芩丹顆粒減輕高溫暴露大鼠熱損傷的作用及機(jī)制

高俊濤，萬(wàn)朋，王春艷，謝維，賀之英，張祁（吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林吉林132013）

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芩丹顆粒減輕高溫暴露大鼠熱損傷的作用及機(jī)制

高俊濤，萬(wàn)朋，王春艷，謝維，賀之英，張祁
（吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林吉林132013）

摘要：目的 觀察芩丹顆粒減輕高溫暴露大鼠熱損傷的作用，并探討其機(jī)制。方法 將75只SD大鼠隨機(jī)分為常溫對(duì)照組、熱損傷模型組和芩丹顆粒低、中、高劑量組，每組各15只；熱暴露前48 h芩丹顆粒低、中、高劑量組分別給予生理鹽水、生理鹽水及生理鹽水＋芩丹顆粒10、20、40 g／kg灌胃，常溫對(duì)照組、熱損傷模型組均給予等量生理鹽水灌胃。將熱損傷模型組和芩丹顆粒組暴露于43℃熱倉(cāng)中，持續(xù)75 min，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)體核溫度（Tc）和平均動(dòng)脈壓（MAP）變化，熱損傷后迅速取出；常溫對(duì)照組置于室溫環(huán)境中。檢測(cè)各組大鼠血清谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、白介素1β（IL-1β）及腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。結(jié)果 熱損傷模型組Tc、AST、ALT、SUN、Cr、IL-1β及TNF-α水平均高于常溫對(duì)照組，MAP低于常溫對(duì)照組（P均＜0．05）；與熱損傷模型組比較，芩丹顆粒高劑量組Tc、AST、ALT、SUN、Cr、IL-1β及TNF-α水平下降，MAP升高（P均＜0．05）。結(jié)論 芩丹顆粒可減輕高溫暴露大鼠熱損傷，其機(jī)制可能與減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。

關(guān)鍵詞：芩丹顆粒；高溫暴露；谷草轉(zhuǎn)氨酶；谷丙轉(zhuǎn)氨酶；尿素氮；肌酐；白細(xì)胞介素；腫瘤壞死因子α；大鼠

熱損傷是由高溫環(huán)境引起的體溫調(diào)節(jié)中樞功能發(fā)生障礙，使體溫迅速升高，產(chǎn)生以中樞神經(jīng)系統(tǒng)與循環(huán)系統(tǒng)異常為主要臨床表現(xiàn)的一組急癥。臨床表現(xiàn)為體溫＞40℃，譫妄，驚厥或昏迷［1］。通常采用物理降溫來(lái)緩解熱損傷癥狀，如搶救不及時(shí)將導(dǎo)致迅速死亡或遺留永久性神經(jīng)癥狀。芩丹顆粒是本實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā)的組方藥，其主要成分為黃芩苷、丹皮酚和梔子苷等，具有對(duì)抗微波輻射損傷的效應(yīng)［2］。2015年2～8月，我們觀察了芩丹顆粒減輕高溫暴露大鼠多器官熱損傷的作用，為治療和預(yù)防熱損傷提供臨床依據(jù)。

1　材料與方法

1．1材料 雄性清潔級(jí)SD大鼠75只，體質(zhì)量180 ～220 g，由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，隨機(jī)分為常溫對(duì)照組、熱損傷模型組和芩丹顆粒低、中、高劑量組各15只。自制芩丹顆粒，10 g／袋，生理鹽水溶解，4℃保存。DKB-501S型超級(jí)恒溫水?。ㄉ虾＞陮?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），HITACHI7600生化分析儀（日本Tokyo公司），多通道生理記錄儀（美國(guó)BiopacMP150）。

1．2動(dòng)物分組與處理 常溫對(duì)照組、熱損傷模型組及芩丹顆粒低、中、高劑量組熱暴露前48 h分別給予等體積（2 mL）生理鹽水、生理鹽水及生理鹽水＋芩丹顆粒10、20、40 g／kg灌胃。使用超級(jí)恒溫水浴，連接有機(jī)玻璃夾層水循環(huán)艙，保持水溫45℃，水循環(huán)艙實(shí)測(cè)溫度43℃，穩(wěn)定1 h以上。將各組大鼠用10%水合氯醛麻醉、固定，行股動(dòng)脈插管術(shù)，將股動(dòng)脈插管與生理記錄儀壓力換能器連接，監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓（MAP）；將溫度探頭插入大鼠直腸，監(jiān)測(cè)體核溫度（Tc）。常溫對(duì)照組置于室溫環(huán)境中，模型組和芩丹顆粒組置入熱倉(cāng)內(nèi)，持續(xù)75 min后取出。

1．3檢測(cè)指標(biāo) 記錄各組實(shí)驗(yàn)75 min時(shí)的MAP 和Tc。腹主動(dòng)脈采血，離心取血清，采用日立自動(dòng)生化分析儀、ELASA法檢測(cè)谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）及腫瘤壞死因子α（TNF-α）。

1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11．5統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，進(jìn)行單因素方差分析。P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1各組75 min時(shí)Tc、MAP比較 見(jiàn)表1。

表1　各組75　min時(shí)Tc、MAP比較（n＝15，珔x±s）

2．2各組血清AST、ALT、BUN、Cr、IL-1β、TNF-α水平比較 見(jiàn)表2。

表2　各組血清AST、ALT、BUN、Cr、IL-1β、TNF-α水平比較（n＝15，珔x±s）

3　討論

芩丹顆粒以黃芩為主藥，性味苦寒，歸肺、胃、大腸經(jīng)，有清熱燥濕，解毒涼血，此乃“上、中二焦之藥”；麥冬等滋陰清熱、解毒涼血、潤(rùn)肺養(yǎng)胃；丹皮等清熱涼血、解毒散瘀，又有清利頭目之效；黃芪性味甘，微溫，歸脾、肺經(jīng)，益氣固表、利水消腫、脫毒生肌，且以微溫之性防諸藥之苦寒太過(guò)，調(diào)和諸藥。諸藥合用起到了清熱涼血、滋陰生津、扶正固本之功效［2］。

Tc升高、MAP降低是熱損傷的重要特征。本研究顯示，與常溫對(duì)照組比較，熱損傷模型組大鼠Tc升高，MAP降低；與熱損傷模型組比較，芩丹顆粒高劑量組大鼠Tc降低，芩丹顆粒中、高劑量組大鼠MAP升高。表明芩丹顆粒能夠降低熱損傷大鼠的體溫，延緩熱損傷導(dǎo)致的MAP降低，發(fā)揮減輕熱損傷、延緩熱損傷病理進(jìn)程的作用。

AST、ALT是肝組織酶譜中含量豐富的酶系，肝臟受損時(shí)，可因細(xì)胞通透性增加、細(xì)胞壞死等，致使血清酶含量發(fā)生變化。血清BUN、Cr是評(píng)價(jià)腎功能的重要指標(biāo)。本研究顯示，熱損傷模型組血清AST、ALT、BUN、Cr水平明顯上升，肝腎功能受損；而芩丹顆粒高劑量組上述指標(biāo)明顯降低。表明在熱休克早期及時(shí)抑制炎性介質(zhì)的過(guò)度釋放，可改善微循環(huán)和組織灌注，保護(hù)肝臟、腎臟等重要臟器的功能［3］。

高溫環(huán)境可導(dǎo)致嚙齒類(lèi)動(dòng)物內(nèi)臟缺血，引起內(nèi)毒素血癥［4～6］，誘導(dǎo)炎癥因子的產(chǎn)生［7，8］。促炎細(xì)胞因子IL-1β是重要的介導(dǎo)熱損傷的因子［9］。中暑急性期可出現(xiàn)微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，激活體內(nèi)多種炎癥介質(zhì)如IL-1β、TNF-α等，造成細(xì)胞因子瀑布樣級(jí)聯(lián)反應(yīng)和白細(xì)胞過(guò)度激活，釋放大量的氧自由基及溶酶體酶，破壞細(xì)胞膜及毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞膜［9］，導(dǎo)致類(lèi)似敗血癥的全身炎癥反應(yīng)。本研究顯示，與常溫對(duì)照組比較，熱損傷模型組的炎癥指標(biāo)IL-1β、TNF-α升高；與熱損傷模型組比較，芩丹顆粒高劑量組上述指標(biāo)降低。表明芩丹顆粒預(yù)處理能夠有效降低由熱應(yīng)激誘導(dǎo)的炎癥因子的過(guò)度產(chǎn)生［10］。高溫環(huán)境引起缺血、缺氧、氧化損傷，導(dǎo)致多器官功能障礙或衰竭。環(huán)境熱應(yīng)激可增加皮膚的血液循環(huán)和新陳代謝，并逐步減少內(nèi)臟血流量；嚴(yán)重的熱損傷可導(dǎo)致MAP降低，顱內(nèi)壓增高，導(dǎo)致腦灌注壓降低，引起腦組織缺血、缺氧。與常溫環(huán)境相比，處于高溫環(huán)境中的嚙齒動(dòng)物細(xì)胞缺血、缺氧指標(biāo)［11～15］及促炎細(xì)胞因子、氧化損傷指標(biāo)增高［16，17］，抗氧化酶如谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽還原酶降低［18，19］，引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡、壞死及中暑后自噬。本研究顯示，芩丹顆粒具有減輕熱損傷的作用，其機(jī)制可能為芩丹顆粒對(duì)抗熱損傷引起的炎癥反應(yīng)。

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Function of oral Qindan particles in attenuating heat injury of rats exposed to high temperature

GAO Juntao，WAN Peng，WANG Chunyan，XIE Wei，HE Zhiying，ZHANG Qi
（Jinlin Medical University，Jinlin 132013，China）

Abstract：Objective To investigate the function of Qindan particles in reducing heat-induced injury of rats exposed to high temperature and its mechanism．Methods Seventy-five SD rats were randomly divided into the normothermic control group，heat injury model group，low-dose Qindan group，medium-dose Qindan group and high-dose Qindan group，15 rats in each group．Rats in the heat injury model and Qindan groups were orally administered saline or Qindan 10，20 and 40 g／kg，respectively，followed by exposure to heat（43℃for 75 min）before recovery at room temperature（RT，24℃）．Meanwhile，the body temperature（Tc）and mean arterial pressure（MAP）was monitored．After the thermal damage，the blood was collected immediately to detect the serum levels of aspartate aminotransferase（AST），alanine aminotransferase （ALT），blood urea nitrogen（BUN），creatinine（Cr），interleukin-1β（IL-1β）and tumor necrosis factor-α（TNF-α）．Results Compared with the normothermic control group，the levels of Tc，AST，ALT，SUN，Cr，IL-1β and TNF-α were all higher，but the MAP was lower in the heat injury model group（all P＜0．05）．Compared with the heat injury model group，the levels of Tc，AST，ALT，SUN，Cr，IL-1β and TNF-α were all lower but the MAP was higher in the high-dose Qindan group（all P＜0．05）．Conclusion Qindan particles attenuate heat-induced multiple organ injury，whose mechanism may be related with reducing inflammation in rats．

Key words：Qindan particles；high temperature exposure；aspartate aminotransferase；alanine aminotransferase；urea nitrogen；creatinine；interleukin；tumor necrosis factor-α；rats

收稿日期：（2015-09-09）

作者簡(jiǎn)介：第一高俊濤（1976-），男，博士，副教授，主要研究方向?yàn)樘厥猸h(huán)境損傷的防治。E-mail：15948628662＠163．com

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31071042）；吉林省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（2012Z066）。

中圖分類(lèi)號(hào)：R135．3

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-266X（2016）02-0011-03

doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2016．02．004