人附睪蛋白4與卵巢癌疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)系探討

鄭麗娥， 陳麗紅， 黃玉秀

人附睪蛋白4與卵巢癌疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)系探討

鄭麗娥， 陳麗紅， 黃玉秀

目的 探討人附睪蛋白4(HE4)水平在卵巢癌疾病轉(zhuǎn)歸中的價(jià)值。 方法 收集盆腔腫物患者112例，其中卵巢上皮性惡性腫瘤94例，卵巢非上皮性惡性腫瘤18例。應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定患者手術(shù)前后血清HE4和糖類抗原125(CA125)的水平，并隨訪其中經(jīng)過(guò)滿意的全面分期手術(shù)的36例上皮性腫瘤患者術(shù)后血清HE4和CA125的水平，分析HE4水平與腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系。 結(jié)果 患者術(shù)后血清HE4水平為32.19 pmol/L(21.67～293.40 pmol/L)，明顯低于術(shù)前水平63.37 pmol/L(29.10～444.80 pmol/L)，二者差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.310，P=0.021)。隨著化療后臨床緩解，患者的HE4水平下降；當(dāng)患者病情復(fù)發(fā)或盆腔出現(xiàn)病灶時(shí)，血清HE4水平再度升高。36例上皮性卵巢癌患者經(jīng)15月隨訪后，復(fù)發(fā)5例，盆腔MRI檢查示腫瘤直徑約4～6 cm，血清HE4水平均明顯升高，且血清HE4的升高比CA125提前4～12周。 結(jié)論 HE4水平與卵巢癌的臨床轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，是監(jiān)測(cè)患者病情的敏感腫瘤標(biāo)志物。

睪丸激素類； 糖類抗原125； 卵巢腫瘤； 生殖器腫瘤，女(雌)性； 電化學(xué)

卵巢癌發(fā)病率逐年增高，從1980年的8.6/100 000，增加到2005年的12/100 000，全世界每年約有190 000新增卵巢癌病例，約有114 000人死于卵巢癌[1]。隨著腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)及有效化療的應(yīng)用，卵巢癌的預(yù)后也得到改善，但5年生存率仍只有30%左右。研究表明，新型腫瘤標(biāo)志物——人附睪蛋白4(human epididymis gene product 4, HE4)是一個(gè)對(duì)卵巢癌的早期診斷和鑒別診斷具有重要價(jià)值的血清指標(biāo)。HE4基因是Kirchhoff等在人附睪遠(yuǎn)端上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，是WFDC2基因的編碼產(chǎn)物，是一小的單信號(hào)肽和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白，擁有高度保守的WAP結(jié)構(gòu)域[2-3]。而WAP結(jié)構(gòu)域是由8個(gè)半胱氨酸組成的4個(gè)二硫鍵核心區(qū)域，擁有一個(gè)具有抑制性的環(huán)結(jié)構(gòu)，可以抑制蛋白酶。本研究通過(guò)檢測(cè)卵巢上皮性與非上皮性惡性腫瘤患者手術(shù)前后HE4和CA125的水平，分析HE4水平與腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系，探討HE4水平在卵巢癌疾病轉(zhuǎn)歸中的價(jià)值。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 收集2012年1月-2014年12月在筆者科室行手術(shù)治療的盆腔腫物患者112例，其中上皮性卵巢惡性腫瘤94例，年齡(51.47±11.35)歲(13～72歲)，包括漿液性癌55例、黏液性癌27例、卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌12例；非上皮性卵巢惡性腫瘤18例，年齡(44.87±12.65)歲(18～60歲)，包括卵黃囊瘤4例、無(wú)性細(xì)胞瘤14例。112例均經(jīng)術(shù)后病理確診，按照國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期：Ⅰ期28例，Ⅱ期14例，Ⅲ期62例，Ⅳ期8例。隨機(jī)選擇其中36例上皮性卵巢癌患者進(jìn)行術(shù)后隨訪，時(shí)間為15月。所有患者均未合并明顯影響腫瘤標(biāo)志物水平的疾病，無(wú)乳腺、甲狀腺疾病及合并其他腫瘤疾病史，術(shù)前未行放化療。

1.2 方法

1.2.1 治療情況 112例均行滿意的卵巢癌減滅術(shù)，隨訪的36例上皮性卵巢癌患者術(shù)后均行“紫杉醇+順鉑”化療，共6個(gè)療程，其中5例復(fù)發(fā)的患者均經(jīng)再次手術(shù)。

1.2.2 采集血標(biāo)本 于非月經(jīng)期采集血標(biāo)本。采集術(shù)前1 d及術(shù)后1 d空腹肘靜脈全血3 mL，置于未加抗凝劑的試管中，室溫下靜置1 h，3 000 r/min離心5 min，取上清，保存于-80 ℃的冰箱待測(cè)。

1.2.3 檢測(cè)血清中的HE4及CA125水平 采用電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)。HE4檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：05950929190)及血清檢測(cè)儀(Cobas e601)(德國(guó)羅氏公司)，具體檢測(cè)方法參照文獻(xiàn)[4]。定期監(jiān)測(cè)36例隨訪患者的血清HE4及CA125水平，并行彩超及MRI檢查，判斷是否復(fù)發(fā)。1.2.4 結(jié)果判定 血清HE4參考值為0～140 pmol/L，>140 pmol/L判斷為陽(yáng)性；CA125參考值為0～35 U/mL，>35 U/mL為陽(yáng)性。彩超檢查：盆腔出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性包塊、回聲雜亂、局部血供豐富，判斷為陽(yáng)性。MRI檢查：盆腔出現(xiàn)多發(fā)或單發(fā)大小不等稍長(zhǎng)T1及稍長(zhǎng)T2異常信號(hào)，增強(qiáng)明顯且不均勻強(qiáng)化，一般境界不清，周圍脂肪間隙稍模糊，判斷為陽(yáng)性。如彩超及MRI檢查均陽(yáng)性，結(jié)合HE4或CA125升高，判斷為腫瘤復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)患者均經(jīng)再次手術(shù)病理證實(shí)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。HE4和CA125水平以中位數(shù)表示。多組間比較采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，兩兩比較采用Mann-Whitney檢驗(yàn)。P<0.05為差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 術(shù)前后血清HE4水平 112例患者術(shù)后血清HE4水平均明顯降低，與術(shù)前比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.310，P=0.021)；早期(Ⅰ期和Ⅱ期)與晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)患者的血清HE4水平比較，差別也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.192，P=0.011)；上皮性腫瘤組與非上皮性腫瘤組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且上皮性腫瘤組手術(shù)前后變化更為明顯(Z=-3.408，P=0.009)，具體見(jiàn)表1。

表1 卵巢癌減滅術(shù)前后血清HE4水平

HE4：人附睪蛋白4. 與術(shù)前比較，☆：P<0.05；與早期比較，△：P<0.05；與上皮性比較，#：P<0.05.

2.2 隨訪患者血清HE4與CA125水平 36例隨訪患者中，27例(75%)于術(shù)后1周HE4水平降至正常，9例于術(shù)后經(jīng)3～8周降至正常；15例(41.7%)于術(shù)后1周CA125水平降至正常，21例(58.3%)于術(shù)后4～16周降至正常。術(shù)后，HE4比CA125更早降至正常，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.229，P=0.004)。隨化療臨床緩解，HE4及CA125水平均下降。術(shù)后監(jiān)測(cè)HE4與CA125水平均在正常范圍，定期復(fù)查彩超未發(fā)現(xiàn)異常病灶。

隨訪15月后，復(fù)發(fā)5例，未復(fù)發(fā)31例，復(fù)發(fā)時(shí)間為術(shù)后6～15月，腫瘤直徑約4～6 cm。5例均為臨床Ⅲ期患者，其中漿液性癌3例、黏液性癌1例、卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌1例。5例復(fù)發(fā)患者，除1例卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌患者，余4例血清HE4及CA125水平均在影像學(xué)陽(yáng)性之前2～8周即上升，且HE4的升高比CA125提前4～12周(圖1)；1例卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌患者于術(shù)后12月復(fù)發(fā)，血清HE4明顯升高，但血清CA125未升高(圖2)。截至發(fā)稿時(shí)，復(fù)發(fā)患者死亡1例，為卵巢漿液性癌，其余存活。

3 討 論

多個(gè)大樣本的臨床研究表明[5-8]，作為卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物，不論在疾病的早期還是晚期檢測(cè)HE4，其敏感性及特異性均優(yōu)于CA125，同樣在卵巢癌患者的術(shù)后病情監(jiān)測(cè)方面也有很好的敏感性。已有研究表明，卵巢癌惡性組織中，HE4表達(dá)水平與FIGO分期、組織分化程度呈正相關(guān)[9]。說(shuō)明隨著卵巢癌的病情進(jìn)展或腫瘤復(fù)發(fā)，HE4在腫瘤組織中表達(dá)水平增高，血液中水平也呈高濃度。Clauss等的研究表明，HE4作為WAP基因家族的一員，在卵巢癌細(xì)胞中高表達(dá)，并與卵巢癌的預(yù)后不良有關(guān)[10]。HE4蛋白可能促進(jìn)了卵巢癌的早期浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移，致使疾病進(jìn)展惡化，其表達(dá)升高可能是卵巢癌預(yù)后不佳的信號(hào)。為進(jìn)一步驗(yàn)證血清HE4在卵巢癌無(wú)創(chuàng)性監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，本研究比較了在卵巢上皮性與非上皮性惡性腫瘤術(shù)前后血清中HE4水平的差異，結(jié)果顯示，經(jīng)滿意的卵巢癌減滅術(shù)的患者，其術(shù)后血清HE4水平明顯低于術(shù)前，且上皮性卵巢癌患者的HE4水平術(shù)前后變化較非上皮性患者更明顯，早期與晚期患者比較，差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明血清HE4水平與疾病進(jìn)展密切相關(guān)。當(dāng)病情進(jìn)展時(shí)，患者血清HE4水平明顯升高。血清的HE4水平在一定程度上反映了卵巢癌患者的臨床進(jìn)展情況和預(yù)后，而上皮性卵巢癌HE4水平手術(shù)前后變化更明顯，可能是非上皮性卵巢癌中HE4分泌減少或破壞增加所致。

文獻(xiàn)報(bào)道，卵巢癌術(shù)后5年內(nèi)復(fù)發(fā)率約80%，尤其是前3年幾率更大。已有研究顯示，卵巢癌患者化療后，HE4比CA125更早出現(xiàn)下降[11]。Havrilesky等報(bào)道，在對(duì)卵巢癌患者的疾病復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中，血清HE4升高比CA125提前6～69周[12]。本研究結(jié)果也顯示，化療有效、臨床緩解時(shí)，HE4水平下降；病情復(fù)發(fā)時(shí)，血清HE4水平均明顯升高，血清HE4升高比CA125提前4～8周，且血清HE4及CA125水平的升高較臨床影像學(xué)陽(yáng)性表現(xiàn)提前2～8周，提示HE4可以作為監(jiān)測(cè)卵巢癌患者病情轉(zhuǎn)歸的敏感腫瘤標(biāo)志物，能較早發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)。

已有文獻(xiàn)報(bào)道，即使在CA125表達(dá)陰性的卵巢癌患者中，尚有32%的患者血清中仍能檢出HE4，說(shuō)明HE4與CA125在卵巢癌患者的分布不同，二者具有互補(bǔ)性[6]。本研究顯示，大部分卵巢癌復(fù)發(fā)患者血清HE4及CA125均有升高，但有1例卵巢子宮內(nèi)膜腺癌患者血清HE4升高，而CA125卻無(wú)明顯變化，提示聯(lián)合檢測(cè)血清HE4和CA125能最大限度減少漏診率及誤診率，提高卵巢癌復(fù)發(fā)早期診斷的能力。

綜上所述，HE4是卵巢癌術(shù)后病情監(jiān)測(cè)的敏感腫瘤標(biāo)志物，能早期發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)，具有重要臨床價(jià)值。

[1] Drapkin R, von Horsten H H, Lin Y,etal. Human epididymis protein 4 (HE4) is a secreted glycop rote in that is over expressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas [J].CancerRes, 2005,65(6):2162-2169.

[2] Kirchhoff C, Habben I, Ivell R,etal. A major human epididymisspecific cDNA encodes a protein with seqence homology to extracellular proteinase inhibitors[J].BiolRepord, 1991,45(2):350-357.

[3] 陳潔晶，吳英松，寧云山，等．卵巢癌腫瘤標(biāo)記物HE4基因的分子克隆與蛋白表達(dá)[J]．熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2006，6(5):493-495.

[4] Wang K, Gan L, Jeffrey E,etal. Monitoring gene expression profile changes in ovarian carcinoma as using cDNA microarray[J].Gene, 1999,229(1-2):101-108.

[5] Li J, Dowdy S, Tipton T,etal. HE4 as a biomarker for ovarian and endometrial cancer management[J].ExpertRevMolDiagn, 2009,9(3):555-566.

[6] Rosen D G, Wang L, Atkinson J N,etal. Potential markers that complement expression of CA125 in epithelial ovarian cancer [J].GynecolOncol, 2005,99(2):267-277.

[7] Lenhard M S, Nehring S, Nagel D,etal. Predictive value of CA125 and CA72-4 in borderline ovarian tumors[J].ClinChemLabMed, 2009,47(5):537-542.

[8] Montagnana M, Lippi G, Ruzzenente O,etal. The utility of serum human epididymis protein 4 (HE4) in patients with a pelvic mass[J].ClinLabAnal, 2009,23(5):331-335.

[9] 鄭麗娥，曲軍英，李 桑，等. 人附睪蛋白4在卵巢惡性腫瘤早期診斷中的作用[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2014，30(11)：996-999.

[10] Clauss A, Ng V, Liu J,etal. Overexpression of elafin in ovarian carcinama is driven by genomic gains and activation of the nuclear factor kappab pathway and is associated with poor overrall survival[J].Neoplasia, 2010,112(2):161-172.

[11] 程洪艷，劉亞南，葉 雪，等. 血清人附睪分泌蛋白4(HE4)和CA125在卵巢癌患者手術(shù)及化療前后的變化[J]. 中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志, 2011,12(3):212-215.

[12] Havrilesky L J, Whitehead C M, Rubatt J M,etal. Evaluation of biomarker panels for early stage ovarian cancer detection and monitoring for disease recurrence [J].GynecolOncol, 2008,110(3):374-382.

(編輯：何佳鳳)

Relationship between Human Epididymis Protein 4 and Prognosis of Ovarian Cancer

ZHENG Li’e, CHEN Lihong, HUANG Yuxiu

Department of Obstetrics and Gynecology, The First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China

Objective To investigate the value of human epididymis protein 4 (HE4) in the prognosis of ovarian cancer disease. Method The levels of HE4 and carbohydrate antigen-125 (CA125) were detected by using the chemiluminescence method in 94 patients with epithelial ovarian and 18 patients with non epithelial tumor before and after surgery. The levels of serum HE4 and CA125 were followed for 36 patients with epithelial ovarian tumor after operation and the relationship between HE4 level and tumor recurrence was analyzed. Result In 112 patients with ovarian cancer after a satisfactory surgical staging, the postoperative serum level of HE4 was 32.19 pmol/L (21.67～293.40 pmol/L) and was significantly lower than the preoperative serum levels: 63.37 pmol/L(29.10～444.80 pmol/L), the difference was statistically significant (Z=-2.310,P=0.021). Moreover, while the patients were in clinical remission after chemotherapy, the level of HE4 was decreasing and the level of serum HE4 was elevated in the patients with recurrent disease or pelvic lesions. In 36 cases after satisfactory comprehensive surgical staging of epithelial ovarian cancer the patients were followed up for 15 months, 5 of them had disease recurrence and pelvic MRI found tumors with a diameter of about 4～6 cm, serum HE4 levels were significantly increased. The serum HE4 increased 4～12 weeks earlier than CA125. Conclusion The level of HE4 is closely related to clinical outcome of ovarian cancer, and is a sensitive tumor marker for disease monitoring

testicular hormones; CA125 antigen; ovarian neoplasms; genital neoplasms, female; electrochemistry

2016-03-13

福建醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，福州 350005

鄭麗娥(1980-)，女，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士. Email: zelie@sina.com

R341.32； R392.11； R44；R737.31； R977.6

A

1672-4194(2016)06-0399-04