樟芝的研究進(jìn)展*

劉　靜，李朋朋，張　宇，葉會(huì)會(huì)，陳　坤

(1 聊城大學(xué)藥學(xué)院，山東　聊城　252000；2 山東聊城東昌府區(qū)農(nóng)業(yè)局，山東　聊城　252000)

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樟芝的研究進(jìn)展*

劉靜1，李朋朋2，張宇1，葉會(huì)會(huì)1，陳坤1

(1 聊城大學(xué)藥學(xué)院，山東聊城252000；2 山東聊城東昌府區(qū)農(nóng)業(yè)局，山東聊城252000)

樟芝是我國臺(tái)灣地區(qū)獨(dú)有的高價(jià)值真菌物種，具有解毒、保護(hù)肝臟、抗腫瘤和提高機(jī)體免疫力作用，一直以來作為傳統(tǒng)藥物使用。本文綜述了樟芝三萜化合物、多糖和多酚類物質(zhì)等主要化學(xué)組分的研究進(jìn)展，并對(duì)其相應(yīng)生物學(xué)保健功能、藥理學(xué)效應(yīng)及毒理作用以及固體發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)等方面的最新研究進(jìn)展情況做了系統(tǒng)介紹，并對(duì)其開發(fā)和應(yīng)用前景做了展望。

樟芝；功效成分；藥理和毒理作用

樟芝學(xué)名樟生薄孔菌(Antrodiacinnamomea)，又名牛樟菇、牛樟芝、紅樟芝、樟菇等，屬于真菌門，擔(dān)子菌亞門，層菌綱，多孔菌科，苔芝屬，為臺(tái)灣特有物種，生長在海拔450～2000公尺間的牛樟樹樹干腐朽內(nèi)壁或枯死木材的潮濕面[1]。

樟芝具有行氣行血、清泄火熱、疏散氣機(jī)、消腫散結(jié)、緩急止痛及中毒解救之功效，可以主治熱證、火證、以及氣血阻滯，心腹諸痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，癰腫瘡毒、正氣虛弱、身體諸痛等病證[2]。

本文將就樟芝的組分研究、藥理功效及毒理研究、規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)研究進(jìn)展做綜述。

1　樟芝組分研究

樟芝成分復(fù)雜，含有多糖、腺苷、固醇、三萜、不飽和脂肪酸[3]和免疫蛋白等多種生理活性物質(zhì)，其中最主要的活性成分是三萜類化合物和多糖。

1.1三萜類化合物

科研人員已從樟芝子實(shí)體中分離得到多種萜類物質(zhì)，較早闡明的有以麥角甾烷為骨架的三萜類化合物 Zhankuic acids A、B、C[4]， Antcin A～C[5]， Zhankuic acids D、E[6]， Antcin E、F，及Methyl antcinates G、H[7]。另外2003 年，Shen 等[8]發(fā)現(xiàn)的 Antcin K也屬于麥角甾烷類。Yang 等[6]報(bào)道分離得到的15α-acetyl-dehydrosulphurenic acid、Dehydroeburicoic acid、Dehydrosulphurenic acid，以及Shen 等[8]分離Sulphurenic acid、Versisponic acid D、3β，15α-Dihydroxylanosta-7,9，24-trien-21-oic acid則屬于以羊毛甾烷為骨架的三萜類化合物。

最近，Lee等[9]從固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物中分離得到2,3,6-trimethoxy-4-methylphenol，1(10→6)abeo-ergosta-5,7,9,22-tetraen-3α-ol, citreoanthrasteroid B 和 dankasterones A 及B。Huang 等[10]從子實(shí)體中分離得到12種新三萜類化合物antcamphins A-L (1-12)。

1.2樟芝多糖

樟芝多糖的中性糖主要為山梨糖、海藻糖、半乳糖和葡萄糖等，而非大腸桿菌中普遍存在的半乳糖胺和葡萄糖胺[11]。

樟芝葡聚糖與主鏈以(1→3) 鍵相連，具有β-D-glucopyranosyl 殘基，平均分子量為 100 kD[12]。據(jù)推測(cè)，這是它具有抗腫瘤活性的重要成因。中性糖成分及結(jié)構(gòu)與子實(shí)體和菌絲體的生長狀況密切相關(guān)，具有一定的多樣性，生長 26 天的菌絲體中主要含有的中性糖為半乳糖，葡萄糖，甘露糖和半乳糖胺[13]。齊善厚[14]利用超濾法分離提取到樟芝多糖，總得率達(dá)18.18%。其中六種樟芝多糖組分均能顯著地促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化增殖作用。

2014年，Chen等[15]從樟芝中分離得到谷胱甘肽依賴型甲醛脫氫酶，并新鑒定出三種功能性多糖ACP1，ACP2和 ACP3。

1.3其他成分

除萜類和多糖類物質(zhì)外，樟芝子實(shí)體和菌絲體中還含有多種蛋白質(zhì)、維生素、不飽和長鏈脂肪酸、氨基酸和微量元素等營養(yǎng)成分，多酚類物質(zhì)，衍生酯類等衍生物也已經(jīng)報(bào)道。

在樟芝子實(shí)體中，Chiang 等[16]分離到4,7-dimethoxy-5-methyl-1，3-benzodioxole 和 2，2’，5，5’-tetramethoxy-3，4，3’，4’-bimethylenedioxy-6，6’-dimethylbiphenyl 兩種多酚類物質(zhì)及倍半萜內(nèi)酯Antrocin，Huang 等[17]分離到2,5-dimethoxy-3，4-methylenedioxy-benzoae 和 4和5-dimethoxy-2,3-methylenedioxy-benzoic acid兩種苯系化合物。Lee等[9]則從固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物中分離得到6-methoxy-4-methyl-2,3-(methylenedioxy)phenol和4,4’-(ethane-1,2-diyl)bis(2,3,6-trimethoxy-phenol)兩種多酚類物質(zhì)。從樟芝菌絲體中，Nakamura等[18]發(fā)現(xiàn)了 5 種新順丁烯二酸和琥珀酸衍生物，Wang等[19]用乙醇提取得到腺苷。Yen等[20]則首次分離獲得antrocamol LT1、LT2和LT3。

2　樟芝藥理和毒理的研究

2.1藥理研究

2.1.1抗腫瘤作用

目前，有關(guān)樟芝抗腫瘤功能的研究和報(bào)道層出不窮，顯示其提取物對(duì)多種不同腫瘤細(xì)胞具有抑制效應(yīng)。

Chen等[4]和Hseu 等[22]分別報(bào)道了從樟芝子實(shí)體和菌絲體提取物白血病細(xì)胞P388和HL-60的抑制作用。李紅玉等[21]報(bào)道牛樟芝提取物影響人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖。Norio等[18]發(fā)現(xiàn)樟芝菌絲體三氯甲烷提取物 Maleic2和Maleic3 顯著抑制體外培養(yǎng)的Lewis 肺癌細(xì)胞。 陳勁初等[23]以樟芝制劑飼喂小鼠四周，發(fā)現(xiàn)可減少感染血吸蟲數(shù)，同時(shí)檢測(cè)到其血液中的TNF-α、IFN-γ 和 IL-2 均明顯增加。Hsieh等[24]證實(shí)Methyl antcinate A 可以誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞系的凋亡，Peng 等[25]則證明其對(duì)人乳腺癌細(xì)胞系MCF7有抑制效應(yīng)。Lee等[9]報(bào)道其首次分離獲得的1(10→6)abeoergosta-5,7,9,22-tetraen-3α-ol、citreoanthrasteroid B、dankasterones A及B均對(duì)CT26和K562細(xì)胞系具有細(xì)胞毒性。Yen等[20]證實(shí)antrocamol LT1，LT2和 LT3對(duì)CT26, A549和 DU-145等五種人腫瘤細(xì)胞系均具有抑制作用。

2.1.2抗氧化作用

研究證實(shí)，樟芝具有抗氧化功能。Mau等[26]從抗氧化、清除 DPPH 自由基及對(duì)亞鐵離子螯合等角度比較了樟芝紅菌絲體和白菌絲體的甲醇提取物抗氧化能力差異，，結(jié)果顯示出不同的菌絲體類型之間的差異。Hsieh等[27]也證實(shí)了樟芝萃取物在自由基清除、抗突變及保護(hù)DNA免受自由基損傷方面的作用。另有研究表明[28]，樟芝發(fā)酵濾出液的干物質(zhì)成分能夠抑制脂質(zhì)氧化，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷也具有修復(fù)作用。Huang 等[29]發(fā)現(xiàn) γ 射線輻射可以維持并增強(qiáng)樟芝菌絲體甲醇提取物的抗氧化特性。

2.1.3保護(hù)肝臟作用

長期實(shí)踐證明，樟芝固體培養(yǎng)物和液體發(fā)酵產(chǎn)物均對(duì)肝臟具有保護(hù)作用。樟芝子實(shí)體及液體培養(yǎng)提取物均能改善 CCl4導(dǎo)致的天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的升高，降低谷胱甘肽的水平[30]。陸震鳴等[31]證實(shí)樟芝能預(yù)防急性酒精性肝損傷，且無劑量依賴性。Lee等[32]研究表明，50 μg/mL的樟芝多糖抗乙型肝炎病毒表面抗原的活性最強(qiáng)。

2.1.4抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用

樟芝子實(shí)體中的β葡聚糖對(duì)LLC引起的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用[33]，口服樟芝多糖制劑能夠顯著降低血清中TGF-β水平，明顯提高IL-12 和 IFN-γ表達(dá)水平。部分樟芝三萜化合物能夠抑制活性氧生成，調(diào)節(jié)白細(xì)胞，達(dá)到調(diào)節(jié)免疫的作用[34]。研究顯示[35]，樟芝多糖還能顯著增加小鼠脾細(xì)胞增殖率，激活巨噬細(xì)胞，從而刺激血液中的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生更多細(xì)胞因子，殺死 U-937人類淋巴癌細(xì)胞。資料顯示[36]，樟芝菌絲體提取物對(duì)單純皰疹病毒HSV亦有抑制效應(yīng)。

2.1.5抗炎作用

樟芝子實(shí)體中三萜類化合物和液體培養(yǎng)菌絲體的提取物均具有抗炎活性[37]。Tsai等[38]用小鼠皮膚缺血模型研究樟芝及其活性成分ergostatrien-3β-ol (ST1)的抗炎效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)它們降低解皮瓣缺血損傷引起的炎癥因子分泌。報(bào)道顯示[39]，各種樟芝培養(yǎng)物的抗炎作用大小依次為: 子實(shí)體>固態(tài)發(fā)酵>液態(tài)發(fā)酵。

2.1.6其他作用

樟芝水提取物和甲醇提取物均具有抑菌作用[26]。如前面述及的Zhankuic acid A 有血小板凝集作用，Zhankuic acid B 具有抗膽堿及抗5-羥色胺功能，Antcin A 能抑制鼠血癌細(xì)胞毒素的活性，Antcin B 則具有抗副交感神經(jīng)的作用。Wang 等[41]發(fā)現(xiàn)樟芝菌絲體乙醇提取物中的腺苷對(duì)血管緊張的作用。此外，樟芝提取物通過Ca2+和PKC 級(jí)聯(lián)效應(yīng)和Akt 細(xì)胞信號(hào)通路抑制血小板激活[40]。

2.2毒理學(xué)試驗(yàn)

人們開展了多項(xiàng)樟芝毒理學(xué)試驗(yàn)。陳啟楨等[23]將樟芝子實(shí)體提取物以老鼠做急毒性實(shí)驗(yàn)，LD50達(dá)2000 mg/kg，顯示樟芝為無毒性物質(zhì)。陳勁初等[42]對(duì)樟芝發(fā)酵液萃取物以 鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行致突變性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在 0.1～10 mg/mL 濃度范圍內(nèi)無致突變性。Amin等[43]發(fā)現(xiàn)，樟芝提取液還能促進(jìn)傷口愈合，且有利于消除疤痕，顯示其促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖。

3　樟芝培養(yǎng)技術(shù)

3.1樟芝固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)的研究進(jìn)展

臺(tái)灣科研人員對(duì)樟芝培養(yǎng)技術(shù)較早展開了研究。臺(tái)灣大學(xué)、中興大學(xué)、輔仁大學(xué)和臺(tái)北醫(yī)學(xué)院等多家單位均對(duì)樟芝栽培技術(shù)做出了重要貢獻(xiàn)[6]。

大陸也對(duì)樟芝這一國之瑰寶進(jìn)行了大量研究工作[44]。早在1997 年, 福建首先對(duì)此投入了極大的熱忱，福建省農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所首先從樟芝子實(shí)體中成功分離到了樟芝菌種, 并利用本地香樟樹木屑做成的培養(yǎng)基進(jìn)行樟芝試驗(yàn)性栽培。黃大斌等[45]研究發(fā)現(xiàn)樟芝菌絲生長的最適 pH 為 6～7，最適溫度為 28 ℃，沉水樟木屑培養(yǎng)基的最適含水量為 58.5%，碳源為2%葡萄糖，氮源為0.2%檸檬酸銨。最近，黃志偉等[46]對(duì)樟芝固體培養(yǎng)菌絲體技術(shù)進(jìn)行了研究。張奉蘇等[47]對(duì)其培養(yǎng)獲得樟芝粉的化學(xué)成分進(jìn)行了分析。

3.2樟芝液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)的研究進(jìn)展

在研究固體栽培技術(shù)的同時(shí)，海峽兩岸也在積極參與樟芝菌絲體的液體發(fā)酵培養(yǎng)。2001 年，陳勁初等[23]以深層液體發(fā)酵的方式生產(chǎn)樟芝菌絲體，取得1.8%的高收率，培養(yǎng)參數(shù)為：1%接種量，攪拌轉(zhuǎn)速 90 rpm，通氣量0.5 vvm，溫度28 ℃，裝液量70%，50噸發(fā)酵罐中試培養(yǎng)8 天后得到紅色菌絲。

福建省農(nóng)科院植保所最早進(jìn)行了菌絲體發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)的研究。之后，張宏海等[48]選取碳源及碳源濃度、氮源及氮源濃度作單因素試驗(yàn),碳源、氮源、無機(jī)鹽組合和生長因子作正交試驗(yàn)，優(yōu)化了深層液體發(fā)酵法生產(chǎn)樟芝菌絲體和多糖的培養(yǎng)基。胡永丹等[49]報(bào)道了液態(tài)法發(fā)酵安卓奎諾爾(Antroquinonol)的工藝。

4　展　望

野生樟芝生長緩慢，導(dǎo)致其資源嚴(yán)重匱乏，價(jià)格遠(yuǎn)高于靈芝、人參、冬蟲夏草等傳統(tǒng)藥材。利用現(xiàn)代生物技術(shù)對(duì)樟芝進(jìn)行人工培養(yǎng)，獲得菌絲體或活性代謝產(chǎn)物是大勢(shì)所趨。樟芝培養(yǎng)技術(shù)的不斷提升及其基因組解析必定會(huì)對(duì)其價(jià)值的更廣泛發(fā)揮起到指引作用。

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Research Progress on Antrodia camphorata*

LIU Jing1, LI Peng-peng2, ZHANG Yu1, YE Hui-hui1, CHEN Kun1

(1 College of Pharmaceutical, Liaocheng University, Shandong Liaocheng 252000;2DongchangfuDistrictAgriculturalBureau,ShandongLiaocheng252000,China)

Antrodiacinnanomea, a highly valued polypore mushroom native only to Taiwan, has been traditionally used as a medicine. It has the effect to counteract poison, protect liver and anti-cancer, raise immunity dint. The present studies on pharmaceutical characters, components and functions, pharmacological and toxicological effects, and production research were reviewed. And its development and application were also prospected.

Antrodiacinnanomea; components; pharmacological and toxicological effects

聊城大學(xué)大學(xué)生科技文化創(chuàng)新基金項(xiàng)目(編號(hào)：SF2014255)。

劉靜(1994-)，女，在讀本科生。

陳坤。E-mail:chenkun97411@163.com

R9

A

1001-9677(2016)013-0023-04