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    珠三角地區(qū)兒童外陰陰道炎病原菌分布及藥物敏感性分析

    2016-02-29 03:14:08鐘華敏謝永強(qiáng)關(guān)小珊黃蓮芬吳曉明
    關(guān)鍵詞:陰道炎季節(jié)年齡

    鐘華敏,謝永強(qiáng),關(guān)小珊,黃蓮芬,吳曉明

    (廣州市婦女兒童醫(yī)療中心 檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510120)

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    珠三角地區(qū)兒童外陰陰道炎病原菌分布及藥物敏感性分析

    鐘華敏,謝永強(qiáng),關(guān)小珊,黃蓮芬,吳曉明

    (廣州市婦女兒童醫(yī)療中心 檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510120)

    (ChinJLabDiagn,2016,20:0107)

    近年來,兒童外陰陰道炎的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),成為小兒婦科門診中的主要疾病之一。由于小兒的解剖、生理和行為等特點(diǎn),其陰道炎在病因、臨床表現(xiàn)、治療和愈后等方面均與成人不同。小兒外陰炎是一個(gè)連續(xù)的過程,其發(fā)生與季節(jié)及年齡也有一定的關(guān)聯(lián)性,不同地域的氣候、不同年齡段人群的病原菌分布也存在一定的差異。近年來隨著對(duì)兒童外陰陰道炎的廣泛抗生素治療,耐藥性也發(fā)生了變化。因此,對(duì)兒童陰道炎進(jìn)行地域性病原學(xué)分析及耐藥性研究,了解不同年齡段、不同氣候類型的陰道炎病原學(xué)分析和細(xì)菌耐藥情況,可以為臨床疾病預(yù)防、診斷、合理選擇抗生素進(jìn)行有效治療,減少耐藥菌株的發(fā)生提供依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1研究對(duì)象

    隨機(jī)選擇2013年1月-2014年12月在本院女性??浦委煹呐R床診斷為外陰陰道炎的患兒,患兒均以外陰痛癢、陰道分泌物增多為主訴就診。為對(duì)季節(jié)性因素進(jìn)行研究,所有入選對(duì)象均為發(fā)病前已在珠三角地區(qū)連續(xù)居住3個(gè)月以上者。對(duì)已接受抗生素治療的患兒及伴有其他部位感染或免疫缺陷者等均排除。經(jīng)統(tǒng)計(jì)符合入選標(biāo)準(zhǔn)并且臨床資料完整的共683例,年齡<14歲。

    1.2分組情況

    683例患兒按年齡分為0-3歲組(109例),3-7歲組(307例),>7歲組(267例);按首次就診時(shí)間(季節(jié))分為:1-3月份組(86例),4-6月份組(166例),7-9月份組(234例),10-12月份組(197例)。

    法國梅里埃公司VITEK 2 Compact細(xì)菌鑒定儀及藥敏系統(tǒng)。接種、分離及鑒定培養(yǎng)基購自廣州迪景微生物科技有限公司,藥敏紙片、M-H藥敏培養(yǎng)基,購自英國OXOID公司。

    1.3儀器與試劑

    1.4測(cè)試方法

    自我效能感具有普遍性和具體性這兩種性質(zhì)。自我效能感被認(rèn)為是在某一特定行為、情境或任務(wù)中,人們經(jīng)由這些行為、情景對(duì)自我目標(biāo)達(dá)成能力的信念。自我效能感在人格特質(zhì)中并不穩(wěn)定,他經(jīng)常受一些行為、活動(dòng)、情景影響。但是 又由于各項(xiàng)活動(dòng)任務(wù)多領(lǐng)域的較差,自我效能感又具有了相對(duì)普遍的性質(zhì)。

    學(xué)生畢業(yè)和取得專業(yè)學(xué)位的描述清楚,符合學(xué)校制度和工作規(guī)范;對(duì)2016屆應(yīng)屆畢業(yè)生進(jìn)行了學(xué)生的“社會(huì)能力”“專業(yè)水平”和“專業(yè)能力”的達(dá)成評(píng)估,評(píng)估方法正確、結(jié)論可信,實(shí)現(xiàn)了對(duì)學(xué)生在整個(gè)學(xué)習(xí)過程中的表現(xiàn)進(jìn)行跟蹤與評(píng)估;以流程圖形式說明了學(xué)業(yè)預(yù)警和畢業(yè)審核流程,以及對(duì)受到學(xué)業(yè)預(yù)警學(xué)生的幫扶措施,跟蹤、評(píng)估措施到位,評(píng)估結(jié)論可信。通過對(duì)近三年本專業(yè)畢業(yè)生的就業(yè)統(tǒng)計(jì)分析,本專業(yè)畢業(yè)生的就業(yè)或升學(xué)情況優(yōu)良。

    細(xì)菌培養(yǎng)鑒定:標(biāo)本接種普通血平板和流感嗜血桿菌選擇性巧克力平板,5%CO2培養(yǎng)箱35℃培養(yǎng)18-24 h,按照全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行分離鑒定。

    1.2.1 外周血基因組DNA提取 抽取受試者外周血5 mL,-80℃保存。應(yīng)用PAXgene Blood DNA kit試劑盒(QIAGEN,德國),并按照試劑盒中提供的“操作說明”中的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟提取外周血基因組DNA。

    一些大學(xué)生雖進(jìn)行過規(guī)劃,但是規(guī)劃內(nèi)容、方式等不夠科學(xué),使得后續(xù)無法執(zhí)行,規(guī)劃因可操作性不強(qiáng)成為一紙空文,從而無法發(fā)揮效用。進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)可以從兩方面著手:一方面對(duì)指導(dǎo)教師進(jìn)行培訓(xùn),提高其專業(yè)知識(shí)掌握度和指導(dǎo)能力;另一方面可對(duì)學(xué)生進(jìn)行具有針對(duì)性的培訓(xùn)。對(duì)學(xué)生的培訓(xùn)可以分兩個(gè)階段進(jìn)行,第一個(gè)階段為大學(xué)生入學(xué)初期的培訓(xùn),主要為了讓學(xué)生更好的在本科期間完成學(xué)習(xí)目標(biāo),提高能力;第二個(gè)階段為大學(xué)生畢業(yè)前的培訓(xùn),主要針對(duì)就業(yè)選擇,筆者認(rèn)為這個(gè)階段在本科三年級(jí)進(jìn)行的話,更有利于后期進(jìn)行調(diào)整。

    支原體培養(yǎng)和結(jié)果判斷:標(biāo)本接種支原體(含解脲支原體和人型支原體)液體培養(yǎng)基培養(yǎng)。試劑用珠海銀科公司產(chǎn)品,按操作說明書操作。

    683例患兒中472例培養(yǎng)分離出病原菌,陽性率69.1%,共檢出病原菌498株,即其中26例為同時(shí)感染兩種病原菌。細(xì)菌培養(yǎng)以流感嗜血桿菌(24.9%)、大腸埃希菌(16.9%)和金黃色葡萄球菌(12.0%)為主。主要病原菌分布見表1。

    1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    “國資委”的全稱是國務(wù)院國有資產(chǎn)監(jiān)督管理委員會(huì),從行政上看,國資委的領(lǐng)導(dǎo)層包括一個(gè)主任、七個(gè)副主任以及千余名公務(wù)員。

    百余年來中國的現(xiàn)代化進(jìn)程中,“三農(nóng)問題”一直困擾著中國人。其中,鄉(xiāng)村教育的困窘,從一個(gè)側(cè)面折射了近代中國農(nóng)業(yè)、農(nóng)村、農(nóng)民的困苦和無奈。近年來,中國近代教育史研究專著和論文頗多,但相對(duì)而言,對(duì)近代中國鄉(xiāng)村教育實(shí)際狀況的探討仍顯薄弱,本文擬作補(bǔ)充。①

    結(jié)果統(tǒng)計(jì)使用WHONET5.4和SPSS13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析與處理。

    標(biāo)本采集:取樣前用0.9%無菌生理鹽水充分沖洗幼女外陰部,避免受體表常在菌污染,然后以專用無菌女性拭子擦取陰道分泌物立即送細(xì)菌室培養(yǎng),并涂片做革蘭染色鏡檢。整個(gè)過程均嚴(yán)格遵循無菌操作。

    2結(jié)果

    2.1病原菌總體分布情況

    藥敏試驗(yàn):流感嗜血桿菌藥敏采用K-B法,其余細(xì)菌經(jīng)VITEK 2系統(tǒng)藥敏卡做藥敏試驗(yàn),根據(jù)美國2014年NCCLS標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥敏判定。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)使用衛(wèi)生部臨檢中心提供的標(biāo)準(zhǔn)菌株:金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,銅綠假單胞菌ATCC27853進(jìn)行質(zhì)控。

    真菌培養(yǎng)鑒定:所有標(biāo)本同時(shí)接種沙保弱培養(yǎng)基,30℃真菌培養(yǎng)箱培養(yǎng),采用全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)VITEK 2 Compact進(jìn)行鑒定。

    表1 498株患兒陰道分泌物病原菌檢出情況

    472例感染患兒中,0-3歲組89例(18.9%),3-7歲組205例(43.4%),>7歲組178例(37.7%)。病原菌分布數(shù)據(jù)顯示,金黃色葡萄球菌有隨年齡增大而分布增大的趨勢(shì),是7-12歲組兒童外陰炎的主要病原菌,與其他兩組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而流感嗜血桿菌和大腸埃希菌則集中分布在3-7歲組,具體見表2。

    2.2不同年齡段兒童病原菌分布情況

    表2 不同年齡段兒童外陰炎患者3種主要病原菌

    2.3不同季節(jié)兒童細(xì)菌性陰道炎病原菌分布及藥物敏感性情況

    正調(diào)侃著,高潮的手機(jī)突然飛進(jìn)來一條短信:沒良心的負(fù)心郎,妾出門在外好幾天,也不來關(guān)心關(guān)心我,我在線,快上來跟妾溫存一下子。高潮回復(fù):我在開會(huì),散會(huì)后到辦公室,再上線交公糧,做人民公社的好社員。

    472例感染患兒中按季節(jié)分組中,1-3月份組,4-6月份組,7-9月份組,10-12月份組病原菌檢出患兒分別為37例(7.8%),106例(22.5%),174例(36.9%),155例(32.8%),顯示兒童外陰炎的發(fā)病呈現(xiàn)明顯季節(jié)性,在1-3月份組發(fā)病數(shù)較其他3個(gè)組明顯偏低。在病原菌分布上,流感嗜血桿菌仍為各組中主要病原菌,均是7-9月份組、10-12月份組的主要病原菌。3種主要病原菌的藥物敏感性情況見表4。

    相較于GPR、TDR數(shù)據(jù),土樣數(shù)據(jù)的變化范圍更大,一方面是由于5 cm的采樣深度較淺所致,在本實(shí)驗(yàn)中同時(shí)還采集了20 cm深度(17~23 cm范圍)的土樣,考慮到GPR是在一定深度范圍的表層土體平均土壤水分,而不是某一深度附近的土壤水分,因此,對(duì)5 cm和20 cm深度的土樣數(shù)據(jù)求平均,近似看作是0~20 cm深度的平均土樣,并分別對(duì)GPR數(shù)據(jù)和5、20、0~20 cm深度的土樣數(shù)據(jù)作對(duì)比,如圖4。

    表3 不同季節(jié)兒童外陰炎患者3種主要病原菌分布情況(構(gòu)成比) 株(%)

    表4 兒童外陰炎3種主要病原菌抗生素耐藥率 株(%)

    3討論

    外陰陰道炎是兒童常見疾病之一,不同國家、地域、時(shí)期及年齡段患者的病原菌分布及耐藥性存在一定差異[1]。本研究范圍為廣東省東部沿海的珠江三角洲地區(qū),屬亞熱帶氣候,多雨及高溫時(shí)間持續(xù)較長,兒童外陰陰道炎尤為多見,因此探討本地區(qū)不同氣候環(huán)境、不同年齡結(jié)構(gòu)下兒童外陰陰道炎病原菌譜及細(xì)菌耐藥情況的特點(diǎn),進(jìn)而篩選出治療兒童外陰炎的有效藥物,有重要的臨床意義。

    兒童外陰炎與年齡有密切關(guān)系,大多發(fā)生于3-7歲。從病程長短也可看出,大部分患兒以急性感染為主,且普通細(xì)菌培養(yǎng)的陽性率較成人陽性率高,與這一年齡段的兒童陰道自然防御功能較差,活動(dòng)范圍相對(duì)較廣,獨(dú)立行動(dòng)機(jī)會(huì)較多,但在生活上還沒有養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣,環(huán)境中的條件致病菌較易侵襲。國內(nèi)外對(duì)兒童陰道炎的相關(guān)病原菌分布及藥敏情況進(jìn)行了較多的研究,但對(duì)不同年齡年齡段及不同季節(jié)的菌群分布研究不多。有報(bào)道顯示兒童陰道炎主要病原菌為表皮葡萄球菌,比例可達(dá)20%-40%[2]。本研究顯示流感嗜血桿菌(24.9%),大腸埃希菌(16.9%),金黃色葡萄球菌(12.0%)為兒童陰道炎主要病原菌。但其分布比例存在一定的差異,這可能與不同病原菌的不同培養(yǎng)方法、不同年齡分布或不同地域環(huán)境有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),菌群分布在不同年齡段嬰幼兒中的確可有一定變換,在0-3歲組和3-7歲組,流感嗜血桿菌和大腸埃希菌是兒童外陰炎的主要病原菌,而金黃色葡萄球菌則是>7歲組的主要病原菌。發(fā)病年齡統(tǒng)計(jì)顯示,3-7歲組和>7歲組的發(fā)病人數(shù)均高于0-3歲組,此研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道相符。

    兒童外陰炎也是一種典型的季節(jié)性疾病,國外報(bào)道多發(fā)生于冬季,春季和秋季也是高發(fā)季節(jié)[3]。本研究顯示,7-9月份發(fā)病人數(shù)較其他3組較高,原因可能是珠三角地區(qū)夏季較長,溫度較高,兒童穿著較少,衛(wèi)生意識(shí)較差,且尤其暑假期間可能與到公共泳池游泳有關(guān);而1-3月份氣溫下降而發(fā)病人數(shù)明顯降低,說明不同氣候?qū)和怅幯椎陌l(fā)病率的確存在一定影響,高溫潮濕的環(huán)境下更有利于一些條件致病菌的生長。

    流感嗜血桿菌是兒童感染性疾病中的一種重要病原菌,可通過污染的手傳播到兒童陰道中。該菌毒力較強(qiáng),通常有莢膜,國外文獻(xiàn)報(bào)道流感嗜血桿菌的生物型Ⅳ型和Ⅶ型是引起青春期前女孩外陰陰道炎的常見病原菌,考慮與該菌的定植特點(diǎn)有關(guān),帶莢膜的流感嗜血桿菌定植率很低[4-6]。而該菌營養(yǎng)要求較高,需要Ⅴ、Ⅹ因子,如無合適的培養(yǎng)基,實(shí)驗(yàn)室很難分離出此菌。本研究顯示,兒童外陰分泌物中流感嗜血桿菌的檢出率居于首位,達(dá)到24.9%,β-內(nèi)酰胺酶的檢出率達(dá)到35%,對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥,高于2012年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)兒童28.5%的檢出率,嗜血桿菌屬在不同地區(qū)產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶各有不同[7]。藥敏試驗(yàn)顯示,該菌對(duì)喹諾酮類、阿奇霉素、加酶抑制劑復(fù)合物(如阿莫西林/棒酸)、二代及三代頭孢菌素類均十分敏感,敏感率可達(dá)80%-100%。復(fù)方新諾明耐藥率較高,不推薦使用。而氟喹諾酮類藥物由于對(duì)嬰幼兒關(guān)節(jié)軟骨等有損害,四環(huán)素類藥物可能影響幼兒牙齒、骨骼的發(fā)育,故臨床醫(yī)生使用時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎。

    本文顯示大腸埃希菌對(duì)碳青霉烯類、丁胺卡那、喹諾酮類的耐藥率較低,但丁胺卡那由于其耳毒性,兒科已少用。本院產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的大腸埃希菌檢出率高達(dá)50%左右,藥敏提示可供選擇的有效抗生素及其有限,僅對(duì)美洛培南等碳青霉烯類敏感,本組資料顯示對(duì)化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的3種或以上抗菌藥物同時(shí)呈現(xiàn)耐藥的多重耐藥大腸埃希菌有增多趨勢(shì)。與各地報(bào)道數(shù)據(jù)比較,兒童患者分離菌中ESBL檢出率高于成人患者[8],此現(xiàn)象是否與兒童患者臨床用藥的局限性(以青霉素和頭孢菌素類為主)以及臨床上大量使用廣譜抗菌藥物有關(guān),值得進(jìn)一步研究。故在使用抗生素治療時(shí)應(yīng)嚴(yán)格掌握用藥指征,盡可能在用藥前行病原學(xué)檢查和藥敏試驗(yàn)。該菌對(duì)青霉素類的耐藥率最高。腸桿菌科細(xì)菌廣泛分布于植物、土壤、水及人和動(dòng)物的腸道內(nèi),是人類腸道的正常菌群,但如出現(xiàn)在其他部位則為條件致病菌。由于兒童生殖系統(tǒng)特點(diǎn)及生長期生長發(fā)育及撫育等特點(diǎn),在夏秋季節(jié)要注意結(jié)合臨床,關(guān)注一些消化道病原菌的檢出。

    本研究檢出的金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有十分高的耐藥率,達(dá)到80-90%,提示對(duì)金葡菌感染的治療,青霉素類及大環(huán)內(nèi)酯類已基本無效。此次檢出14株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA),檢出率較以前也有所升高。金黃色葡萄球菌對(duì)丁胺卡那較敏感,耐藥率僅1.7%,未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素株,所以對(duì)金黃色葡萄球菌感染、特別是MRSA的治療可采用丁胺卡那、萬古霉素,但由于丁胺卡那對(duì)兒童的副作用,萬古霉素不失為治療兒童MRSA感染的較好選擇。

    引起小兒外陰炎的病原微生物除了細(xì)菌外,還有一定的真菌及支原體,本文中真菌感染病例19例,以白色念珠菌為主,解脲/人型支原體5例,占1.0%。兒童真菌感染一般多發(fā)生于青春前期及青春期,此菌常潛伏于人體的口腔、皮膚內(nèi),作為寄生菌不引起癥狀,但當(dāng)宿主內(nèi)環(huán)境失調(diào),特別是免疫功能低下或抗生素干擾時(shí),可轉(zhuǎn)化為致病菌。而支原體感染往往為幼托或家屬間接傳播。

    總之,本研究發(fā)現(xiàn)不同年齡段及不同季節(jié)兒童外陰炎致病性病原菌分布存在一定的差異。各地應(yīng)結(jié)合當(dāng)?shù)丨h(huán)境、氣候特點(diǎn)、準(zhǔn)確掌握本地區(qū)兒童外陰炎菌群分布資料,為本地區(qū)兒童外陰炎的合理用藥及治療提供理論依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

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    摘要:目的掌握不同年齡段及不同季節(jié)珠三角地區(qū)兒童外陰陰道炎的病原菌分布及藥敏情況。方法683例經(jīng)臨床確診為外陰陰道炎并且臨床資料完整的患兒按年齡分為0-3歲組,3-7歲組及>7歲組,同時(shí)按就診時(shí)間分為1-3月份、4-6月份、7-9月份、10-12月份4個(gè)組。無菌操作方法取患兒陰道分泌物,行細(xì)菌、真菌、支原體培養(yǎng)并進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)。結(jié)果①683例患兒中,472例培養(yǎng)陽性,陽性率69.1%,病原菌以流感嗜血桿菌(24.9%),大腸埃希菌(16.9%)和金黃色葡萄球菌(12.0%)為主; ②流感嗜血桿菌和大腸埃希菌是3-7歲組的主要病原菌。>7歲組的病原菌以金黃色葡萄球菌為主(58.3%),與其他2組比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05);③按時(shí)間分組中,7-9月份組陰道炎患兒數(shù)明顯升高;④藥物敏感試驗(yàn)顯示,阿奇霉素、二、三代頭孢菌素類對(duì)流感嗜血桿菌較敏感,大腸埃希菌50%可檢出超廣譜β-內(nèi)酰胺酶,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢出率為23%。結(jié)論不同年齡及不同季節(jié)珠三角地區(qū)兒童外陰陰道炎的致病性病原菌分布均存在一定的差異。各地應(yīng)結(jié)合當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境、氣候等特點(diǎn),準(zhǔn)確掌握本地區(qū)陰道炎的菌群分布,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室藥敏結(jié)果進(jìn)行合理治療。

    關(guān)鍵詞:陰道炎;兒童;年齡;季節(jié);藥敏

    Pathogenic bacteria distribution and drug susceptibility in children with vulvovaginitis in Pearl River DeltaZHONGHua-min,XIEYong-qiang,GUANXiao-shan,etal.(GuangzhouWomenandChildren’sMedicalCenter,Guangzhou,Guangdong510120,China)

    Abstract:ObjectiveTo investigate the pathogenic bacteria distribution and drug susceptibility in children with vulvovaginitis in different age and different season in the Pearl River Delta region.Methods683 children diagnosed as vulvovaginitis were divided into three groups by age and four groups by seasons.Vaginal secretions collecting and culturing were used for bacteria and antimicrobial susceptibility test.Results①Strains of bacteria were isolated from 472 children with the positive rate of 69.1%.Haemophilus influenzae(24.9%),escherichia coli(16.9%) and staphylococcus aureus(12.0%) were the most frequently isolated pathogen; ②Haemophilus influenzae and escherichia coli were the main pathogen bacteria in 3-7 year group,staphylococcus aureus was the most frequently isolated pathogen in <7 yesrs group(P<0.05).③In the season groups,the number of children with vulvovaginitis increased significantly in July-September group.④Drug sensitivity showed that Azithromycin ,Second and third generation cephalosporins were sensitive to haemophilus influenzae.Escherichia coli can be detected 50% of extended-spectrum β-lactamase.Methicillin-resistant Staphylococcus aureus detection rate was 23%.ConclusionThe pathogens distribution and drug susceptibility in children with vulvovaginitis were varies in different age and different season.As a result,a treatment should be done based on the climate,environment,and pathogens distribution of a region.

    Key words:Vulvovaginitis;children;age;season;drug susceptibility

    (收稿日期:2015-06-10)

    作者簡(jiǎn)介:鐘華敏(1978-),女,副主任技師,碩士研究生,主要從事微生物檢驗(yàn)方面的工作

    中圖分類號(hào):R711.73

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1007-4287(2016)01-0107-04

    基金項(xiàng)目:廣東省科技廳社會(huì)發(fā)展領(lǐng)域科技計(jì)劃項(xiàng)目(No:粵科社字[2011]106號(hào))

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