核酸探針和PCR技術(shù)應(yīng)用于食品檢驗中的作用

□ 魏姜勉　黃淮學(xué)院

核酸探針和PCR技術(shù)應(yīng)用于食品檢驗中的作用

□ 魏姜勉黃淮學(xué)院

在國家經(jīng)濟水平和居民生活質(zhì)量不斷提升的背景下，人們對于食品安全的重視程度也逐漸提升。同時，在相應(yīng)的食品安全方面也得到很大發(fā)展，誕生一些新的食品安全的檢測技術(shù)。較之常規(guī)的食品安全檢測技術(shù)，新技術(shù)在時間、經(jīng)費、準(zhǔn)確性和操作簡易度上都在很大程度上得到改善?；诖耍院怂崽结樅蚉CR技術(shù)應(yīng)用于食品檢驗中的作用為中心展開細致的分析探討，旨在提供核酸探針和PCR技術(shù)應(yīng)用于食品檢驗的理論參考。

核酸探針和PCR技術(shù)的原理及主要內(nèi)容

核酸探針技術(shù)原理及主要內(nèi)容

核酸探針技術(shù)從原理上屬于分子生物學(xué)的范疇，該技術(shù)主要是利用生物核苷酸堿基互補的原理，使用相應(yīng)的基因探針和需測定的靶序列進行互補，進而檢測目標(biāo)靶序列是否存在。從核酸探針技術(shù)的原理上可知，該技術(shù)的重點在核酸雜交的環(huán)節(jié)中，根據(jù)特異的堿基配對研究其過程，同時分離這些標(biāo)記的特殊核酸片段，便可以實現(xiàn)檢測特定核酸探針的制作，目前該技術(shù)已在食品安全檢測上取得廣泛的應(yīng)用。

PCR技術(shù)原理及主要內(nèi)容

PCR技術(shù)的原理是有效地擴增體外存在的特定雙鏈DN A，故又被稱作體外基因擴增法。在檢測過程中，上首先是DN A的雙鏈在高溫條件下解鏈形成單鏈，然后再加入兩段人工合成的與雙鏈DN A兩端序列彼此互補的核苷酸片段，再重復(fù)以上程序?qū)崿F(xiàn)DN A片段的擴增，實現(xiàn)DN A的大量增加，再利用電泳等技術(shù)檢測DN A，實現(xiàn)食品安全的檢測。

核酸探針技術(shù)在實際食品檢驗中的應(yīng)用

每一種致病菌都具有自身的獨特的核酸片段，因此核酸探針技術(shù)對病菌的檢測精密度和敏感度很強，主要應(yīng)用于多種致病菌的檢測?，F(xiàn)階段，使用較為廣泛的探針技術(shù)主要有放射性標(biāo)記探針技術(shù)以及非放射性標(biāo)記探針。

放射性標(biāo)記探針技術(shù)

放射性標(biāo)記探針技術(shù)作用物主要是放射性的同位素。目前廣泛使用的同位素有3H、32P、35S。放射性標(biāo)記探針技術(shù)優(yōu)點為檢測的靈敏性高，缺點為涉及放射性的污染，同位素半衰期一般很短，在同位素衰變的過程中釋放的放射物對人體有很大的傷害，因此雖然該技術(shù)在檢測效果上十分良好，但是使用的危害性很大，不能實現(xiàn)廣泛的商業(yè)化推廣。

非放射性標(biāo)記探針技術(shù)

非放射性標(biāo)記探針技術(shù)在檢測中的標(biāo)記物為地高辛或生物素，這兩者都屬于半抗原。生物素非放射性標(biāo)記探針技術(shù)在使用中對于人體的傷害很小，但使用的環(huán)境必須為無光，生物素極易受到光照的影響，在紫外線下會出現(xiàn)分解現(xiàn)象。地高辛標(biāo)記在檢靈敏度上較高，同時對人體的傷害很低，適用范圍廣，并且在特異性方面也要比生物素標(biāo)記更高，因此目前使用十分廣泛。

PCR技術(shù)在實際食品檢驗中的應(yīng)用

PCR技術(shù)是將雙鏈DN A轉(zhuǎn)化為單鏈，再將單鏈合成雙鏈進而實現(xiàn)DN A片段的大量復(fù)制，在食品安全的檢測上最為明顯的優(yōu)勢在于敏感度高、特異性強，目前在食品安全檢測中已取得示范廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)階段，主要在檢測單核細胞增多癥李氏桿菌、沙門菌方面具有廣泛的應(yīng)用。

單核細胞增多癥李氏桿菌應(yīng)用

相關(guān)研究人員使用PCR技術(shù)擴增食品中的李氏桿菌的溶血基因，檢測時間短，同時檢測靈敏度高，在檢測樣品中只需少量的李氏桿菌存在就可以被檢測出，因此檢測效果極佳。

沙門氏菌應(yīng)用

相關(guān)研究人員分局沙門菌某段克隆中具有的特異性序列設(shè)計出一對引物，進而依據(jù)這一引物可快速檢測出食品中沙門菌，檢測的特異性和敏感度高，在食品安全的檢測上期檢測準(zhǔn)確性極佳。

PCR技術(shù)在食品安全檢測上雖有諸多的優(yōu)點，在敏感度和特異性上均有保障，有效提升著食品的質(zhì)量，但是現(xiàn)階段仍存在很大的弊端。主要是該技術(shù)的操作精確性要求高，因此對于操作人員的要求很高，如果在操作中規(guī)范性不足會致使檢測結(jié)果出現(xiàn)差異，使該技術(shù)的高靈敏性反而成為一個缺點。

結(jié)語

核酸探針技術(shù)是使用十分特殊的基因探針和需測定的靶序列互補，進而實現(xiàn)被檢測靶序列生物是否存在的檢查技術(shù)。PCR技術(shù)是將雙鏈DNA轉(zhuǎn)化為單鏈，再將單鏈合成雙鏈進而實現(xiàn)DNA片段的大量復(fù)制，進而對該類DNA實現(xiàn)高敏度檢測。在現(xiàn)階段核酸探針技術(shù)主要包括放射性標(biāo)記探針技術(shù)、非放射性標(biāo)記探針技術(shù)兩種。核酸探針和PCR技術(shù)雖都具有一定的優(yōu)勢，但是同時也存在著一定的缺點，還需要科研人員在持續(xù)深入地研究，不斷地完善食品安全檢測技術(shù)，保障食品安全。

魏姜勉（1987-），女，漢，河南遂平人，碩士，助教。研究方向：食品、生物工程。