還珠湯對(duì)藥物性卵巢早衰大鼠卵巢功能的影響

李琰珉，李琰琳（濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊604；濰坊醫(yī)學(xué)院）

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還珠湯對(duì)藥物性卵巢早衰大鼠卵巢功能的影響

李琰珉1，李琰琳2
（1濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041；2濰坊醫(yī)學(xué)院）

摘要：目的 觀察還珠湯對(duì)藥物性卵巢早衰（POF）大鼠卵巢功能的改善作用。方法 將80只雌性Wistar大鼠分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、常規(guī)劑量組、大劑量組各20只。正常對(duì)照組每日胃飼生理鹽水，其他三組胃飼雷公藤多苷片溶液制作POF模型，連續(xù)20 d；第21天開始，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組胃飼生理鹽水，常規(guī)劑量組、大劑量組分別胃飼還珠湯1．5 g／mL和還珠湯3 g／mL，連續(xù)30 d。末次給藥后測(cè)定大鼠血清FSH、LH、E2水平，光鏡下計(jì)數(shù)左側(cè)卵巢正常卵泡個(gè)數(shù)和閉鎖卵泡個(gè)數(shù)，計(jì)算閉鎖卵泡／總卵泡。結(jié)果 模型對(duì)照組血清FSH、LH及閉鎖卵泡／總卵泡較其他三組顯著升高，正常卵泡較其他三組明顯下降（P均＜0．05），其他三組間比較P均＞0．05；模型對(duì)照組與常規(guī)劑量組血清E2均顯著低于正常對(duì)照組和大劑量組（P均＜0．05）；各組閉鎖卵泡比較P均＞0．05。結(jié)論 還珠湯能夠降低POF大鼠的血清FSH、LH水平，提高E2水平，增加卵巢皮質(zhì)內(nèi)正常卵泡數(shù)量。

關(guān)鍵詞：卵巢功能衰退；還珠湯；雷公藤多苷；中藥；大鼠

卵巢早衰（POF）指婦女在40歲前絕經(jīng)，同時(shí)合并促性腺激素水平升高，雌激素水平下降，卵巢組織學(xué)呈圍絕經(jīng)期或老年婦女絕經(jīng)后的變化。POF在成年女性中的發(fā)病率約為3．8%。其病因目前尚不明確，可能與遺傳、病毒感染、藥物、手術(shù)、自身免疫缺陷等因素有關(guān)。研究認(rèn)為，POF是可逆的，殘留的卵巢功能可能再次活動(dòng)［2］。還珠湯取自明代張景岳《景岳全書》中的毓麟珠，具有補(bǔ)腎、健脾、溫經(jīng)之功，對(duì)POF和部分排卵障礙患者具有較好的療效。2014年6～9月，我們通過(guò)建立藥物性POF動(dòng)物模型，觀察還珠湯對(duì)卵巢功能的作用。

1　材料與方法

1．1材料 雌性Wistar大鼠80只，8～9周齡，體質(zhì)量200 g左右。還珠湯（紫石英30 g、川芎6 g、川椒1．5 g、川斷12 g、川牛膝12 g、仙靈脾12 g、菟絲子9 g、枸杞子9 g、香附9 g、當(dāng)歸12 g、丹皮9 g）由濰坊市人民醫(yī)院制劑室制備，配制成還珠湯Ⅰ和還珠湯Ⅱ，分別含生藥1．5、3 g／mL，分別為成人劑量的3倍和6倍。雷公藤多苷片購(gòu)自上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司，用無(wú)菌注射用水配制成1．25 mg／mL的藥液。

1．2動(dòng)物分組及處理 將大鼠分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、常規(guī)劑量組、大劑量組各20只，正常對(duì)照組給予生理鹽水1 mL／d灌胃，其余三組給予雷公藤多苷片溶液1 mL／d灌胃制作POF模型，連續(xù)20 d。第21天開始，四組分別給予生理鹽水、生理鹽水、還珠湯Ⅰ和還珠湯Ⅱ1 mL／d灌胃，連續(xù)30 d。

1．3卵巢功能檢測(cè) 末次給藥后6 h，大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉，抽取頸靜脈血2 mL，離心取上清，放射免疫法測(cè)定FSH、LH、E2。取左側(cè)卵巢，4℃下切成1 mm3小塊，10%甲醛固定，脫水、透明、浸蠟及包埋、切片，再次透明、脫水、HE染色、脫水、透明、封片處理。顯微鏡下觀察，每張切片隨機(jī)取10個(gè)低倍鏡視野，計(jì)數(shù)正常卵泡和閉鎖卵泡數(shù)量，計(jì)算閉鎖卵泡／總卵泡。

1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11．5統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，比較采用方差分析。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1各組血清FSH、LH、E2比較 見(jiàn)表1。

表1　各組血清FSH、LH、E2比較（n＝10，珔x±s）

2．2各組卵泡數(shù)量比較 見(jiàn)表2。

3　討論

中藥雷公藤中含有雷公藤甲素，雷公藤甲素是從雷公藤中分離的二萜類內(nèi)酯，是雷公藤多苷片等制劑的主要有效成分，該成分對(duì)生殖功能有明顯抑制作用。育齡婦女長(zhǎng)期服用雷公藤可導(dǎo)致月經(jīng)紊亂、月經(jīng)量減少甚至閉經(jīng)［2］，以及性欲減退、潮熱、出汗等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)POF、功能失調(diào)性子宮出血［3］及高促性腺激素閉經(jīng)［4］甚至子宮萎縮［5］。

表2　各組正常卵泡、閉鎖卵泡、閉鎖卵泡／總卵泡比較（n＝10，珔x±s）

目前治療POF常用的方法包括激素替代療法、誘導(dǎo)排卵、輔助贈(zèng)卵技術(shù)、自體或異體卵巢移植技術(shù)、免疫抑制治療、補(bǔ)充鈣劑或降鈣素治療，均不能恢復(fù)卵巢功能。對(duì)于無(wú)生育要求的患者可采取激素替代治療，或采用誘導(dǎo)排卵，給予外源性促性腺激素釋放激素，抑制內(nèi)源性FSH至絕經(jīng)前水平，促使卵泡生成同步化，但不良反應(yīng)大［6，7］。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，POF屬“血枯”、“血隔”、“閉經(jīng)”、“不孕癥”等范疇。肝腎不足是導(dǎo)致女性性功能低下的主要原因，其中腎虛是關(guān)鍵。腎精不足，腎氣虛衰，則性功能減退、性欲淡漠。肝為血臟，女子以血為本，性活動(dòng)也以血為用。若肝郁氣滯，疏泄不及，傷及氣血，則可致性功能障礙，不思交合。故治療應(yīng)以補(bǔ)腎為主，佐以養(yǎng)血調(diào)肝。研究證實(shí)，補(bǔ)腎中藥通過(guò)溫補(bǔ)肝腎、補(bǔ)血調(diào)經(jīng)，能明顯提高雌激素水平，其療效優(yōu)于雌激素替代治療［8～12］。還珠湯由紫石英、川芎、川椒、川斷、川牛膝、仙靈脾、菟絲子、枸杞子、香附、當(dāng)歸、丹皮、地骨皮、紫河車、首烏組成，具有補(bǔ)腎、健脾、溫經(jīng)之功。方中紫石英、仙靈脾共為主藥，紫石英具有鎮(zhèn)心安神、降逆氣、暖子宮、溫補(bǔ)肝腎的功效；仙靈脾具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、補(bǔ)命門之火的作用。佐以菟絲子、川斷、枸杞子、當(dāng)歸、香附、川芎、川牛膝、川椒補(bǔ)腎益精，疏肝理氣。其中菟絲子補(bǔ)肝腎，益精髓；川斷補(bǔ)腎益精；枸杞子補(bǔ)腎潤(rùn)肺、養(yǎng)肝明目；當(dāng)歸補(bǔ)血和血、調(diào)經(jīng)止痛；香附疏肝理氣、調(diào)和氣血；川芎行氣開郁、祛風(fēng)燥濕；川牛膝通經(jīng)活血；川椒溫煦胞宮，溫督脈。本方陰陽(yáng)雙補(bǔ)，具有溫而不燥、補(bǔ)而不滯的特點(diǎn)。

本研究顯示，給予還珠湯治療后，POF大鼠血清FSH、LH、E2水平顯著升高，正常卵泡增加，閉鎖卵泡／總卵泡降低。表明還珠湯對(duì)POF大鼠的卵巢功能有較好的改善作用。本研究中，大劑量組與常規(guī)劑量組各觀察指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明還珠湯對(duì)卵巢功能的改善作用并不隨著藥物劑量的增加而增強(qiáng)，臨床應(yīng)用時(shí)選擇合適藥物劑量即可。

綜上所述，還珠湯能夠降低POF大鼠的血清FSH、LH水平，提高E2水平，增加卵巢皮質(zhì)內(nèi)正常卵泡數(shù)量，治療藥物性POF療效確切。

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·臨床研究·

收稿日期：（2015-10-15）

中圖分類號(hào)：R711．7

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1002-266X（2016）02-0031-02

doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2016．02．011