

LI Haibin1，ZHENG Gangyong1，LUO Jifeng1，LUO Jiebin2，LI Xiaobo3，CHEN Shaoxiong1*
（1.Teacher Education Department，Jieyang Vocational＆Technical College，Jieyang522000，China；2.Beiliang Junior Middle School，Jieyang522000，China；3.Puning Junior Middle School，Guangdong，Jieyang522000，China）

To study the effect of bamboo shoot shell in culturingPleurotus ostreatus,Pleurotus ostreatus are cultivated in?stock spawn culture medium,culture spawn culture medium and culture medium,with different concentrations ofbamboo shoot shell respectively.The result shows that all concentrations of the bamboo shoot shell in stock spawn culture medium and culture spawn culture medium can increase hypha growth ofPleurotus ostreatus,and the best concentration of increase was 60%.The capability of decomposing and using bamboo shoot shell can be formed by induction culture.The culture medi?um with bamboo shoot shell could increase the yield ofPleurotus ostreatusand the biological efficiency in medium;the best concentration of bamboo shoot shell for culture C is 80%,with 49.37%of the biological efficiency;the best concentration of bamboo shoot shell for culture T is 60%,with 43.36%of the biological efficiency.The bamboo shoot shell can be culture me?dium material forPleurotus ostreatus.

Ultrasonic bamboo shoot shell；Pleurotus ostreatus；culture

S 38<文獻標識碼：a class="emphasis_bold"> 文獻標識碼：A 文章編號：1674-4942（2016）04-0396-05文獻標識碼：a

1674-4942（2016）04-0396-05

A 文章編號：1674-4942（2016）04-0396-05

10.12051/j.issn.1674-4942.2016.04.008

2016-08-29

廣東省科技計劃資助項目（2013B020420010）

*通訊作者