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    腸潰靈口服液抗腹瀉及抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

    2011-05-08 07:07:52劉克勤高永榮李占林
    關(guān)鍵詞:堿組番瀉葉小檗

    劉克勤,高永榮,李占林

    (河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部,河北張家口 075000)

    腸潰靈口服液抗腹瀉及抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

    劉克勤,高永榮,李占林

    (河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部,河北張家口 075000)

    目的觀察腸潰靈口服液的抗腹瀉和抗炎作用。方法采用蓖麻油和番瀉葉致瀉的小鼠和二甲苯耳腫脹炎癥模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果腸潰靈口服液可以減少小鼠蓖麻油性和番瀉葉性腹瀉次數(shù),2組均以小檗堿為陽(yáng)性對(duì)照,在由番瀉葉引起的小鼠腹瀉實(shí)驗(yàn)中,高劑量組與小檗堿組在2h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但在4~Sh差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。低劑量組與小檗堿組,高劑量組與低劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由蓖麻油引起小鼠腹瀉的實(shí)驗(yàn)中,低劑量組與小檗堿組,高劑量組與低劑量組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高劑量組與小檗堿組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)二甲苯引起的炎癥有良好的拮抗作用,且高劑量組與阿斯匹林組,低劑量組與高劑量組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);低劑量組與阿斯匹林組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論腸潰靈口服液有抗腹瀉和抗炎作用。

    腸潰靈口服液;腹瀉;小鼠

    腸潰靈口服液是我院中醫(yī)科治療潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitiS,UC)的經(jīng)驗(yàn)方,是對(duì)治療UC有確切療效的純中藥制劑[1]。我們?cè)鴮?duì)其治療UC大鼠的免疫機(jī)制進(jìn)行了探討[2]。為進(jìn)一步給臨床應(yīng)用提供依據(jù),本實(shí)驗(yàn)對(duì)腸潰靈口服液進(jìn)行了藥效學(xué)的

    研究,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 動(dòng)物:美國(guó)癌癥研究所(inStitute of cancer reSearcch,ICI)小鼠,周齡4~5周,普通級(jí),由河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

    1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物:腸潰靈口服液由白頭翁、秦皮、白術(shù)、仙鶴草、敗醬草、烏梅、黃連、黃柏、薏苡仁、防風(fēng)、甘草、三七粉、白芨等藥物組成,傳統(tǒng)常規(guī)水煎,過(guò)濾煎液,分取2份,S0℃水浴濃縮,最終濃度分別控制為100%(高劑量組)、50%(低劑量組)。藥物(每毫升分別含生藥1g、0.5g)制成后,分裝、高壓滅菌消毒,4℃冰箱保存?zhèn)溆谩7瑸a葉為豆科植物狹葉番瀉(CaSSia anguStifolia Vahl)的干燥小葉。藥物番瀉葉的提取,取20g番瀉葉加熱水300mL,煮沸10min后,過(guò)濾,并放在恒溫水浴鍋上濃縮成1∶1溶液,供實(shí)驗(yàn)用。蓖麻油,遼寧油脂化工廠產(chǎn)品。二甲苯,分析純,哈爾濱化工化學(xué)試劑廠(批號(hào)20040S141);阿司匹林片,合肥久聯(lián)制藥有限公司(批號(hào)20091109);鹽酸小檗堿片,山東仁和堂藥業(yè)有限公司(批號(hào)090505)。

    1.1.3 儀器:JA1003電子天平(上海良平儀器儀表有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 對(duì)蓖麻油引起小鼠腹瀉的影響:ICI小鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量(19.7±1.9)g,隨機(jī)分為4組,模型組、腸潰靈口服液高劑量組、低劑量組和小檗堿組,每組10只。每組灌服相應(yīng)藥液(高劑量組10g/kg,低劑量組5g/kg),模型組灌服等容積自來(lái)水。服藥30min后,每鼠胃內(nèi)灌注蓖麻油0.15mL,并單個(gè)放在鋪有直徑為15cm濾紙墊的塑料盆內(nèi),每隔1小時(shí)更換濾紙,并計(jì)數(shù)濾紙上小鼠腹瀉攤數(shù),共觀察Sh。

    1.2.2 對(duì)番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響:ICI小鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量(20.7±2.1)g,隨機(jī)分為4組。分別為,模型組、小檗堿組、腸潰靈口服液高劑量組、低劑量組。每組按生藥10g/kg灌服相應(yīng)藥液,模型組灌服等容積自來(lái)水。服藥30min后,每鼠胃內(nèi)灌注番瀉葉0.4g,單個(gè)放置在鋪有直徑為15cm ×25cm濾紙墊的塑料盆內(nèi),每隔1小時(shí)更換濾紙,并計(jì)數(shù)濾紙上小鼠腹瀉攤數(shù),共觀察Sh。

    1.2.3 對(duì)二甲苯性小鼠耳腫脹的影響[3]:ICI小鼠40只,雌雄各半,體質(zhì)量(22.3±1.5)g,隨機(jī)分為4組。分別為模型對(duì)照組、腸潰靈口服液高、低劑量組、阿司匹林組(每組10只)。各組連續(xù)灌胃給藥5d,1次/d,模型組灌胃等容積的自來(lái)水,末次給藥1h后,將二甲苯50μL均勻涂于小鼠右耳,2h后處死,用Smm打孔器將左右兩耳廓相同部位等面積取下兩圓耳片,用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)出質(zhì)量,以左右耳質(zhì)量之差作為腫脹度,并計(jì)算腫脹抑制率。抑制率(%)=(模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度×100%。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS 12.0軟件處理,計(jì)量資料以±s表示,各組間比較行單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 對(duì)蓖麻油引起小鼠腹瀉的影響:腸潰靈口服液高劑量組能顯著減少小鼠腹瀉次數(shù),與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。小檗堿組起效迅速,在2h開(kāi)始起就能顯著減少腹瀉次數(shù)。低劑量組與小檗堿組,高劑量組與低劑量組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高劑量組與小檗堿組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 對(duì)蓖麻油引起小鼠小腸性腹瀉的影響(n=10,±s,次數(shù))

    表1 對(duì)蓖麻油引起小鼠小腸性腹瀉的影響(n=10,±s,次數(shù))

    *P<0.05 #P<0.01與模型組比較 △P<0.05腸潰靈口服液低劑量組(q檢驗(yàn))

    組別劑量(ω/g·kg-1)2h4h6hSh模型組5.3±2.S6.S±2.77.5±2.9S.1±3.0小檗堿組0.51.0±0.9#△1.5±1.3#△1.9±1.5#△2.1±1.6#△腸潰靈口服液低劑量組53.4±1.6*3.S±1.5*5.5±1.97.0±3.4腸潰靈口服液高劑量組101.3±1.0#△1.9±1.2#△2.1±1.3#△2.4±1.2#△

    2.2 對(duì)番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響:腸潰靈口服液在給藥4~Sh內(nèi)能明顯減少小鼠的腹瀉次數(shù),與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。小檗堿組給藥2h起差異就有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),腸潰靈口服液組不及小檗堿組起效快。低劑量組與小檗堿組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高劑量組與低劑量組在2h差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但在4~Sh差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高劑量組與小檗堿組在2h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但在4h~Sh差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

    表2 各組對(duì)番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響(n=10,±s,次數(shù))

    表2 各組對(duì)番瀉葉引起小鼠腹瀉的影響(n=10,±s,次數(shù))

    *P<0.05 #P<0.01與模型組比較 △P<0.05與小檗堿組比較 ☆與腸潰靈口服液低劑量組比較(q檢驗(yàn))

    組別劑量(ω/g·kg-1)2h4h6hSh模型組6.3±3.112.4±3.314.1±4.516.7±3.S小檗堿組0.53.1±1.9#△5.6±3.2#△7.4±3.3#△S.7±3.7#△腸潰靈口服液低劑量組55.2±3.0S.S±4.1*10.3±3.7*12.5±3.6*腸潰靈口服液高劑量組104.3±2.4△6.7±3.5#☆S.3±3.6#☆9.S±3.2#☆

    2.3 對(duì)二甲苯性小鼠耳腫脹的影響:腸潰靈口服液組能顯著抑制二甲苯對(duì)小鼠耳殼的致炎作用,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。但抑制率不及實(shí)驗(yàn)量的阿司匹林組,高劑量組與阿司匹林組,低劑量組與高劑量組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;低劑量組與阿司匹林組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

    表3 對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(n=10,±s)

    表3 對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(n=10,±s)

    *P<0.05 #P<0.01與模型組比較 △與腸潰靈口服液低劑量組比較(q檢驗(yàn))

    組別劑量(ω/g·kg-1)左耳質(zhì)量(m/mg)右耳質(zhì)量(m/mg)平均腫脹度(m/mg)抑制率(%)模型組12.34±1.1920.S6±3.26S.52±2.07-阿司匹林組0.312.3S±1.6514.9S±2.332.60±0.6S69.4S#△腸潰靈口服液高劑量組 1012.16±2.5716.43±3.194.27±0.6249.SS*#腸潰靈口服液低劑量組 512.53±1.4417.9S±4.675.45±3.2735.S0*

    3 討 論

    蓖麻油系刺激小腸而致瀉,番瀉葉系刺激大腸而致瀉。本實(shí)驗(yàn)表明,腸潰靈口服液抗蓖麻油引起的小鼠小腸性腹瀉與抗番瀉葉引起小鼠大腸性腹瀉均有良好的作用。其機(jī)制可能是口服液中各藥具有抑制腸運(yùn)動(dòng)作用[4]。本實(shí)驗(yàn)采用的二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型,具有方法合理、效果明顯、誤差范圍小、技術(shù)難度低等特點(diǎn),是天然藥物抗炎藥研究中最常使用的炎癥模型。非特異性炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)局部損傷的反應(yīng)。在炎癥的早期,某些炎癥介質(zhì)刺激血管,使血管擴(kuò)張,血管內(nèi)皮間隙擴(kuò)大,血管壁通透性增強(qiáng),血管內(nèi)的液體、蛋白質(zhì)和白細(xì)胞等滲出到組織間隙,隨著滲出的增加,造成組織腫脹。炎癥滲出組織腫脹是急性炎癥病理組織學(xué)的主要特征。本研究采用二甲苯作為致炎因子,引起急性炎癥反應(yīng),通過(guò)測(cè)定小鼠耳廓的腫脹程度,反映出腸潰靈口服液具有一定的抗炎效果。腸潰靈口服液臨床應(yīng)用已多年,李占林等[5]應(yīng)用腸潰靈口服液防治大鼠UC的實(shí)驗(yàn)研究表明,其機(jī)制可能是通過(guò)提高腸壁黏膜超氧化物歧化酶活性.加強(qiáng)氧自由基的清除而顯著改善局部黏膜損害。

    [1]李占林,高懷玉,杜俊寶.腸潰湯口服兼灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎60例[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥雜志,2006,17(5):799-S00.

    [2]劉克勤,李占林,高永榮.腸潰靈口服液治療大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的免疫機(jī)制探討[J].河北醫(yī)藥,2010,32(21):3047-304S.

    [3]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001.911.

    [4]呂錦芳,盧文超,寧康健.白頭翁湯對(duì)兔離體十二指腸運(yùn)動(dòng)性能的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技,2005,12(5):279.

    [5]李占林,王立新,劉克勤.腸潰靈口服液防治大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].環(huán)球中醫(yī)藥,200S,1(5):1-3.

    I969.4

    B

    1007-3205(2011)07-0S56-03

    2011-05-1S;

    2011-06-23

    河北省張家口市科技局立項(xiàng)題目(0S01013D)

    劉克勤(1971-),女,河北張家口人,河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院主管藥劑師,理學(xué)學(xué)士,從事臨床藥學(xué)研究。

    10.3969/j.iSSn.1007-3205.2011.07.04S

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