GC/MS技術(shù)檢測(cè)大球蓋菇中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留

□陳 雙/蓬溪縣農(nóng)業(yè)局

GC/MS技術(shù)檢測(cè)大球蓋菇中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留

□陳 雙/蓬溪縣農(nóng)業(yè)局

大球蓋菇又名酒紅球蓋菇，球蓋菇屬，是我國(guó)近幾年食用菌中的后起之秀。菇體腿粗蓋肥，營(yíng)養(yǎng)豐富，口感極佳。它富含對(duì)人體有益的多種礦物質(zhì)元素及維生素，具有預(yù)防冠心病、助消化、疏解人體疲勞之功效。大球蓋菇是四川省蓬溪縣食用菌產(chǎn)業(yè)的龍頭產(chǎn)品之一，產(chǎn)品在市場(chǎng)上供不應(yīng)求。

有機(jī)氯是廣譜殺蟲(chóng)劑，曾是各國(guó)使用最廣泛的農(nóng)藥[1]。有機(jī)氯農(nóng)藥六六六、滴滴涕等化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性大，殘留期長(zhǎng)，毒副作用較大，我國(guó)已禁止使用20多年，但是目前在土壤、部分農(nóng)產(chǎn)品中仍能檢出有機(jī)氯殘留[2,3]。運(yùn)用氣相色譜法檢測(cè)蔬菜、食用菌中的農(nóng)殘相關(guān)研究較多[4,5]，對(duì)大球蓋菇中的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留檢測(cè)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究采用GC/MS技術(shù)，通過(guò)組分保留時(shí)間和特征離子質(zhì)量對(duì)大球蓋菇中11種有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，靈敏度高，效果良好。

1 試驗(yàn)材料、試劑及儀器

1.1 試驗(yàn)材料

大球蓋菇，抽樣于蓬溪縣民富蔬菜（食用菌）專業(yè)合作社。用食物料理機(jī)打碎制樣，裝入保鮮盒待測(cè)。

1.2 試驗(yàn)試劑及儀器

試驗(yàn)試劑：正己烷、甲苯、乙腈（色譜純）；無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉；C-NH2小柱（500mg+500mg/6mL）；六六六等11種有機(jī)氯農(nóng)藥標(biāo)品（100mg/L，1mL）購(gòu)于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所。

試驗(yàn)用儀器：Agilent 7890B-5977氣質(zhì)聯(lián)用儀（EI離子源，質(zhì)譜庫(kù)NIST11，美國(guó)安捷倫公司）；CombiMax600食物料理機(jī)；DC12H氮吹儀；T25高速分散（勻漿）機(jī)；XH-C漩渦混合儀。

2 試驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

將11種農(nóng)藥標(biāo)品（α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p′-DDE、o,p′-DDD、o,p′-DDT、p,p′-DDT、五氯硝基苯、百菌清、三氯殺螨醇）全部移入50mL容量瓶中，用正己烷淋洗安瓿瓶2～3次，定容至刻度得到2mg/L的菊酯類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。低溫保存，使用時(shí)稀釋成0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.2 樣品前處理

稱取20.0 g大球蓋菇試樣，加入40.0mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2min后用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有5 g氯化鈉的50mL具塞量筒中，收集濾液30～40mL，蓋上蓋子，劇烈震蕩1min，在室溫下靜止30min，使乙腈相和水相分層。然后從具塞量筒中吸取5.00mL乙腈溶液，65℃氮吹，蒸發(fā)近干，加入3.5mL乙腈+甲苯（3+1）溶解殘?jiān)?，待凈化?/p>

凈化過(guò)程：（1）活化及平衡：用5mL乙腈+甲苯（3+1）預(yù)淋洗C-NH2小柱。（2）上樣：待凈化液過(guò)C-NH2小柱上，用10mL玻璃管接收。（3）洗脫：用3.5mL乙腈+甲苯（3+ 1）沖洗后淋洗復(fù)合氨基柱，并重復(fù)2次。

濃縮、定容：10mL玻璃管接收液，65℃氮吹，蒸發(fā)近干。準(zhǔn)確取用2.0mL正己烷溶解殘?jiān)?，裝入自動(dòng)進(jìn)樣瓶中，供GC/MS檢測(cè)分析。

2.3 色譜-質(zhì)譜條件

GC色譜柱：HP-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度280℃；柱升溫程序70℃（2 min）→25℃/min→150℃→3℃/min→200℃→8℃/min→280℃（4 min）；載氣：氦氣1.5m L/min，純度不低于99.999％；進(jìn)樣模式：不分流；進(jìn)樣量為1μL。

表1 11種有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定的SIM方法

MS離子源（EI）溫度：230℃；四級(jí)桿溫度150℃；色譜-質(zhì)譜接口溫度280℃；溶劑延遲：10min；采集方式：先對(duì)混合標(biāo)樣進(jìn)行全掃描監(jiān)測(cè)（SCAN），得到11種有機(jī)氯農(nóng)藥的保留時(shí)間，如圖1所示，然后利用農(nóng)藥保留時(shí)間進(jìn)行選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）；SIM條件見(jiàn)表1。

3 結(jié)果與討論

3.1 有機(jī)氯農(nóng)藥圖譜

從譜圖1中可以得到有機(jī)氯農(nóng)藥保留時(shí)間。11種有機(jī)氯農(nóng)藥沒(méi)有出現(xiàn)相互干擾的峰，表明該技術(shù)方法分離效果較好。

圖1 采用SCAN全掃描測(cè)定的11種有機(jī)氯農(nóng)藥圖譜

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別取0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，每個(gè)濃度連續(xù)進(jìn)樣三次，取平均值。以濃度為橫坐標(biāo)，響應(yīng)面值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到11種農(nóng)藥的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)R。試驗(yàn)測(cè)得相關(guān)系數(shù)在0.998 8～0.999 9，各種農(nóng)藥皆呈良好的線性關(guān)系。

3.3 檢出限、定量限、回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

本試驗(yàn)在大球蓋菇樣品中均添加2mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別是0.5、1.0、2.0mg/L三個(gè)濃度水平，按照步驟2.2及2.3進(jìn)行操作，平行測(cè)定6次。依據(jù)儀器信噪峰峰比3計(jì)算檢出限，信噪峰峰比10計(jì)算定量限；加標(biāo)SIM圖譜見(jiàn)圖2；方法的試驗(yàn)結(jié)果詳見(jiàn)表2。

表2 方法的檢出限、定量限、回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

圖2 大球蓋菇樣品中的加標(biāo)圖譜

表2表明，11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的方法檢出限（S/N=3）為0.001 0～0.008 3 mg/kg，定量限（S/N=10）為0.004～0.030mg/kg。回收率在82.1％～112.0％范圍內(nèi)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.1％～6.4％之間，說(shuō)明該方法符合農(nóng)殘檢測(cè)要求。

3.3 結(jié)果與討論

本次對(duì)大球蓋菇中的有機(jī)氯進(jìn)行了測(cè)定，從蓬溪縣民富專業(yè)合作社不同大棚中抽檢樣品5份，均未檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留。

本工作建立了氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定大球蓋菇中11種有機(jī)氯農(nóng)藥的方法。利用乙腈萃取，C-NH2復(fù)合小柱凈化，去處色素和雜質(zhì)，使得準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，可用于大球蓋菇等食用菌中農(nóng)殘檢測(cè)。

[1]黃曉會(huì),薛建,吳曉波,等.根莖類中藥材有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥多殘留分析[J].中成藥,2012(34):100-104.

[2]Shi Y J,Lu YL,Wang TY,et al.Comparison of organochlorin pesticides occur rence,origin,and character in agricul tural and indust rial soi ls in Bei j ing[J].rch Environ Contam Toxicol,2009,57(3):447-455.

[3]Sun JW,Zhang Y,Wang S.Development of an enzyme-l inked immunosorbent assay for metolcarb residue analysis and investigation of matrix ef fects f rom di f ferent agricul tural product[J].Anal Bioanal Chem,2009,394(8): 2223-2230.

[4]郭素華,廖華軍.閩產(chǎn)中成藥有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[J].中成藥,2005,27(2):161-164.

[5]仲岳桐,陳春曉.氣質(zhì)聯(lián)用儀法檢測(cè)茶葉中聯(lián)苯菊酯等四種擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2010(11): 1373-1374.