固相萃取/液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定面膜類(lèi)化妝品中非法添加的53種糖皮質(zhì)激素

羅輝泰，黃曉蘭，吳惠勤，朱志鑫，黃　芳，林曉珊，馬葉芬，

鄧　欣，周培才，張秋炎，簡(jiǎn)艷婷

(中國(guó)廣州分析測(cè)試中心　廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東　廣州　510070)

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約稿專(zhuān)欄

固相萃取/液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定面膜類(lèi)化妝品中非法添加的53種糖皮質(zhì)激素

羅輝泰*，黃曉蘭，吳惠勤，朱志鑫，黃芳，林曉珊，馬葉芬，

鄧欣，周培才，張秋炎，簡(jiǎn)艷婷

(中國(guó)廣州分析測(cè)試中心廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510070)

摘要：建立了固相萃取/液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(SPE/LC-MS/MS)同時(shí)測(cè)定面膜類(lèi)化妝品中53種糖皮質(zhì)激素的方法。樣品經(jīng)水分散后，加入甲醇渦旋提取，提取液用水稀釋后，采用Cleanert PEP(60 mg，3 mL)固相萃取小柱凈化。待測(cè)物經(jīng)Waters CORTECS C18+(100 mm×2.1 mm，2.7 μm)色譜柱分離，在電噴霧離子源的正離子模式下以動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(DMRM)模式采集數(shù)據(jù)并作定性篩查和定量分析。53種藥物在相應(yīng)的濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，在3個(gè)不同濃度加標(biāo)水平下，平均回收率為66.8%~106.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.9%~13.2%，檢出限(LOD，S/N≥3)和定量下限(LOQ，S/N≥10)分別為3 μg/kg及10 μg/kg。該方法操作簡(jiǎn)便、定性可靠、定量準(zhǔn)確、靈敏度高，適用于化妝品中非法添加糖皮質(zhì)激素的定性確證和準(zhǔn)確定量。

關(guān)鍵詞：化妝品；糖皮質(zhì)激素；固相萃?。灰合嗌V-串聯(lián)質(zhì)譜法；動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；非法添加

隨著電商及微商的興起，面膜成為消費(fèi)量最大的化妝品之一，但其安全性堪憂(yōu)。近來(lái)，諸如“毒面膜”致消費(fèi)者“毀容”的化妝品安全事件頻頻被各大媒體報(bào)道，因使用“激素面膜”而患上激素性皮炎的患者日益增多，引起人們的高度關(guān)注。

研究表明，糖皮質(zhì)激素具有調(diào)節(jié)糖、脂肪和蛋白質(zhì)生物合成和代謝的作用。臨床上糖皮質(zhì)激素作為抗感染藥物，可抑制纖維細(xì)胞增生，減少5-羥色胺形成，因而對(duì)皮膚有一定的嫩白作用[1]。但如果長(zhǎng)期使用含有這類(lèi)物質(zhì)的化妝品，將會(huì)引起皮膚變薄、毛細(xì)血管擴(kuò)張、毛囊萎縮，一旦停用，皮膚就會(huì)發(fā)紅、發(fā)癢，出現(xiàn)紅斑、丘疹、脫屑等激素依賴(lài)性皮炎癥狀，過(guò)量使用還會(huì)引發(fā)血糖升高、高血壓、骨質(zhì)疏松、免疫功能下降及肥胖等危害[2]。因此，我國(guó)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)[3]及歐盟化妝品規(guī)程[4]中均明確規(guī)定，化妝品中禁用糖皮質(zhì)激素。

目前，針對(duì)化妝品中糖皮質(zhì)激素殘留的檢測(cè)已有報(bào)道，方法主要為液相色譜法[5-7]及液相色譜-質(zhì)譜法[8-15]。然而，這些方法可同時(shí)分析的藥物種類(lèi)太少、覆蓋面窄，無(wú)法有效排除化妝品非法添加糖皮質(zhì)激素的安全隱患。目前用于化妝品中的糖皮質(zhì)激素多達(dá)數(shù)十種，而且呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，盡管現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法[15]能同時(shí)檢測(cè)的種類(lèi)已達(dá)到41種，但尚不能滿(mǎn)足日常監(jiān)管需求，給不法商家可乘之機(jī)。本研究首次建立了同時(shí)測(cè)定面膜類(lèi)化妝品中53種糖皮質(zhì)激素(包括國(guó)標(biāo)規(guī)定的41種以及氟輕松、地索奈德、環(huán)索奈德、鹵美他松、帕拉米松、帕拉米松乙酸酯、戊酸雙氟可龍、異氟潑尼松、去羥米松、鹵貝他索丙酸酯、氟尼縮松及依碳氯替潑諾12種“國(guó)標(biāo)外”糖皮質(zhì)激素)的固相萃取/液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(SPE/LC-MS/MS)，并實(shí)現(xiàn)了其中11組同分異構(gòu)體的良好分離，是目前可同時(shí)分析糖皮質(zhì)激素種類(lèi)最多的方法。該法操作簡(jiǎn)便快速、定性可靠、定量準(zhǔn)確，可分析的藥物種類(lèi)多、覆蓋面廣，靈敏度高，可為化妝品中糖皮質(zhì)激素的定性篩查及定量分析提供技術(shù)支持，并有效地提高化妝品的安全監(jiān)管、監(jiān)控水平。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

Agilent 1200 SL Series RRLC/6410B Triple Quard MS快速高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent公司)；AS 3120超聲波發(fā)生器(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)；Anke TDL-40B離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；XW-80A快速混勻器(海門(mén)市麒麟醫(yī)用儀器廠)。

53種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(詳見(jiàn)表1)購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院、德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司、美國(guó)藥典委員會(huì)(USP)及加拿大Toronto Research Chemicals公司。甲醇、乙腈(色譜純，德國(guó)Merck公司)；甲酸(LC-MS級(jí)，美國(guó)Sigma公司)；亞鐵氰化鉀溶液(K4Fe(CN)6·3H2O)、乙酸鋅(C4H6O4Zn·2H2O)(分析純，廣州化學(xué)試劑廠)；Oasis HLB(60 mg，3 mL)固相萃取小柱(美國(guó)Waters公司)；Cleanert PEP(60 mg，3 mL)固相萃取小柱(天津博納艾杰爾科技有限公司)；HyperSep Retain PEP(60 mg，3 mL)固相萃取小柱(美國(guó)Thermo Fisher公司)；實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水。

1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

以甲醇為溶劑，將53種糖皮質(zhì)激素分別配成質(zhì)量濃度為1 000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置棕色儲(chǔ)液瓶中于-18 ℃保存，臨用時(shí)以50%乙腈稀釋成適當(dāng)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3樣品預(yù)處理

1.3.1提取準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品0.5 g(精確至0.01 g)，置于15 mL帶螺旋蓋的聚丙烯離心管中，加入 2 mL 水，在快速混勻器上充分渦旋混勻1 min，加入3 mL甲醇，充分渦旋混勻2 min，移取上清液2 mL至50 mL帶螺旋蓋的聚丙烯離心管中，加入20 mL水以及0.2 mL亞鐵氰化鉀溶液(稱(chēng)取10.6 g亞鐵氰化鉀，用水溶解并定容至100 mL)，渦旋混勻，再加入0.2 mL乙酸鋅溶液(稱(chēng)取21.9 g乙酸鋅，用水溶解并定容至100 mL)，渦旋混勻，4 000 r/min 離心10 min，取上清液，待凈化。

1.3.2凈化依次用3 mL甲醇、5 mL水活化固相萃取小柱。向活化好的小柱中倒入待凈化樣液，保持重力自流狀態(tài)，直至所有樣液通過(guò)小柱，加入5 mL 10%甲醇淋洗小柱，保持自流直至液體流盡，再用洗耳球?qū)埩粼谥系囊后w壓出，棄去流出液。最后加入5 mL乙腈洗脫目標(biāo)物，保持重力自流，待液體流盡后，用洗耳球壓出殘留液體，用帶1 mL刻度的梨形瓶收集所有洗脫液，置于40 ℃水浴中，氮吹濃縮至近干，用50%乙腈定容至刻度，超聲30 s，渦旋混勻，過(guò)0.22 μm濾膜，待上機(jī)測(cè)定。

表1　53種糖皮質(zhì)激素的質(zhì)譜采集參數(shù)

* quantitative ion,RT:retention time

1.4空白基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取陰性樣品，按“1.3”方法處理，得到空白基質(zhì)溶液，作為稀釋劑用于配制上機(jī)測(cè)試用混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.5色譜與質(zhì)譜條件

采用Waters CORTECS C18+(100 mm×2.1 mm，2.7 μm)色譜柱，流動(dòng)相：A為0.2%甲酸水溶液，B為0.2%甲酸乙腈溶液，梯度洗脫程序：0~10.0 min，20%B；10.0~18.0 min，20%~28%B；18.0~21.0 min，28%~38%B；21.0~25.0 min，38%~40%B；25.0~28.0 min，40%~42%B；28.0~30.0 min，42%~50%B；30.0~33.0 min，50%~60%B；33.0~33.1 min，60%~90%B；33.1~35.0 min，90%B；35.0~35.1 min，90%~20%B；35.1~40.0 min，20%B。柱溫：35 ℃；流速：0.4 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL。 電噴霧離子源(ESI)：正離子模式；動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(DMRM)采集方式；干燥氣溫度：350 ℃；干燥氣流量：12.0 L/min；霧化氣壓力：276 kPa；毛細(xì)管電壓：4 kV；MS1及MS2均為單位分辨率；53種糖皮質(zhì)激素的質(zhì)譜采集參數(shù)見(jiàn)表1。

2結(jié)果與討論

2.1質(zhì)譜與色譜條件的優(yōu)化

在電噴霧離子源下，分別對(duì)濃度為1.0 μg/mL的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液做正離子和負(fù)離子全掃描分析，發(fā)現(xiàn)53種待測(cè)化合物響應(yīng)最佳的準(zhǔn)分子離子峰均在正離子模式下獲得，且母離子均為[M+H]+。在此基礎(chǔ)上，優(yōu)化各化合物的碎裂電壓(Fragmentor)使其母離子的響應(yīng)最大化，然后對(duì)其進(jìn)行子離子全掃描分析，通過(guò)優(yōu)化碰撞能量(Collision energy)使其子離子的響應(yīng)最大化。根據(jù)歐盟2002/657/EC決議中有關(guān)質(zhì)譜分析方法必須不少于4個(gè)識(shí)別點(diǎn)的規(guī)定[16]，為各待測(cè)藥物選取質(zhì)譜響應(yīng)最佳的兩對(duì)MRM離子對(duì)及相應(yīng)的參數(shù)作為最終質(zhì)譜采集參數(shù)。由于同時(shí)測(cè)定的化合物較多，采用DMRM模式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，可在確保準(zhǔn)確定量的情況下仍有較高的靈敏度[17]。

圖1　糖皮質(zhì)激素的基本結(jié)構(gòu)Fig.1　Basic molecular structure of glucocorticoids

糖皮質(zhì)激素為甾體類(lèi)化合物，具有17個(gè)碳的環(huán)戊烷駢多氫菲基本母核結(jié)構(gòu)和含有Δ4-3,20-二酮、21-羥基的功能基[18]，其基本結(jié)構(gòu)如圖1所示。在此結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，人們對(duì)C-1~2位、C-6位、C-9α位、C-11β位及C-21位等位置進(jìn)行修飾而得到了種類(lèi)繁多的糖皮質(zhì)激素藥物。因此，這些化合物的結(jié)構(gòu)極為相似，本研究涉及的53種糖皮質(zhì)激素中有11組同分異構(gòu)體，給色譜分離條件的建立帶來(lái)了較大挑戰(zhàn)。 根據(jù)前期經(jīng)驗(yàn)，選用高柱效、窄內(nèi)徑、中等長(zhǎng)度的色譜柱Poroshell EC-C18(100 mm×2.1 mm，2.4 μm)和CORTECS C18+(100 mm×2.1 mm，2.7 μm)進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)后者對(duì)53種糖皮質(zhì)類(lèi)激素的分離效果、色譜峰形以及出峰時(shí)間均優(yōu)于前者。以含0.2%甲酸的水溶液為水相，含0.2%甲酸的乙腈為有機(jī)相，優(yōu)化梯度洗脫條件，經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，所有待測(cè)物均可獲得良好的峰形及較高的靈敏度，且所有11組同分異構(gòu)體亦獲得滿(mǎn)意的分離度(如圖2所示)。 53種糖皮質(zhì)激素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流色譜圖如圖3所示。

2.2樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

糖皮質(zhì)激素是具有甾體結(jié)構(gòu)的化合物，極性較小，脂溶性好，能溶于多種有機(jī)溶劑，結(jié)合文獻(xiàn)資料，選擇甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯、乙醚5種溶劑作為提取劑進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖4所示。乙醚及乙酸乙酯等弱極性溶劑的提取率普遍較低，尤其是部分極性較大的化合物的回收率低于30%；以丙酮作提取劑時(shí)，因基質(zhì)效應(yīng)較大而導(dǎo)致回收率偏低，其原因可能是由于丙酮能溶解與待測(cè)物極性相似的雜質(zhì)而增加了后續(xù)凈化難度，引起基質(zhì)干擾；乙腈和甲醇的提取率較理想且比較接近，基質(zhì)效應(yīng)相對(duì)較小，均可作為化妝品中糖皮質(zhì)激素的提取劑，但考慮到乙腈的毒性更大，價(jià)格更貴，故采用甲醇為提取劑。

圖3　53種糖皮質(zhì)激素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流(TIC)色譜圖Fig.3　Total ion current(TIC)chromatogram of 53 kinds of glucocorticoids mixed standard solution

圖4　不同溶劑對(duì)53種糖皮質(zhì)激素的提取效果Fig.4　Extraction efficiencies of 53 kinds of glucocorticoids on different solvents

化妝品是由各種具有不同功能的原料經(jīng)合理調(diào)配加工而成的混合物。常用的如保濕劑(丙二醇、丁二醇等)、防腐劑(苯氧乙醇、羥苯甲酯等)、增溶劑(橄欖油、蓖麻油等)、芳香劑以及著色劑等，復(fù)雜的樣品基質(zhì)給凈化帶來(lái)了困難。對(duì)于大分子雜質(zhì)，采用常用的澄清劑(亞鐵氰化鉀-乙酸鋅溶液)進(jìn)行物理絮凝，有效去除了蠟質(zhì)、硬脂酸、羊毛脂等雜質(zhì)[19]。

對(duì)于其他雜質(zhì)，采用固相萃取凈化手段。為了兼顧極性范圍較大的53種化合物，選用兼具親水親脂性能，比傳統(tǒng)C18填料選擇范圍更廣的HLB填料，比較了Oasis HLB(60 mg，3 mL)、HyperSep Retain PEP(60 mg，3 mL)及Cleanert PEP(60 mg，3 mL)3款常用SPE小柱的分離效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3款SPE柱的回收率、重復(fù)性及凈化效果均能達(dá)到測(cè)試要求，相對(duì)而言，Oasis HLB的回收率及重復(fù)性等指標(biāo)更佳，但價(jià)格較高。綜合考慮，選用性?xún)r(jià)比較高的Cleanert PEP小柱。在此基礎(chǔ)上，采用濃度水平為50 μg/kg的加標(biāo)樣品考察了5%甲醇、10%甲醇、15%甲醇、5%乙腈、10%乙腈及15%乙腈作淋洗液時(shí)的淋洗凈化效果。結(jié)果表明，10%甲醇的淋洗液可以獲得理想的凈化效果，且不會(huì)明顯降低待測(cè)物的回收率。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步考察了甲醇及乙腈兩種洗脫液的回收率，對(duì)于極性較小的環(huán)索奈德，乙腈的洗脫回收率比甲醇高，且5 mL的洗脫體積能使所有待測(cè)物得到較好的回收率。

2.3基質(zhì)效應(yīng)的消除

在液相色譜-質(zhì)譜分析中，客觀存在的基質(zhì)效應(yīng)會(huì)對(duì)分析方法的靈敏度、精密度以及準(zhǔn)確度造成影響，減少基質(zhì)效應(yīng)的方法通常包括稀釋樣品溶液、增加凈化步驟、采用同位素內(nèi)標(biāo)物、配制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液以及優(yōu)化色譜-質(zhì)譜條件等[20-21]。基質(zhì)效應(yīng)通常采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率與純?nèi)軇┡渲茦?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率之比進(jìn)行評(píng)價(jià)，其比值越接近1，說(shuō)明基質(zhì)效應(yīng)越小，反之亦然。在優(yōu)化條件下，考察了樣品的基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表2。除個(gè)別極性較大的待測(cè)物(如曲安西龍)的基質(zhì)效應(yīng)略大外，其余待測(cè)物的基質(zhì)效應(yīng)不明顯，因此，本研究采用配制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法，可以較好地消除基質(zhì)效應(yīng)帶來(lái)的偏差，保證了定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4線(xiàn)性范圍、回歸方程與檢出限

在優(yōu)化條件下，對(duì)6個(gè)濃度水平的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定。以待測(cè)物的峰面積(y)為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃度(x，μg/L)為橫坐標(biāo)作定量工作曲線(xiàn)，得到線(xiàn)性回歸方程，結(jié)果見(jiàn)表2。53種待測(cè)物的線(xiàn)性范圍均為2.5 ~200 μg/L，相關(guān)系數(shù)(r2)為0.997 8~0.999 8，表明各化合物具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。采用標(biāo)準(zhǔn)添加法進(jìn)行測(cè)定，以定量離子信噪比(S/N)大于3確定樣品的檢出限(LOD)，S/N大于10為定量下限(LOQ)，得到53種化合物的LOD均為3 μg/kg，LOQ均為10 μg/kg。

表2　53種待測(cè)物的基質(zhì)效應(yīng)、回歸方程及相關(guān)系數(shù)

(續(xù)表2)

AnalyteMatrixeffectRegressionequationr2AnalyteMatrixeffectRegressionequationr2110.868y=429.9x+173.00.9998380.855y=271.6x-147.70.9992120.678y=326.0x-680.70.9983390.877y=437.6x-482.90.9994130.935y=258.2x-18.70.9996400.925y=341.2x-960.30.9978140.901y=332.0x-481.60.9993410.938y=211.3x-372.70.9993151.024y=394.2x+170.90.9992420.992y=186.7x-409.80.9980160.899y=198.5x-85.70.9990430.957y=471.3x-617.00.9994170.926y=297.9x-197.10.9991440.964y=291.9x-261.20.9995180.963y=185.9x-287.90.9989450.937y=309.7x-376.30.9997190.972y=297.2x-431.70.9985460.986y=298.9x-145.00.9994200.993y=333.3x-430.80.9992470.934y=372.8x-419.80.9989210.948y=340.1x-445.80.9990480.974y=311.6x-113.40.9991220.872y=229.8x-98.10.9996491.031y=481.9x-871.70.9995230.943y=508.4x+500.00.9984500.978y=522.4x-1618.80.9982240.987y=151.7x+191.90.9994510.911y=270.6x-538.40.9991250.858y=343.5x-472.80.9992520.867y=410.2x-491.80.9994260.932y=273.7x-9.00.9979530.933y=182.5x-147.30.9992270.978y=552.3x-487.80.9983

*the column number representing the compounds correspond to Table 1

2.5回收率與精密度

取陰性化妝品樣品，分別進(jìn)行3個(gè)濃度水平(10，50，100 μg/kg)的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)加標(biāo)水平均按本文的處理方法進(jìn)行6個(gè)平行測(cè)定，計(jì)算得到53種待測(cè)物的平均回收率為66.8%~106.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.9%~13.2%(見(jiàn)表3)，均符合藥物殘留檢測(cè)要求。

表3　53種待測(cè)物的平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)

*the column number representing the compounds correspond to Table 1

圖5　典型陽(yáng)性樣品的總離子流(TIC)色譜圖Fig.5　Total ion current(TIC)chromatograms of typical positive samples

2.6實(shí)際樣品的測(cè)定

采用本文建立的方法，對(duì)客戶(hù)送檢的50款“合格”面膜(按GB/T 24800.2-2009標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)，41種糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)結(jié)果均為陰性樣品)作53種糖皮質(zhì)激素篩查分析，其中11款檢出地索奈德(含量為5.6 ~106 mg/kg)，5款檢出氟輕松(含量為4.3~65.6 mg/kg)，其余樣品均未檢出本文涉及的53種糖皮質(zhì)激素，陽(yáng)性率為32%。典型陽(yáng)性樣品的總離子流色譜圖如圖5所示。

實(shí)測(cè)結(jié)果表明，仍有不良廠商為了規(guī)避監(jiān)管，添加了現(xiàn)行國(guó)標(biāo)方法監(jiān)測(cè)范圍之外的糖皮質(zhì)激素，以期達(dá)到速效美白祛斑的功效。同時(shí)也表明，本法能夠有效、準(zhǔn)確、可靠地測(cè)定化妝品中53種糖皮質(zhì)激素，用于化妝品風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)監(jiān)測(cè)以及化妝品安全監(jiān)管，可以大大提高監(jiān)控水平。

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Simultaneous Determination of 53 Kinds of Glucocorticoids Illegally Added in Facial Mask Cosmetics by Solid-phase Extraction with Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

LUO Hui-tai*,HUANG Xiao-lan,WU Hui-qin,ZHU Zhi-xin,HUANG Fang,LIN Xiao-shan,MA Ye-fen,DENG Xin,ZHOU Pei-cai,ZHANG Qiu-yan,JIAN Yan-ting

(Guangdong Provincial Key Laboratory of Emergency Test for Dangerous Chemicals,China National Analytical Center (Guangzhou),Guangzhou510070,China)

Abstract：A comprehensive analytical method was developed and validated for the simultaneous determination of 53 kinds of glucocorticoids in facial mask cosmetics using solid-phase extraction(SPE)coupled with liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS).Cosmetic sample was dispersed with water，and the analytes were extracted with methanol by vortex mixer.The extracts were cleaned up with a Cleanert PEP(60 mg,3 mL) solid phase extraction cartridge after diluted with water.Electrospray ionization mass spectrometry was performed in the positive mode using dynamic multiple reaction monitor(DMRM) mode for the qualitative and quantitative analyses of 53 kinds of analytes after separation on a column of Waters CORTECS C18+(100 mm×2.1 mm，2.7 μm).The correlation coefficients for linear calibration curves were over 0.99 in the corresponding concentration range.The average recoveries of 53 drugs from spiked sample at three different concentration levels ranged from 66.8%to 106.3%, with relative standard deviation(RSDs)of 3.9%-13.2%.The limits of detection(LODs,S/N≥3)and quantitation(LOQs,S/N≥10)were 3 μg/kg and 10 μg/kg,respectively.The established method is simple,reliable,accurate and sensitive,and is suitable for the determination of glucocorticoids illegally added in cosmetics.

Key words：cosmetics；glucocorticoids;solid-phase extraction(SPE)；liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS)；dynamic multiple reaction monitoring(DMRM);illegal addition

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.63;O629.8

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào)：1004-4957(2016)02-0119-08

doi：10.3969/j.issn.1004-4957.2016.02.001

*通訊作者：羅輝泰，助理研究員，研究方向：色譜-質(zhì)譜分析技術(shù)，Tel：020-37656312，E-mail：luohuitai@qq.com

基金項(xiàng)目：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目“公益研究與能力建設(shè)”專(zhuān)項(xiàng)(2014A040401038)

收稿日期：2015-10-07；修回日期：2015-12-01