胃癌組織中MMP-9和HER-2表達及其與預后的關系

周萍，付勇，高文華，盧寧（蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院，烏魯木齊830000）

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胃癌組織中MMP-9和HER-2表達及其與預后的關系

周萍，付勇，高文華，盧寧
（蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院，烏魯木齊830000）

摘要：目的 觀察胃癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和人表皮生長因子受體-2（HER-2）的表達，探討其與患者預后的關系。方法 選擇63例胃癌患者，取胃癌組織和癌旁正常組織，應用免疫組化法檢測MMP-9和HER-2表達，對隨訪資料進行生存分析。結果 MMP-9、HER-2在胃癌組織中的陽性率均高于癌旁正常組織（P均＜0．05）。胃癌組織中MMP-9表達與腫瘤浸潤深度、TNM分期、淋巴結轉移和Ki-67增殖指數(shù)有關（P均＜0．05），HER-2表達與淋巴結轉移有關（P＜0．05）；MMP-9與HER-2的表達呈正相關（r＝0．271，P＝0．032）。MMP-9陽性與陰性表達者的中位生存時間分別為34、47個月（P＜0．05）；HER-2陽性與陰性表達者的中位生存時間分別為18、40個月（P＜0．05）。結論 MMP-9和HER-2參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展，二者聯(lián)合檢測有助于判斷胃癌患者的預后。

關鍵詞：胃腫瘤；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；人表皮生長因子受體-2；預后

胃癌的發(fā)生和發(fā)展是多因素、多階段的過程?；|(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）是一種蛋白水解酶，可特異性降解細胞外基質(zhì)和基底膜，促進腫瘤生長和轉移［1］。人表皮生長因子受體-2（HER-2）是一種原癌基因，可被致癌因素激活，通過細胞間信號傳導來調(diào)節(jié)細胞增殖和轉移［2］。2009年1月～2014年1月，我們通過觀察MMP-9和HER-2在胃癌組織中的表達，探討二者對胃癌預后的預測價值。

1　資料與方法

1．1臨床資料 選取同期在蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院行手術切除的初治胃癌患者63例，男43例、女20例，年齡32～82歲、中位年齡62歲。取手術切除的胃癌組織（觀察組）和距癌灶＞5 cm的正常胃黏膜組織（對照組），4%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)4 μm切片。

1．2MMP-9、HER-2檢測 取組織切片，采用免疫組化染色法檢測MMP-9、HER-2，鼠抗人MMP-9單克隆抗體和鼠抗人HER-2單克隆抗體均購自福州邁新生物技術開發(fā)公司。用已知陽性切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照，光鏡下觀察。MMP-9以細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)黃色至棕褐色顆粒為陽性，免疫組化采用半定量積分法判定［3］。按陽性著色程度評分：0分為無著色；1分為淺黃色；2分為棕黃色；3分為棕褐色。按陽性細胞百分數(shù)評分：0分為陰性；1分為＜10%；2分為10%～＜50%；3分為50%～＜75%；4分為≥75%。兩者乘積0～2為陰性，3～12為陽性。HER-2以細胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，無染色或微弱膜反應或部分膜染色為陰性，＞10%的細胞有微弱至中度、強度完整、基底外側或側膜染色為陽性［4］。

1．3統(tǒng)計學方法 采用SPSS17．0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料用χ2檢驗和Spearman等級相關性分析。隨訪時間自手術日起至死亡或隨訪截止日期（2015年1月），生存分析采用Kaplan-Meier和Log-rank檢驗。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2．1胃癌組織和癌旁正常組織中MMP-9和HER-2表達 MMP-9陽性表達于細胞質(zhì)，HER-2陽性表達于細胞膜。胃癌組織中MMP-9、HER-2陽性表達率分別為81．0%（51／63）、34．9%（22／63），癌旁正常組織分別為23．8%（15／63）和0（0／63），MMP-9、HER-2在胃癌組織中的表達顯著高于癌旁正常組織（P均＜0．05）。

2．2MMP-9、HER-2表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關系 見表1。

2．3胃癌組織中MMP-9、HER-2表達的相關性Spearman相關分析顯示，MMP-9與HER-2表達呈正相關（r＝0．271，P＝0．032）。

2．4MMP-9、HER-2表達與胃癌患者術后生存的關系 Kaplan-Meier生存分析顯示，MMP-9陽性和陰性表達患者的中位生存時間分別為34、47個月（χ2＝6．288，P＝0．012），HER-2陽性和陰性表達患者的中位生存時間分別為18、40個月（χ2＝10．545，P ＝0．001）。

表1　MMP-9、HER-2表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關系（例）

3　討論

胃癌浸潤和轉移的關鍵環(huán)節(jié)是腫瘤細胞對細胞外基質(zhì)及基底膜的降解。MMP-9屬于MMPs家族，由腫瘤細胞和間質(zhì)細胞以酶原的形式分泌，被激活后可特異性地降解細胞外基質(zhì)和基底膜的主要成分Ⅳ型膠原，導致腫瘤細胞向周圍組織浸潤、轉移［5］。研究顯示，MMP-9在多種腫瘤中表達增強［6，7］。牟衛(wèi)平等［8］報道，MMP-9表達與胃癌TNM分期、淋巴結轉移及腫瘤浸潤深度呈正相關。Chen等［9］發(fā)現(xiàn)，MMP-9陽性表達的胃癌患者預后更差。本研究顯示，MMP-9在胃癌組織中的陽性表達率顯著高于癌旁正常組織；胃癌組織中MMP-9表達與浸潤深度、TNM分期、淋巴結轉移及Ki-67增殖指數(shù)有關，與患者性別、年齡、腫瘤大小、分化程度及術前血清CEA、CA199水平無關；隨訪結果顯示，MMP-9陽性表達患者的總生存時間短于陰性表達者。表明MMP-9表達與胃癌的增殖活性、浸潤轉移及預后有關，其可在一定程度上反映胃癌的進展和預后。

HER-2基因是一種原癌基因，為表皮生長因子受體（EGFR）家族成員之一，其蛋白表達產(chǎn)物是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，可通過細胞間的信號轉導，調(diào)節(jié)細胞增殖、分化及生長。研究發(fā)現(xiàn)，HER-2可在乳腺癌［10］、食管癌、結直腸癌、肺腺癌等多種腫瘤中呈過度表達，胃癌組織中HER-2陽性表達率為10%～20%［11，12］。徐英杰等［13］報道，HER-2表達與胃癌分化程度、臨床分期及淋巴結轉移有關。Zhou等［14］發(fā)現(xiàn)，HER-2表達與胃癌預后呈負相關。本研究顯示，HER-2在癌旁正常組織無陽性表達，在胃癌組織中的陽性表達率為34．9%，高于文獻報道。其原因可能與判斷標準、檢測方法、檢測試劑、病理類型、樣本數(shù)量等有關。HER-2表達與患者年齡、性別、腫瘤大小、分化程度、浸潤深度、TNM分期、Ki-67增殖指數(shù)、術前血清CEA及CA199表達均無關，僅與淋巴結轉移相關。隨訪結果顯示，HER-2陽性表達者的總生存時間短于陰性表達者。表明隨著原發(fā)腫瘤向深處浸潤，HER-2蛋白表達的陽性率無明顯變化，說明胃黏膜一旦發(fā)生癌變后即可有穩(wěn)定的HER-2表達；但HER-2蛋白表達與胃癌的淋巴結轉移和預后密切相關，可作為預測胃癌預后的一個參考指標。

研究報道，乳腺癌細胞轉染HER-2基因后其侵襲和轉移能力增強，同時伴有MMP-9等基底膜降解酶分泌的增加［15，16］。本研究顯示，MMP-9和HER-2在胃癌組織中的表達呈正相關，表明兩者在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程中具有協(xié)同作用。HER-2可能通過調(diào)節(jié)MMP-9的活性促進胃癌浸潤和轉移，二者聯(lián)合檢測有助于判斷胃癌患者的預后。

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收稿日期：（2015-04-13）

通信作者：盧寧（E-mail：luning407＠sina．com）

中圖分類號：R735．2

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X（2016）02-0051-03

doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2016．02．021