淺析陰道毛滴蟲染色鏡檢的改良應(yīng)用

袁梅鋒　徐建琳

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淺析陰道毛滴蟲染色鏡檢的改良應(yīng)用

袁梅鋒徐建琳

【摘要】目的 分析陰道毛滴蟲染色鏡檢的改良應(yīng)用。方法 比較分析多種染色方法，同時(shí)促進(jìn)滴蟲染色鏡檢法的條件進(jìn)一步優(yōu)化。比較現(xiàn)場濕片檢測結(jié)果，選擇最好的驗(yàn)證方法。結(jié)果 葉睫橙染色方法具有顯著的分辨率，選用l/5 000葉睫橙染液染色方法對已固定處理的涂片標(biāo)本的效果非常好。結(jié)論 葉睫橙染色鏡檢方法是最佳控制陰道毛滴蟲病的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量方法之一。

【關(guān)鍵字】陰道；毛滴蟲；染色鏡檢；改良

作者單位：354200福建省南平市建陽區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科

研究選取2012年1月～2015年1月本院就診女性性服務(wù)者106例作為研究對象，通過比較多種染色方法，驗(yàn)證葉睫橙染色鏡檢方法的作用及效果，具體報(bào)道如下。

1　標(biāo)本選取及方法

1.1標(biāo)本選取

選取2012年1月～2015年1月本院就診女性性服務(wù)者106例作為研究對象，年齡16～44歲，平均年齡（27.44±3.44）歲。并且在≤3個(gè)月內(nèi)存在商業(yè)性的性服務(wù)。得到106份受檢人員的陰道分泌物，對上述分泌物標(biāo)本進(jìn)行涂片操作。使用無水乙醇完成涂片的固定，固定時(shí)間維持5 min，在固定完成之后，將上述標(biāo)本盒放置于4℃溫度下，維持保存時(shí)間四個(gè)月左右后，對上述標(biāo)本進(jìn)復(fù)檢[1]。

1.2八種染色方法

（1）瑞氏染色方法。（2）革蘭染色方法。（3）l/5 000葉睫橙方法。（4）5%中性紅方。（5）l/l 600葉睫橙方法。（6）姬氏染色方法。（7）l/l0 000葉睫橙方法。（8）0.l%沙黃溶液方法。

1.3比較分析

在實(shí)際工作中，按照《性傳播疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷》標(biāo)準(zhǔn)，在上述的基礎(chǔ)上實(shí)施八種染色方法，分析比較八種染色方法所得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。之后將滴蟲陽性標(biāo)本來實(shí)現(xiàn)涂片的制作，在完成制作之后對其進(jìn)行自然干燥，之后使用一定量的乙醇完成固定，固定一段時(shí)間后，使用鏡檢觀察及比較每種染液染色涂片數(shù)張，找到最合適的染色方法[2-3]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS27.0進(jìn)行處理分析，計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

分析八種染色方法，對結(jié)果進(jìn)行鏡片觀察，分析相關(guān)的涂片后可知，八種方法中葉睫橙染色方法的效果最顯著，在分析滴蟲蟲體的過程中，葉睫橙染色方法具有顯著分辨率。選用l/5 000葉睫橙染液染色方法對已經(jīng)固定處理的涂片標(biāo)本的效果好。

2.1瑞氏染色方法

滴蟲檢查結(jié)果：滴蟲核的顏色為紫紅色，其蟲體顏色則為淡藍(lán)色。陰道上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：細(xì)胞核顏色為紫紅色，其胞漿的顏色為淡紅色。瑞氏染色方法可辨別滴蟲與上皮細(xì)胞，但需要豐富的經(jīng)驗(yàn)，否則難以順利的進(jìn)行區(qū)分。

2.2革蘭染色方法

滴蟲檢查結(jié)果：蟲體的顏色為紫紅色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：上皮細(xì)胞的顏色為紫紅色。革蘭染色方法可分辨典型形態(tài)蟲體，如不典型的形態(tài)蟲體則很難進(jìn)行辨別。

2.3l/5 000葉睫橙方法

滴蟲檢查結(jié)果：蟲體染的顏色為橙色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：細(xì)胞核的顏色為黃綠色，細(xì)胞核則呈現(xiàn)綠色，顯示為熒光。l/5 000葉睫橙方法對蟲體著色顯著，具有高的鏡檢檢出率。

2.45%中性紅方法

滴蟲檢查結(jié)果：活蟲染色顯示為不著色，顏色為白色，其運(yùn)動(dòng)不受到阻礙，死蟲染顯示為淡紅色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：核染呈現(xiàn)顏色為粉紅色，其背景則顯示為紅色。5%中性紅方法難以區(qū)分死蟲跟細(xì)胞。

2.5l/l 600葉睫橙方法

滴蟲檢查結(jié)果：蟲體染可以轉(zhuǎn)變?yōu)槌壬?，其?xì)胞的核、中軸及鞭毛的顏色為黃綠色，顯示熒光結(jié)果。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：細(xì)胞核呈現(xiàn)灰白色，同時(shí)其本底為黑褐色。l/l 600葉睫橙方法可以很容易檢測出蟲體，進(jìn)行直接鏡檢，具有很高的檢出率。

2.6姬氏染色方法

滴蟲檢查結(jié)果：滴蟲的顏色為藍(lán)色、其蟲體的顏色為淡藍(lán)色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：核部位的顏色為深藍(lán)色、胞漿的顏色為淡藍(lán)色。姬氏染色方法難以有效的區(qū)分滴蟲及上皮細(xì)胞。

2.7l/l0 000葉睫橙方法

滴蟲檢查結(jié)果：活蟲的顏色為橙紅或呈現(xiàn)橙黃色，細(xì)胞的核、中軸及鞭毛則呈現(xiàn)淡綠色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：細(xì)胞核呈現(xiàn)為淡綠色，本底染顏色為黑綠色。l/l0 000葉睫橙方法使試管內(nèi)活蟲染色，蟲體著色情況顯著，具有顯著的檢出率。

2.80.l%沙黃溶液方法

滴蟲檢查結(jié)果：活蟲無顏色，其運(yùn)動(dòng)不會(huì)受到阻礙，死蟲顏色則為淡紅色。上皮細(xì)胞檢查結(jié)果：染成顏色為淡紅色，其背景則顯示為淡紅色。0.l%沙黃溶液方法難以順利區(qū)分死蟲跟細(xì)胞。

2.9分析檢出率

分析評價(jià)l/5 000葉睫橙染液法以及現(xiàn)場濕片法。對選取的106份受檢人員陰道分泌物標(biāo)本涂片，使用濕片法得到的陽性檢出率大小為25.47%。涂片染色法陽性檢出率大小為23.58%，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3　討論

目前大部分醫(yī)療機(jī)構(gòu)對陰道毛滴蟲病的實(shí)驗(yàn)室診斷一般使用濕片法診斷，但其存在很多方面因素的影響，濕片法檢測有很多不盡人意的部分。使用美國BioMed Diagnostics公司生產(chǎn)的商品化的in Pouch TV培養(yǎng)袋可以有效解決常規(guī)的培養(yǎng)法難以順利操作的缺點(diǎn)，還可取得非常好的培養(yǎng)效果，但其費(fèi)用較高，且對實(shí)驗(yàn)室條件要求較高，因此可選擇葉睫橙涂片染色方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 余艷華，尹躍平，孫秀峰. 陰道毛滴蟲染色鏡檢方法的改良與應(yīng)用[J]. 皮膚性病診療學(xué)雜志，2012，19（5）：312-314.

[2] 胡正強(qiáng)，鄒盛杰，李福平，等. 應(yīng)用尿沉渣鏡檢輔助革蘭氏染色法檢出陰道毛滴蟲[J]. 職業(yè)衛(wèi)生與病傷，2003，18（3）：207.

[3] 李芳芳. 滴蟲陰道炎體外診斷方法淺析[J]. 中國微生態(tài)學(xué)雜志，2014，3（10）：339-341.

To Explore the Improved Application of Trichomonas Vaginalis Staining Microscopy

YUAN Meifeng XU Jianlin, Clinical Laboratory, Jianyang District Maternal and Child Care Service Centre, Jianyang 354200, China

[Abstract]Objective Analysis Improved application of trichomonas vaginalis staining microscopy. Methods Comparative analysis of various dyeing methods, at the same time to promote further optimize the condition of trichomonad staining microscopy method. compared the wet test results to choose the best validation method. Results The resolution of the leaf nasociliary orange staining method is very significant. Choose l/5 000 leaf nasociliary orange dye solution dyeing method of the part has been fixed processing smears effect was very good. Conclusion Leaf nasociliary orange staining microscopy method is the best one of the laboratory quality control method of trichomonas vaginalis disease.

[Key words]Vagina, Trichomoniasis, Staining microscopy, Improved

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.02.038

【文章編號】1674-9308（2016）02-0057-02

【中圖分類號】R446.1

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A