口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中FHIT蛋白表達(dá)變化及意義

高穎，馮慶輝，楊濤，左鳳翔，張?jiān)扑桑ㄖ袊?guó)人民解放軍第08醫(yī)院，長(zhǎng)春300；中國(guó)人民解放軍9333部隊(duì)衛(wèi)生隊(duì)）

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口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中FHIT蛋白表達(dá)變化及意義

高穎1，馮慶輝1，楊濤2，左鳳翔1，張?jiān)扑?
（1中國(guó)人民解放軍第208醫(yī)院，長(zhǎng)春130021；2中國(guó)人民解放軍93313部隊(duì)衛(wèi)生隊(duì)）

摘要：目的 觀察口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）組織中脆性組氨酸三聚體（FHIT）蛋白表達(dá)變化，并探討其臨床意義。方法 采用免疫組化法檢測(cè)36例OSCC組織（癌癥組）及41例正?？谇火つそM織（對(duì)照組）中的FHIT蛋白，分析其與OSCC患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果 癌癥組FHIT蛋白表達(dá)陽性率為30．56%（11／36）、對(duì)照組為78．05%（32／41），P＜0．05。FHIT蛋白表達(dá)與OSCC患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P均＞0．05），而與腫瘤分化程度、病理分期有關(guān)（P均＜0．05）。結(jié)論 OSCC組織中FHIT蛋白表達(dá)降低，F(xiàn)HIT蛋白在OSCC發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮一定的作用。

關(guān)鍵詞：口腔腫瘤；鱗狀細(xì)胞癌；脆性組氨酸三聚體；口腔黏膜

脆性組氨酸三聚體基因（FHIT）是新近發(fā)現(xiàn)的一個(gè)腫瘤抑制基因，編碼系列含組氨酸三聚體，且該基因包含F(xiàn)RA3B脆性位點(diǎn)，因此得名［1］。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT在許多腫瘤中均異常表達(dá)，但具體作用機(jī)制還不完全清楚?？谇击[狀細(xì)胞癌（OSCC）是口腔科常見惡性腫瘤［2，3］，有關(guān)FHIT在OSCC中的研究較少。2010年9月～2014年4月，我們觀察了OSCC組織中FHIT蛋白的表達(dá)變化，并探討其臨床意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1　資料與方法

1．1臨床資料 收集解放軍第208醫(yī)院外科手術(shù)切除的OSCC標(biāo)本36例（癌癥組），患者中男19例、女17例，年齡（45±22）歲；組織高分化11例，中分化13例，低分化12例；病理分期Ⅰ～Ⅱ期20例，Ⅲ～Ⅳ期16例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移17例。術(shù)前均未接受放、化療或其他抗腫瘤治療，術(shù)后均經(jīng)病理學(xué)確診。正常口腔黏膜組織標(biāo)本41例（對(duì)照組），均來自行阻生齒拔除及口腔黏膜活檢者，男23例、女18例，年齡（45±15）歲。兩組性別、年齡具有可比性。

1．2FHIT蛋白檢測(cè)方法 采用免疫組化法。所有標(biāo)本常規(guī)固定，石蠟包埋，5 μm厚連續(xù)切片。以兔抗人FHIT多克隆抗體作為一抗（工作濃度1∶100），PBS作為陰性對(duì)照，按SP試劑盒說明書進(jìn)行操作，以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒定為陽性。參照Van Heerden標(biāo)準(zhǔn)，陽性細(xì)胞＞10%為FHIT蛋白表達(dá)陽性。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16．0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以率表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1兩組FHIT蛋白表達(dá)比較 癌癥組FHIT蛋白表達(dá)陽性率為30．56%（11／36）、對(duì)照組為78．05% （32／41），P＜0．05。

2．2FHIT蛋白表達(dá)與OSCC臨床病理參數(shù)的關(guān)系FHIT蛋白表達(dá)與OSCC患者的年齡、性別、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P均＞0．05），而與腫瘤分化程度、病理分期有關(guān)（P均＜0．05）。見表1。

表1　FHIT蛋白表達(dá)與OSCC臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3　討論

FHIT蛋白是典型的Ap3A水解酶，能區(qū)域特異性水解腺苷多磷酸生成腺苷二磷酸和腺苷三磷酸（ATP）［4］。理論上推測(cè)，作為一種候選的抑癌基因，F(xiàn)HIT基因缺失或改變將導(dǎo)致基因產(chǎn)物缺失或功能紊亂，Ap3A水解酶活性受抑，從而導(dǎo)致其作用底物Ap3A或類似物堆積及在細(xì)胞內(nèi)水平增高。Ap3A 是ATP類似物，能抑制蛋白激酶的活性。因此，Ap3A水平升高增強(qiáng)了生長(zhǎng)信號(hào)傳導(dǎo)途徑，阻斷抑制途徑或凋亡通道導(dǎo)致腫瘤產(chǎn)生［5］。另外，F(xiàn)HIT能作用于mRNA帽狀結(jié)構(gòu)，F(xiàn)HIT蛋白質(zhì)脫帽功能的喪失也可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。至少在一部分惡性腫瘤中，F(xiàn)HIT的生物學(xué)行為表現(xiàn)為典型的抑癌基因［6，7］。

實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)HIT對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)具有抑制作用，其表達(dá)降低會(huì)加速癌細(xì)胞的擴(kuò)散，從而促進(jìn)機(jī)體死亡［8］。因此，深入探索其分子機(jī)制可為研究腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸提供理論依據(jù)。本研究發(fā)現(xiàn)，OSCC組織中FHIT蛋白表達(dá)缺乏或減少。因此，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)下調(diào)或缺失可能是口腔癌發(fā)生的早期事件［9，10］。FHIT蛋白在口腔癌組織中表達(dá)的降低，使得抑制正常口腔黏膜細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的能力降低，細(xì)胞發(fā)生癌變、增殖能力增強(qiáng)，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生［11，12］。有研究表明，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)與OSCC的病理學(xué)分級(jí)具有相關(guān)性［13］。本研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)與OSCC病理學(xué)分級(jí)有關(guān)，而與患者的性別、年齡無關(guān)。與以往報(bào)道一致。因此，F(xiàn)HIT蛋白可能在OSCC的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，其失表達(dá)可能是判斷OSCC預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo)。關(guān)于FHIT蛋白在OSCC發(fā)生中的確切機(jī)制及其與基因改變的關(guān)系仍需進(jìn)一步探討［14，15］。

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收稿日期：（2015-09-12）

基金項(xiàng)目：吉林省科技廳發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（201105037）。

中圖分類號(hào)：R739．8

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1002-266X（2016）02-0068-02

doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2016．02．029