不同地區(qū)天南星中秋水仙堿含量的測(cè)定與比較

摘 要：本文利用高效液相色譜法對(duì)分別購(gòu)于河南、河北、廣西、云南、安徽、吉林藥材市場(chǎng)的天南星及其炮制品中秋水仙堿的含量進(jìn)行了測(cè)定并進(jìn)行比較得出河南產(chǎn)地天南星中秋水仙堿含量高，安徽產(chǎn)地天南星秋水仙堿含量最低。

關(guān)鍵詞：天南星；秋水仙堿；高效液相色譜法；含量測(cè)定；比較

DOI：10.16640/j.cnki.37-1222/t.2016.05.045

1 實(shí)驗(yàn)用品

（1）材料：分別購(gòu)于河南、河北、廣西、云南、安徽藥材市場(chǎng)以及采自吉林地區(qū)的天南星及其炮制品。

（2）試劑和藥品。分析純：甲醇、氯仿、鹽酸、石油醚、正丁純、乙酸乙脂、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉。色譜純：甲醇、乙丙醇、冰乙酸、二乙胺、三乙胺、秋水仙堿、鹽酸水蘇堿。標(biāo)準(zhǔn)品：秋水仙堿、鹽酸水蘇堿 。

（3）實(shí)驗(yàn)儀器：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、真空泵、電熱鼓風(fēng)干燥箱、高效液相色譜儀、超聲波清洗儀、 Agilent 氣質(zhì)聯(lián)用儀。

2 實(shí)驗(yàn)方法

（1）天南星總生物堿的制備方法：稱取天南星粗粉200g，加規(guī)定量甲醇浸泡三次，溶劑量依次為1600mL、1200mL、1200mL，每次浸泡12h，常溫超聲3次，每次20min，抽濾，合并濾液。利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收甲醇，得浸膏。用2%鹽酸3 mL攪拌，靜止30min后過濾，濾液用1%NaOH3 mL堿化30min，再用石油醚（1：1）萃取3次除雜質(zhì)，母液用氯仿（1：1）萃取數(shù)次，取少量母液用生物堿沉淀劑檢驗(yàn)至無生物堿反應(yīng)，終止萃取。合并氯仿層，減壓回收氯仿并干燥至恒量，得到天南星總生物堿[1]。

（2）供試品溶液制備：取20mg天南星總生物堿，用甲醇溶解定容至50ml容量瓶中，再精密吸取1ml置于10ml容量瓶中，定容。

（3）對(duì)照品溶液制備：精密稱取秋水仙堿標(biāo)準(zhǔn)品10mg，用甲醇溶解至100mL容量瓶中，定容，得濃度為0.1mg/mL的對(duì)照品溶液，備用。

（4）色譜條件：色譜柱：CenturySIL C18-BDS （250mm×4.6mm，5μl）、 流動(dòng)相：甲醇-異丙醇-冰乙酸-二乙胺-水（20：5：0.25：0.5：75）、檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm、流速：1.0mL/min、柱溫：40℃。

（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線的確定：精密吸取對(duì)照品溶液1ml、2.5ml、4ml、5.5ml、7ml、8.5ml，分別置于10ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度線，搖勻，過濾，在上述色譜條件下進(jìn)樣20μl。以秋水仙堿的峰面積Y對(duì)秋水仙堿的濃度X（mg/ml）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和回歸方程。得到標(biāo)準(zhǔn)曲線為，Y=3×106X-2442.5，R2=0.9981。以上結(jié)果表明秋水仙堿在0.01～0.085mg/ml范圍內(nèi)濃度與峰面積成良好線性關(guān)系。

（6）方法學(xué)考察。1）精密度實(shí)驗(yàn)：取秋水仙堿對(duì)照品溶液，濃度為0.04mg/ml，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，考察精密度，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。2）穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取“3.2供試品制備”項(xiàng)下供試品溶液，按上述色譜條件下，每次進(jìn)樣均為20μl，在0，2，4，8，10，12，24h分別測(cè)定，考察其穩(wěn)定性。3）加樣回收率試驗(yàn)：取已知含量的天南星總生物堿2.00mg，精密稱定，共5份，依次精密移取0.1mg/ml的秋水仙堿對(duì)照品溶液28.5ml，按樣品溶液制備方法制備。精密吸取樣品溶液20μl，在上述色譜條件下測(cè)定峰面積，計(jì)算秋水仙堿含量，并求得回收率。結(jié)果見表1。

（7）樣品含量測(cè)定。取200 mg天南星總生物堿，用甲醇定容至50 ml容量瓶中，在精密吸取1ml置于10ml容量瓶中，定容。按上述色譜條件下，進(jìn)樣20μl，分別測(cè)定六個(gè)產(chǎn)地的天南星及制南星中秋水仙堿含量。結(jié)果見表2。

3 結(jié)果與分析

3.1 秋水仙堿含量測(cè)定結(jié)果

通過表3可以看出吉林天南星中秋水仙堿的含量與河南廣西云南安徽的天南星相比，差異極顯著；與河北產(chǎn)地天南星相比差異顯著。

3.2 方法學(xué)考察結(jié)果

（1）精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果。取秋水仙堿對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次測(cè)得峰面積平均值為106461.6，計(jì)算RSD值為1.84%（n=5），且RSD<2%，符合05版《中國(guó)藥典》規(guī)定，結(jié)果表明精密度良好。

（2）穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果。按上述色譜條件下考察其穩(wěn)定性。測(cè)得v峰面積平均值為168859.29，計(jì)算RSD=0.12%（n=7）<2%，符合05版《中國(guó)藥典》規(guī)定，結(jié)果表明樣品中秋水仙堿在24h內(nèi)含量穩(wěn)定、無變化。

（3）加樣回收率測(cè)定結(jié)果（見表1）。結(jié)果表明：平均加樣回收率為99.72 %，RSD = 0.364 %<5%，符合2005《中國(guó)藥典》規(guī)定。

4 結(jié)論

河南產(chǎn)地天南星中秋水仙堿含量最高，安徽產(chǎn)地天南星秋水仙堿含量最低。六個(gè)產(chǎn)地天南星中秋水仙堿含量從高到低的順序是河南、吉林、河北、云南、廣西、安徽。

參考文獻(xiàn)：

[1]武剛毅，譚政.天南星的炮制研究概述[J].中國(guó)藥師，2004，（12）：156.

作者簡(jiǎn)介：柳蓮（1981-），女，吉林白城人，碩士，講師，研究方向：制藥工程、化學(xué)工程。