• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甘氨酸的抑菌作用分析

    2016-12-13 10:55:39廖夏云黃小云馮麗敏聶紅梅池明亮廣西中醫(yī)藥大學(xué)
    食品安全導(dǎo)刊 2016年33期
    關(guān)鍵詞:甘氨酸濃度效果

    □ 廖夏云 黃小云 馮麗敏 聶紅梅 池明亮 譚 強(qiáng) 廣西中醫(yī)藥大學(xué)

    甘氨酸的抑菌作用分析

    □ 廖夏云黃小云馮麗敏聶紅梅池明亮譚強(qiáng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)

    甘氨酸可作為營養(yǎng)補(bǔ)充劑和調(diào)味劑應(yīng)用于食品中,還具有一定的抑菌效果。本文通過研究甘氨酸在不同的條件下對大腸桿菌(Escherichia coli,以下簡稱E.coli)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,以下簡稱Sa)的抑菌活性,確定甘氨酸對這兩種食品中常見的致病菌的最佳的抑制條件。用微量肉湯稀釋法,測定在不同的濃度、不同pH值、不同時(shí)間的條件下,甘氨酸對E.coli和Sa的抑菌率,確定最佳的抑菌條件。通過單因素實(shí)驗(yàn)研究表明甘氨酸對E.coli的最佳抑菌條件:濃度為2.0%(g/mL),pH為7,時(shí)間為20 h,抑菌率為100%。甘氨酸對Sa的最佳抑菌條件:濃度為2.5%(g/mL),pH為5,時(shí)間為16 h,抑菌率為100%。甘氨酸對Sa和E.coli均具有良好的抑制作用,對E.coli的抑制效果更好。

    甘氨酸,抑菌,微量肉湯稀釋法

    甘氨酸(Glycine),又名氨基乙酸(C2H5N O2),在氨基酸中結(jié)構(gòu)最簡單,為人體非必需氨基酸。甘氨酸為白色單斜晶系的晶體或白色性結(jié)晶粉末,無臭、無毒、易溶于水[1],甜度為蔗糖的0.8倍。大鼠口服半數(shù)致死量LD50是7.93 g/kg[2]。

    目前,谷氨酸鈉(味精)和甘氨酸是全世界用量最大的調(diào)味品。甘氨酸因具有抗氧化作用而被添加到奶油、干酪、人造奶油中,能延長保質(zhì)期3~4倍,在火腿、臘腸、魚肉、花生醬等食品中添加1%~2%的甘氨酸能達(dá)到防臭和防腐的效果[3],甘氨酸還用于配制運(yùn)動(dòng)員的營養(yǎng)飲料及其氨基酸食品,食用添加甘氨酸的食品對人體胃液酸度的調(diào)節(jié)、肌肉活力的提高有一定作用[4-7]。

    我國允許使用的防腐劑有30多種,但安全無毒、經(jīng)濟(jì)實(shí)用、抑菌廣泛并適用于各種食品的理想防腐劑仍然很少。甘氨酸來源豐富,對動(dòng)物的毒性很低,同時(shí)幾乎不對人體產(chǎn)生毒性,因此可作為一種非特異性防腐劑。石春芝 等[8]對甘氨酸的抑菌作用研究表明,3%的甘氨酸對堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌抑菌的作用非常明顯,甘氨酸與低級脂肪酸合并使用時(shí)對引起豆腐腐敗的微生物有顯著的抑菌作用。在席曉嵐 等人的研究報(bào)道中,用4-硝基苯甲醛與甘氨酸反應(yīng)合成Schiff堿,抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,該化合物對紅色毛癬菌、孢子絲菌、白色念珠菌均有不同程度的抑菌活性作用[9]。

    如何既防止食品的腐敗變質(zhì),又滿足消費(fèi)者對防腐劑安全無毒、經(jīng)濟(jì)有效的要求是目前研究的熱點(diǎn),甘氨酸既具有防腐作用,又有營養(yǎng)和改善食品風(fēng)味等作用,這樣的天然防腐劑的研究和開發(fā)利用是食品科學(xué)工業(yè)的一個(gè)新方向。本文采用微量肉湯稀釋法,探究在不同濃度、pH值、時(shí)間的條件下甘氨酸對大腸桿菌(E.coli)和金黃色葡萄球菌(Sa)的最佳抑制條件,擴(kuò)展對甘氨酸抑菌作用的環(huán)境和條件的研究,進(jìn)一步了解甘氨酸的抑菌作用效果。

    1 實(shí)驗(yàn)材料及方法

    1.1材料與儀器

    金黃色葡萄球菌CICC 10384,由廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院提供;大腸桿菌CICC 10419,購于中國工業(yè)微生物菌種保藏中心;M ueller-Hinton Broth,北京陸橋技術(shù)有限公司;瓊脂,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;甘氨酸,分析級,含量不少于99.0%,天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。

    752N紫外分光光度計(jì),上海儀電分析儀器有限公司;JJ200電子天平,常熟市雙杰測試儀器廠;LRH-250-S恒溫培養(yǎng)箱,韶關(guān)市泰宏醫(yī)療器械有限公司;DHG-9503A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海柏欣儀器設(shè)備廠;VS-840K-U潔凈工作臺(tái),蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;YXQ-LS-50SII立式蒸汽壓力滅菌柜,上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;JB-3恒溫定時(shí)攪拌器,上海雷磁創(chuàng)益儀器儀表有限公司;XW-80A旋渦混合器,江蘇海門市麒麟醫(yī)用儀器廠;DK-98-11電子調(diào)溫萬用爐,天津市泰斯特儀器有限公司;TP8D300H移液槍,TO PSCIEN;Biotek Epoch全波長酶標(biāo)儀。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1溶液制備

    配制濃度為0.2 g/m L的甘氨酸溶液,分別用醋酸緩沖液調(diào)節(jié)pH至4、5,用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)pH至6、7、8、9,放入冰箱保存,備用。

    1.2.2培養(yǎng)基的制備

    M HB固體培養(yǎng)基:稱取M HB培養(yǎng)基12.5 g,加入瓊脂7.5 g,蒸餾水500 m L,溶解,分裝,煮至清澈透明,121 ℃高壓滅菌15 m in,備用。

    M HB液體培養(yǎng)基:稱取M HB培養(yǎng)基12.5 g,加入蒸餾水500 m L,溶解,分裝,煮至清澈透明,121 ℃高壓滅菌15 m in,備用。

    1.3甘氨酸在不同濃度、pH值、時(shí)間下的抑菌作用

    1.3.1濃度對抑菌效果的影響

    取潔凈無菌的96孔板,8列(1~8)×12行(A~L),pH=7的甘氨酸儲(chǔ)備液和液體培養(yǎng)基、菌液。

    96孔板1~8列加入順序見表1,A~D行加入E.coli菌液,E~H行加入Sa菌液,加入完畢后,將96孔板放入恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)溫度為37 ℃,14 h后取出,用酶標(biāo)儀測定O D620值,計(jì)算抑菌率。

    1.5.2pH值對抑菌效果的影響

    以1.5.1中對抑菌效果顯著的最低濃度為最佳抑菌濃度,參照表1在96孔板中加入pH值分別為5、6、7、8、9的該濃度甘氨酸儲(chǔ)備液,加入相應(yīng)的無菌水、液體培養(yǎng)基和菌液,放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14 h后,取出,用酶標(biāo)儀測定O D620值,計(jì)算抑菌率。

    1.5.3抑菌時(shí)間對抑菌效果的影響

    將1.5.2中抑菌效果最佳的處理再放回37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔2 h測定O D620值,即記錄14、16、18、20 h和22 h時(shí),在最佳抑菌濃度、最佳抑菌pH值條件下,甘氨酸的抑菌率隨時(shí)間的變化情況。

    1.5.4抑菌率計(jì)算方法

    抑菌率按照公式(1)計(jì)算:

    當(dāng)實(shí)驗(yàn)O D值大于陽性對照O D值時(shí),抑菌率記為0.0%;當(dāng)實(shí)驗(yàn)O D值小于陰性對照O D值時(shí),抑菌率記為100.0%。

    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

    2.1不同濃度甘氨酸的抑菌效果

    濃度為0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和2.5%的甘氨酸對E.coli的抑菌率分別為0.0%、37.4%、76.1%、100.0%和100.0%,如圖1所示。由圖1可知,隨著甘氨酸濃度的增加,對E.coli的抑制作用增強(qiáng),甘氨酸濃度到達(dá)2.0%后,甘氨酸對E.coli的抑菌率達(dá)100%。甘氨酸濃度為0.5%時(shí),對E.coli沒有抑菌作用,甘氨酸屬于氨基酸,是E.coli良好的營養(yǎng)物質(zhì),此時(shí)E.coli將甘氨酸作為營養(yǎng)物質(zhì)吸收;濃度為1.0%時(shí),甘氨酸開始抑制E.coli,當(dāng)濃度到2.0%時(shí),抑菌率為100.0%,抑菌效果最佳,濃度升高到2.5%,抑菌率同樣為100%,說明濃度達(dá)到2.0%后甘氨酸對E.coli都有很好的抑制作用。

    表1 甘氨酸的抑菌濃度

    圖1 pH為7的甘氨酸對E.coli的抑制作用

    測定濃度為0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3.0%的甘氨酸對Sa的抑制作用,得到抑菌率分別為0.0%、0.0%、2.6%、55.9%、100.0%、100.0%,如圖2所示。由圖2可知,隨著甘氨酸濃度的增加,對Sa的抑制作用增強(qiáng),當(dāng)甘氨酸濃度達(dá)到2.5%時(shí),甘氨酸對Sa的抑菌率達(dá)到100%。甘氨酸濃度為0.5%、1.0%時(shí),對Sa沒有抑菌作用,此時(shí)Sa以甘氨酸為營養(yǎng)物質(zhì);濃度為1.5%時(shí),甘氨酸開始對Sa產(chǎn)生抑制作用,當(dāng)濃度到2.5%時(shí),抑菌率為100.0%,抑菌效果最佳,濃度升高到3.0%,抑菌率同樣為100.0%,說明當(dāng)濃度到達(dá)2.5%時(shí),甘氨酸對Sa有很好的抑制作用。

    圖2 pH為7甘氨酸對Sa的抑制作用

    甘氨酸可作為微生物的良好氮源,對E.coli和Sa是營養(yǎng)物質(zhì),因此甘氨酸濃度過低則無法很好地抑制E.coli和Sa的生長,濃度過高則成本增加,并且對于氨基酸含量豐富的食品,添加的甘氨酸過量還可能會(huì)導(dǎo)致人體對營養(yǎng)吸收不平衡,因此甘氨酸對E.coli的最佳抑制濃度應(yīng)選擇2.0%,對Sa的最佳抑制濃度應(yīng)選擇2.5%。

    2 2 不同pH值甘氨酸的抑菌效果

    設(shè)置濃度為2.0%,pH值分別為5、6、7、8和9的甘氨酸溶液,測定其對E.coli的抑制作用效果,抑菌率分別為95.2%、98.1%、100.0%、100.0%、96.7%,如圖3所示。由圖3可知甘氨酸在pH 5~9范圍內(nèi)對E.coli都有良好的抑菌效果,且抑菌率差異不明顯,表明甘氨酸在pH 5~9的范圍內(nèi)都有抑菌作用。

    圖3 2.0%甘氨酸對E.coli的抑制作用

    設(shè)置濃度為2.5%,pH值分別為5、6、7、8和9的甘氨酸溶液,測定其對Sa的抑制作用效果,抑菌率分別為100.0%、92.4%、98.1%、97.0%、86.9%,如圖4所示。由圖4可知,甘氨酸在pH 5~9的范圍內(nèi)對Sa都有較好的抑菌效果,除pH=9的甘氨酸外,其他甘氨酸抑菌均抑菌率超過90.0%,且差異不明顯,表明甘氨酸在pH 5~8的范圍內(nèi)對Sa有良好抑菌作用,pH=9的甘氨酸抑菌效果稍差。

    圖4 2.5%甘氨酸對Sa的抑制作用

    甘氨酸在pH值為5~9的范圍內(nèi)對E.coli的抑制率均達(dá)到95.0%以上,對Sa的抑制率均達(dá)到85.0%以上,表明甘氨酸在較寬的pH值范圍內(nèi)對E.coli和Sa有廣泛的抑制作用。由圖3可知,甘氨酸在pH值為7或8時(shí),對E.coli的抑菌效果最佳,由圖4可知甘氨酸在pH為7時(shí)抑菌率為98.1%,pH值為8時(shí)為97.0%,pH為7比pH為8抑菌更好,綜合考慮,甘氨酸對E.coli的最佳抑菌的pH應(yīng)為7。由圖4可知甘氨酸的pH值為5時(shí)對Sa的抑菌效果最佳,因此甘氨酸對Sa的最佳抑菌pH為5。

    2.3不同時(shí)間甘氨酸的抑菌效果

    選擇甘氨酸濃度為2.0%,pH值為7,設(shè)置14、16、18、20 h和22 h 5個(gè)不同的培養(yǎng)時(shí)間,測定甘氨酸對E.coli的抑制效果,得到的抑菌率分別為100.0%、95.4%、100.0%、100.0%、98.3%,如圖5所示。由圖5可知,甘氨酸對E.coli的抑制作用隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,甘氨酸對E.coli的抑菌率沒有明顯變化,即甘氨酸在5個(gè)培養(yǎng)時(shí)間里對E.coli都有良好的抑制效果,且5個(gè)時(shí)間里的抑菌率差異不明顯,表明甘氨酸在14~22 h內(nèi)對E.coli有良好的抑菌效果。

    圖5 濃度為2.0%,pH值為7的甘氨酸對E.coli的抑制作用

    選擇濃度為2.5%,pH值為5的甘氨酸,設(shè)置14、16、18、20 h和22 h 5個(gè)不同的培養(yǎng)時(shí)間,測定甘氨酸對Sa的抑制效果,得到的抑菌率分別為100.0%、100.0%、96.4%、91.1%、92.0%,如圖6所示。由圖6可知,甘氨酸對Sa的抑制作用隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加逐漸減弱,當(dāng)時(shí)間到16 h時(shí),抑菌率為100.0%,16 h后抑菌率降低,說明培養(yǎng)時(shí)間在16 h內(nèi)甘氨酸對Sa的抑制效果很好。甘氨酸在設(shè)置的5個(gè)培養(yǎng)時(shí)間里對Sa都有良好的抑制效果,并且五個(gè)時(shí)間里的抑菌率差異不明顯,表明甘氨酸在14~16 h內(nèi)對Sa有良好的抑菌效果。

    圖6 濃度為2.5%,pH值為5的甘氨酸對Sa的抑制作用

    甘氨酸在較長的時(shí)間內(nèi)對E.coli和Sa的抑制作用達(dá)到90.0%以上,呈現(xiàn)出較好的抑菌效果,表明甘氨酸能在較長的時(shí)間范圍內(nèi)起到良好的抑菌作用。

    3 結(jié)論

    通過測定不同濃度、pH值和時(shí)間的甘氨酸對E.coli和Sa這兩種細(xì)菌的抑菌率,確定甘氨酸濃度為2.0%,pH為7,培養(yǎng)14~22 h時(shí),對E.coli的抑制作用最佳;甘氨酸濃度為2.5%,pH值為5,培養(yǎng)時(shí)間在16 h內(nèi)對Sa的抑制最佳。甘氨酸對E.coli和Sa都有較好的抑制作用。

    對比不同濃度甘氨酸對E.coli和Sa的抑制作用,較低的甘氨酸濃度即可抑制E.coli的生長繁殖,說明E.coli對甘氨酸更為敏感。對比甘氨酸在pH值在5~9的范圍內(nèi)對E.coli和Sa的抑制作用,pH的變化對E.coli和Sa的抑制效果影響不大。對比培養(yǎng)時(shí)間對E.coli和Sa的抑制作用,在22h內(nèi)甘氨酸對E.coli的抑制效果變化較小,在16 h后對Sa的抑制作用隨著時(shí)間的延長而減弱,說明甘氨酸對E.coli的抑制時(shí)間更為長久。

    4 結(jié)語

    大腸桿菌為革蘭氏陰性菌,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性菌,甘氨酸對這兩種細(xì)菌都有良好的抑制作用,并在較寬的pH值范圍和時(shí)間范圍內(nèi)其抑菌率沒有顯著差異。

    甘氨酸可作為一種安全無害的防腐劑應(yīng)用于易被E.coli和Sa污染的食品中,如米粉,糕點(diǎn)。甘氨酸既具有防腐作用,又具有營養(yǎng)和改善食品風(fēng)味等作用,其研究和開發(fā)利用有著廣闊的前景。

    [1]宋彥梅,尹秋響,王靜康.甘氨酸的應(yīng)用及生產(chǎn)技術(shù)[J].氨基酸和生物資源,2003(2):55-60.

    [2]胡衛(wèi)國,尹秋響,任立人.甘氨酸合成與分離新工藝的研究[D].天津:天津大學(xué)化工學(xué)院,2005.

    [3]熊國華,楊哲民,候鹿.甘氨酸及其衍生物的抗菌作用[J].氨基酸雜志,1994(4):31-34

    [4]袁小娟,吳希茜.甘氨酸的生理作用與應(yīng)用[J].飲料工業(yè),2011(7):5-7.

    [5]毛建衛(wèi),崔艷麗.甘氨酸的生產(chǎn)方法及在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J].食品工業(yè)科技,1998(28):59-60.

    [6]楊華.甘氨酸的生產(chǎn)應(yīng)用概況[J].四川化工,2004(3):31-34.

    [7]趙浩,梁翠巖,陳英軍.甘氨酸生成現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J].產(chǎn)業(yè)市場,2009(18):33-35.

    [8]石春芝,蒲一壽,鄭宗坤,等.甘氨酸的防腐作用研究初探[J].食品與發(fā)酵科技,2003(2):61-62.

    [9]席曉嵐.4-硝基苯甲醛甘氨酸Schiff堿的合成、表征及抑菌活性.西南師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,1992(1):46-49.

    中藥制劑共性技術(shù)研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室子課題(編號(hào):J16093)。

    廖夏云(1985-),女,博士。研究方向:食品質(zhì)量與安全。

    猜你喜歡
    甘氨酸濃度效果
    拍照濃度有待降低
    中紅外光譜分析甘氨酸分子結(jié)構(gòu)及熱變性
    神醫(yī)的煩惱——濃度與配比
    按摩效果確有理論依據(jù)
    迅速制造慢門虛化效果
    抓住“瞬間性”效果
    中華詩詞(2018年11期)2018-03-26 06:41:34
    模擬百種唇妝效果
    Coco薇(2016年8期)2016-10-09 02:11:50
    對改良的三種最小抑菌濃度測試方法的探討
    對羥基苯甘氨酸合成條件的研究
    人間(2015年11期)2016-01-09 13:12:58
    稀土釤鄰香草醛縮甘氨酸席夫堿配合物的合成及表征
    精品一区二区三区av网在线观看| 久久热精品热| 美女黄网站色视频| 国产精品久久视频播放| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 波野结衣二区三区在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 波多野结衣巨乳人妻| 99视频精品全部免费 在线| 日韩精品有码人妻一区| 色精品久久人妻99蜜桃| 天堂影院成人在线观看| 九九在线视频观看精品| 亚州av有码| www.www免费av| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美最新免费一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 国模一区二区三区四区视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品98久久久久久宅男小说| 香蕉av资源在线| 国产精品久久久久久av不卡| 国产在视频线在精品| 成年版毛片免费区| 精品一区二区免费观看| 久久久久九九精品影院| 国内精品久久久久精免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 免费av毛片视频| 欧美黑人巨大hd| 亚洲人成网站在线播| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品无大码| 极品教师在线免费播放| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 特级一级黄色大片| 美女免费视频网站| 中国美女看黄片| 内地一区二区视频在线| 中文亚洲av片在线观看爽| 香蕉av资源在线| 午夜老司机福利剧场| 日韩欧美在线二视频| 亚洲av五月六月丁香网| 久久久久久久久大av| 国模一区二区三区四区视频| 天堂网av新在线| 精品一区二区三区人妻视频| 综合色av麻豆| 美女 人体艺术 gogo| 免费一级毛片在线播放高清视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲电影在线观看av| 日韩欧美三级三区| 成人av在线播放网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产私拍福利视频在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 深夜精品福利| 无人区码免费观看不卡| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产一区二区在线观看日韩| 欧美在线一区亚洲| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲av五月六月丁香网| 美女黄网站色视频| 午夜激情福利司机影院| 又黄又爽又免费观看的视频| 美女黄网站色视频| 国产精品一区www在线观看 | 亚洲五月天丁香| 国产av一区在线观看免费| 小说图片视频综合网站| 精品久久久久久久久av| 久久久久性生活片| 亚洲av五月六月丁香网| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜免费激情av| 国产精品一区二区免费欧美| 日韩一本色道免费dvd| 综合色av麻豆| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 简卡轻食公司| 伦精品一区二区三区| 国产 一区精品| 69av精品久久久久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 波野结衣二区三区在线| 国产精品三级大全| 极品教师在线视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 中文字幕熟女人妻在线| 日韩欧美在线二视频| 久久香蕉精品热| 国产av不卡久久| 三级毛片av免费| 国产亚洲精品av在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲av成人精品一区久久| 悠悠久久av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 99热这里只有是精品在线观看| 免费看光身美女| 国产主播在线观看一区二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 午夜日韩欧美国产| 精品国产三级普通话版| 亚洲国产色片| 亚洲欧美日韩东京热| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩高清综合在线| 国产精品人妻久久久久久| 国产 一区精品| 精品久久久久久久末码| 久久久久久久久中文| 成人三级黄色视频| 在现免费观看毛片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产精品免费一区二区三区在线| 精品无人区乱码1区二区| 日韩国内少妇激情av| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 简卡轻食公司| 精品福利观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲电影在线观看av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产极品精品免费视频能看的| 有码 亚洲区| 欧美中文日本在线观看视频| 成年女人看的毛片在线观看| 观看美女的网站| 亚洲第一电影网av| 神马国产精品三级电影在线观看| videossex国产| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 精品人妻1区二区| 久久久久久久精品吃奶| 啦啦啦韩国在线观看视频| 最好的美女福利视频网| 久久久久九九精品影院| 久久久久久久久中文| 欧美bdsm另类| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲最大成人中文| 有码 亚洲区| 亚洲精品456在线播放app | 成人av在线播放网站| 国产精品亚洲美女久久久| 99久久精品热视频| 99热这里只有是精品在线观看| 国产乱人伦免费视频| 国产精品久久久久久精品电影| 1024手机看黄色片| 老司机深夜福利视频在线观看| 精品一区二区免费观看| 性欧美人与动物交配| 一级黄色大片毛片| 欧美一区二区国产精品久久精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | avwww免费| 免费观看的影片在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 搡老妇女老女人老熟妇| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 22中文网久久字幕| 久久久久国内视频| 国产免费男女视频| 精品久久久久久久久av| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲精品亚洲一区二区| 男插女下体视频免费在线播放| 看黄色毛片网站| 热99在线观看视频| 欧美3d第一页| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 最近中文字幕高清免费大全6 | 欧美bdsm另类| 欧美色欧美亚洲另类二区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产黄色小视频在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 午夜a级毛片| 国产真实乱freesex| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲精品色激情综合| 麻豆av噜噜一区二区三区| 久久香蕉精品热| av在线天堂中文字幕| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品久久视频播放| 天天一区二区日本电影三级| a级毛片a级免费在线| 日韩欧美在线二视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 欧美一区二区亚洲| 欧美最黄视频在线播放免费| 一进一出好大好爽视频| 欧美3d第一页| 国产免费一级a男人的天堂| 国产黄色小视频在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 热99re8久久精品国产| 伊人久久精品亚洲午夜| 少妇的逼好多水| 99热这里只有是精品在线观看| 一级黄色大片毛片| 丝袜美腿在线中文| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 99热精品在线国产| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 99热这里只有精品一区| 亚洲av中文av极速乱 | 日韩精品青青久久久久久| 最近最新免费中文字幕在线| 日韩国内少妇激情av| 床上黄色一级片| 亚洲av不卡在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品久久久久久av不卡| 久久久久精品国产欧美久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 欧美又色又爽又黄视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美不卡视频在线免费观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 精品一区二区三区av网在线观看| 香蕉av资源在线| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品在线观看二区| 成人性生交大片免费视频hd| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久久午夜福利片| 色5月婷婷丁香| 波多野结衣高清作品| 免费黄网站久久成人精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲va在线va天堂va国产| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 88av欧美| 中文在线观看免费www的网站| 91av网一区二区| 成人av在线播放网站| 小说图片视频综合网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 色哟哟·www| 级片在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲色图av天堂| 俄罗斯特黄特色一大片| 色综合婷婷激情| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美国产日韩亚洲一区| 精品久久久久久久久亚洲 | 一区福利在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 两人在一起打扑克的视频| 12—13女人毛片做爰片一| 成人无遮挡网站| 不卡视频在线观看欧美| 免费大片18禁| av在线亚洲专区| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲天堂国产精品一区在线| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品伦人一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 啦啦啦啦在线视频资源| 99国产极品粉嫩在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品一区二区性色av| 久久久久国内视频| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲精品影视一区二区三区av| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 久久久久久久久久黄片| 乱码一卡2卡4卡精品| 精品久久久久久久久亚洲 | 久久久久久伊人网av| 精品日产1卡2卡| av中文乱码字幕在线| 简卡轻食公司| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲四区av| 国产高清不卡午夜福利| 天天躁日日操中文字幕| h日本视频在线播放| 国产伦人伦偷精品视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产av不卡久久| 真实男女啪啪啪动态图| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 精品久久久久久久久亚洲 | 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲第一电影网av| 久久久久久久久大av| 亚洲不卡免费看| 精品久久久久久久久亚洲 | 97超视频在线观看视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av美国av| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 丰满的人妻完整版| 级片在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | av黄色大香蕉| 久久久成人免费电影| 精品久久久久久成人av| 黄色女人牲交| 天堂影院成人在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| av黄色大香蕉| 日韩欧美三级三区| 成人综合一区亚洲| 天堂√8在线中文| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品av视频在线免费观看| 人妻久久中文字幕网| 精品人妻视频免费看| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲不卡免费看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99精品在免费线老司机午夜| 有码 亚洲区| 成人一区二区视频在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 看黄色毛片网站| 九九热线精品视视频播放| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 有码 亚洲区| 99热精品在线国产| 久久久久久大精品| 韩国av一区二区三区四区| 嫩草影院精品99| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 精品久久国产蜜桃| 在线国产一区二区在线| 超碰av人人做人人爽久久| 在线播放无遮挡| 99九九线精品视频在线观看视频| 搞女人的毛片| 校园人妻丝袜中文字幕| 99久久九九国产精品国产免费| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产黄片美女视频| 性色avwww在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 午夜精品在线福利| 国产爱豆传媒在线观看| 免费在线观看成人毛片| 成人三级黄色视频| 日本三级黄在线观看| 99久久精品热视频| 99热这里只有是精品50| 精品久久久久久久久av| 国产亚洲精品av在线| 成年人黄色毛片网站| 亚洲第一区二区三区不卡| 精品欧美国产一区二区三| 免费在线观看影片大全网站| 国产美女午夜福利| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美激情综合另类| 无遮挡黄片免费观看| 极品教师在线视频| 亚洲综合色惰| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 免费av观看视频| 国产精品精品国产色婷婷| 国产伦一二天堂av在线观看| 日韩av在线大香蕉| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲四区av| 国产精品一区二区性色av| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲精品一区av在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 中文字幕久久专区| 国产一区二区激情短视频| 中文字幕高清在线视频| 搡老妇女老女人老熟妇| h日本视频在线播放| a在线观看视频网站| 亚洲第一区二区三区不卡| 久9热在线精品视频| 97碰自拍视频| 欧美中文日本在线观看视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 黄色丝袜av网址大全| 亚州av有码| 中文字幕久久专区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 成人精品一区二区免费| 欧美性猛交黑人性爽| 中文资源天堂在线| 亚洲av熟女| 伦理电影大哥的女人| 国产成人影院久久av| 国产一区二区三区视频了| 久9热在线精品视频| 久久热精品热| 久久久国产成人精品二区| 色噜噜av男人的天堂激情| 成人亚洲精品av一区二区| 在线观看一区二区三区| 日韩欧美国产在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国模一区二区三区四区视频| 一区二区三区高清视频在线| 成年免费大片在线观看| 少妇丰满av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 91麻豆精品激情在线观看国产| 伦理电影大哥的女人| 一夜夜www| 黄色一级大片看看| 成年人黄色毛片网站| 国产免费一级a男人的天堂| 韩国av在线不卡| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 长腿黑丝高跟| 99久久精品一区二区三区| 成人特级av手机在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 丝袜美腿在线中文| 精品一区二区三区人妻视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品久久久久久久久av| 欧美人与善性xxx| 午夜福利在线观看吧| 人妻夜夜爽99麻豆av| 桃色一区二区三区在线观看| 少妇丰满av| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩精品中文字幕看吧| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 嫁个100分男人电影在线观看| 悠悠久久av| 国产淫片久久久久久久久| 2021天堂中文幕一二区在线观| 成人亚洲精品av一区二区| 99热只有精品国产| 亚洲无线观看免费| 午夜福利在线观看吧| 一进一出抽搐gif免费好疼| 美女高潮的动态| 他把我摸到了高潮在线观看| 少妇的逼水好多| 亚洲av熟女| 不卡一级毛片| 国产69精品久久久久777片| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲成人免费电影在线观看| x7x7x7水蜜桃| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品野战在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 999久久久精品免费观看国产| 国产成人av教育| 五月伊人婷婷丁香| 淫妇啪啪啪对白视频| 免费大片18禁| av.在线天堂| 国产日本99.免费观看| 国产高清激情床上av| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲av熟女| 我的老师免费观看完整版| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲av.av天堂| 18+在线观看网站| 欧美成人a在线观看| 国产乱人视频| 日本三级黄在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 少妇高潮的动态图| 1024手机看黄色片| 精品久久久久久久久亚洲 | 制服丝袜大香蕉在线| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 人妻少妇偷人精品九色| 村上凉子中文字幕在线| 久久人妻av系列| 亚洲精品国产成人久久av| 一个人看视频在线观看www免费| 嫁个100分男人电影在线观看| av在线观看视频网站免费| 天堂影院成人在线观看| 极品教师在线免费播放| 日韩中文字幕欧美一区二区| 成人鲁丝片一二三区免费| 99热只有精品国产| 搞女人的毛片| 麻豆国产av国片精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品女同一区二区软件 | 久久久久性生活片| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美+日韩+精品| 男插女下体视频免费在线播放| 国产精品福利在线免费观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 观看美女的网站| 色哟哟哟哟哟哟| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲av五月六月丁香网| 少妇人妻精品综合一区二区 | 欧美日韩综合久久久久久 | 国产爱豆传媒在线观看| 日本三级黄在线观看| 日韩强制内射视频| 亚洲中文字幕日韩| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲av成人av| 看十八女毛片水多多多| 韩国av在线不卡| 97超视频在线观看视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 麻豆成人午夜福利视频| 国产主播在线观看一区二区| 国产精品人妻久久久久久| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲自拍偷在线| 免费观看精品视频网站| 一个人观看的视频www高清免费观看| 久久久久久九九精品二区国产| 日本在线视频免费播放| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产老妇女一区| 欧美丝袜亚洲另类 | 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久久国产成人免费| 国产高清激情床上av| 欧美日本视频| 亚洲欧美日韩高清专用| 最新中文字幕久久久久| 免费av观看视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 美女免费视频网站| 国产在线男女| 性插视频无遮挡在线免费观看| av中文乱码字幕在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美zozozo另类| 又粗又爽又猛毛片免费看| 中文在线观看免费www的网站| 搡老妇女老女人老熟妇| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日本爱情动作片www.在线观看 | 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 老司机福利观看| 日韩强制内射视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美极品一区二区三区四区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 综合色av麻豆| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 精品久久久久久成人av| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 免费在线观看影片大全网站| 在线播放国产精品三级| 在线观看美女被高潮喷水网站| 午夜福利高清视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美又色又爽又黄视频| 成人综合一区亚洲|