中藥保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨的作用機(jī)制研究進(jìn)展*

張　磊，王朝旭，吳沅皞，劉　維

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津　300193；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津　300193；3.天津市濱海新區(qū)杭州道街向陽(yáng)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，天津　300451）

·綜 述·

中藥保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨的作用機(jī)制研究進(jìn)展*

張磊1，2，王朝旭3，吳沅皞1，劉維1

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津300193；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津300193；3.天津市濱海新區(qū)杭州道街向陽(yáng)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，天津300451）

通過文獻(xiàn)整理，從組織形態(tài)學(xué)、細(xì)胞因子、軟骨細(xì)胞凋亡等多方面概述了近些年來中藥在保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨方面的作用機(jī)制及研究進(jìn)展，中藥治療骨關(guān)節(jié)炎主要通過減輕損傷、延緩?fù)俗兗按龠M(jìn)軟骨分化和修復(fù)起作用，其機(jī)制包括：1）抑制軟骨細(xì)胞炎性因子的表達(dá)及產(chǎn)生；2）抑制關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)；3）促進(jìn)生長(zhǎng)因子表達(dá)；4）促進(jìn)膠原蛋白形成；5）促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖；6）抑制關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡等方面。

中藥；關(guān)節(jié)軟骨；機(jī)制

以類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、骨關(guān)節(jié)炎（OA）等為代表的骨與關(guān)節(jié)炎疾病是造成人類喪失勞動(dòng)力和致殘的主要原因之一，3年內(nèi)關(guān)節(jié)破壞可達(dá)70%，且具有遷延難愈的特點(diǎn)，極大影響了患病人群的生活質(zhì)量和勞動(dòng)能力。關(guān)節(jié)軟骨破壞是此類疾病的重要病理機(jī)制。因此，深入研究其有效干預(yù)方案成為備受重視的關(guān)鍵問題。目前，對(duì)于此類疾病現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療主要以非甾體類藥物和關(guān)節(jié)軟骨保護(hù)藥物為主，而中醫(yī)藥在治療膝骨關(guān)節(jié)炎（KOA）和保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨方面也有很好的療效，且不良反應(yīng)較少。近年來，學(xué)者從軟骨細(xì)胞本身的代謝周期和各階段的病理特征出發(fā)，并集合軟骨下骨力學(xué)及相關(guān)理化因素，應(yīng)用中藥開展相關(guān)研究，探討中藥干預(yù)軟骨細(xì)胞凋亡及保護(hù)關(guān)節(jié)的機(jī)制，為臨床防治RA、OA等疾病提供了理論依據(jù)。筆者就相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展綜述如下。

1　對(duì)炎癥相關(guān)因子的作用

目前研究中藥對(duì)細(xì)胞因子及炎性因子的作用大多關(guān)注于白細(xì)胞介素（IL）-1、IL-6及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）等，這些因子在關(guān)節(jié)腔內(nèi)直接影響到軟骨的修復(fù)。如Liu Wei等［1］采用脂多糖刺激的體外培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞炎癥模型，以補(bǔ)腎活血法中藥復(fù)方含藥血清干預(yù)可見軟骨細(xì)胞活性提高，可明顯下調(diào)軟骨細(xì)胞IL-1β、TNF-α、iNOS的基因表達(dá)水平，對(duì)抗脂多糖誘導(dǎo)的炎性因子過表達(dá)。張沖等［2］研究補(bǔ)腎固筋方對(duì)骨關(guān)節(jié)炎TNF-α、iNOS的調(diào)節(jié)機(jī)制，采用改良的Hulth法OA山羊模型，取血清、股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)軟骨、滑膜及軟骨下骨進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)，結(jié)果見補(bǔ)腎固筋方能有效降低骨關(guān)節(jié)炎TNF-α、iNOS含量，進(jìn)而抑制滑膜炎性改變，減少炎性物質(zhì)對(duì)軟骨和滑膜的侵害，增強(qiáng)軟骨細(xì)胞的代償能力，延緩軟骨退變，促進(jìn)軟骨修復(fù)。季衛(wèi)鋒等［3］探討補(bǔ)腎活血法、活血法、補(bǔ)腎法、祛風(fēng)法對(duì)SD大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎血液流變學(xué)及滑液IL-1β、TNF-α的作用及其機(jī)制，采用木瓜蛋白酶大鼠膝關(guān)節(jié)腔注射法制作KOA模型，隨機(jī)分組給予中藥灌胃后30、60、90 d分批處死動(dòng)物后進(jìn)行各種指標(biāo)的檢測(cè)，結(jié)果可見補(bǔ)腎活血方能抑制大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨損傷，改善血液循環(huán)及抑制局部炎癥反應(yīng)，早期活血方、補(bǔ)腎活血方均有一定療效，但晚期補(bǔ)腎活血方療效較活血方，補(bǔ)腎方更顯著。王慶甫等［4］觀察低頻超聲促透通絡(luò)止痛湯對(duì)家兔KOA模型血清、關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子的影響，結(jié)果見中藥可使關(guān)節(jié)液內(nèi)IL-1β、TNF-α、軟骨寡聚基質(zhì)蛋白（COMP）、一氧化氮（NO）含量減低，減緩滑膜細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，延緩關(guān)節(jié)軟骨退行性變，從而減輕膝關(guān)節(jié)局部炎性反應(yīng)。鄧素玲等［5］觀察骨痹消對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎兔關(guān)節(jié)軟骨TNF-α、IL-1水平的影響，模型制作成功后，隨機(jī)分為模型組、西藥組、中藥組，連續(xù)給藥9 d，采用ELISA法測(cè)定兔關(guān)節(jié)軟骨中TNF-α、IL-1含量，結(jié)果見骨痹消可抑制OA兔軟骨細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α和IL-1。劉洪波等［6］觀察健骨伸筋湯對(duì)大鼠膝關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨病理改變及關(guān)節(jié)液IL-1β及NO含量的影響，結(jié)果見健骨伸筋湯可降低IL-1β和NO含量，有一定的關(guān)節(jié)軟骨保護(hù)作用，可一定程度地延緩KOA動(dòng)物模型軟骨的退變。鄭潔等［7］觀察鹽酸青藤堿關(guān)節(jié)腔注射對(duì)木瓜蛋白酶誘導(dǎo)的家兔KOA模型血清及關(guān)節(jié)液中脂聯(lián)素水平以及軟骨中脂聯(lián)素受體（Adipo-R）-1和Adipo-R2的mRNA和蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果青藤堿關(guān)節(jié)腔注射可明顯下調(diào)Adipo-R1在軟骨的表達(dá)，但對(duì)Adipo-R2的高表達(dá)無抑制作用。提示降低血清及關(guān)節(jié)液脂聯(lián)素含量以及下調(diào)Adipo-R1在軟骨的表達(dá)可能是青藤堿關(guān)節(jié)腔注射治療OA的機(jī)制之一。闞衛(wèi)兵等［8］觀察補(bǔ)腎活血方對(duì)家KOA滑膜組織基因表達(dá)譜的調(diào)控作用。采用Hulth方法建立家兔KOA模型，給予補(bǔ)腎活血方干預(yù)、常規(guī)抽提和純化RNA，采用AffymetrixRat230 2.0Array芯片檢測(cè)滑膜組織的基因表達(dá)變化，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎活血方干預(yù)后，有14條基因表達(dá)顯著改變，其中上調(diào)MAP2K6、TRISK51、Nt5、OX-45Cd2、Lat、Nox4、Fosl1、C3、Gilz、Cited2等mRNA 1.8倍以上，下調(diào)InsP3R 2、Cycs、LOC59114、versican V3等mRNA 2倍以上，可見補(bǔ)腎活血方可能通過調(diào)控目前在OA發(fā)生、發(fā)展中作用尚不明確的基因，起到抑制滑膜病變進(jìn)展、促進(jìn)軟骨修復(fù)，從而達(dá)到治療OA作用，而其中實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果中的基因多數(shù)是免疫和炎癥相關(guān)因子。

2　對(duì)蛋白酶及其抑制劑的影響

中藥對(duì)蛋白酶及其抑制劑的作用是目前研究的熱點(diǎn)。如李念虎等［9］探討補(bǔ)腎活血方對(duì)大鼠KOA模型IL-1β、盤狀結(jié)構(gòu)域受體2（DDR2）以及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-1的影響，采用SD大鼠造模成功后分為中藥組、西藥組和空白對(duì)照組分別處理。進(jìn)行血清IL-1β水平以及關(guān)節(jié)液IL-1β水平的檢測(cè)。采用免疫組化方法檢測(cè)DDR2的表達(dá)，采用RTPCR方法檢測(cè)MMP1的基因表達(dá)，結(jié)果提示中藥補(bǔ)腎活血方可降低滑膜細(xì)胞分泌IL-1β，降低軟骨細(xì)胞DDR2表達(dá)水平，從而降低MMP-1的表達(dá)，減緩OA進(jìn)展。徐華明等［10］觀察祛痰除濕劑對(duì)原代培養(yǎng)OA患者的膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中Ⅱ型膠原、X型膠原和相關(guān)代謝酶MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA表達(dá)的影響，采用實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)（Real Time-PCR）法進(jìn)行檢測(cè)，探討祛痰除濕劑治療OA的作用及其機(jī)制，結(jié)果見祛痰除濕劑可調(diào)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨中膠原及相關(guān)MMPs的mRNA表達(dá)，從而對(duì)退變的軟骨細(xì)胞有一定的修復(fù)作用，并可延緩關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的進(jìn)一步退變。單鵬程等［11］觀察溫陽(yáng)益髓中藥治療KOA對(duì)軟骨MMPs表達(dá)的影響，采用PCR方法定量分析OA模型組軟骨組織中MMP-1、MMP-3、MMP-13表達(dá)水平，研究得出溫陽(yáng)益髓中藥治療家兔KOA能夠有效抑制OA軟骨基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，從而減少軟骨基質(zhì)的降解，對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起到保護(hù)作用。

3　對(duì)生長(zhǎng)因子的作用

生長(zhǎng)因子如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）β等是一類多功能多肽類物質(zhì)，其參與了軟骨細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等諸多不同類型細(xì)胞的增殖、分化過程，在胚胎、器官、軟骨等的發(fā)育中起到重要的調(diào)控作用。牛維等［12-13］研究單味中藥鹿茸對(duì)OA軟骨組織TGF-β1的調(diào)控作用，并進(jìn)一步研究了TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的關(guān)鍵分子Smad2、3的表達(dá)。研究得出鹿茸通過調(diào)控軟骨細(xì)胞內(nèi)Smad2、3基因和蛋白的表達(dá)，起到促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖、分化的作用；通過上調(diào)TGF-β1的表達(dá)，促進(jìn)了其信號(hào)向核內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)；并得出軟骨細(xì)胞內(nèi)的Smad2、3基因表達(dá)及蛋白水平的上調(diào)可能是OA發(fā)病的重要機(jī)制之一。吳晶金等［14］探討祛風(fēng)散寒除濕法治療OA的分子機(jī)制，以正清風(fēng)痛寧緩釋片為研究載體，通過實(shí)時(shí)定量PCR試驗(yàn)，檢測(cè)軟骨細(xì)胞TGF-β、白細(xì)胞介素-1β、卵泡抑素樣蛋白-1、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-3 mRNA表達(dá)水平，結(jié)果提示祛風(fēng)散寒除濕中藥正清風(fēng)痛寧緩釋片對(duì)關(guān)節(jié)軟骨具有保護(hù)作用，其對(duì)OA軟骨的保護(hù)作用可能是通過上調(diào)軟骨細(xì)胞TGF-β、卵泡抑素樣蛋白-1及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-3 mRNA在軟骨細(xì)胞的表達(dá)及下調(diào)炎性致病因子白細(xì)胞介素-1β的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。郝亞明等［15］觀察中藥方劑消骨痛湯對(duì)OA大鼠模型中軟骨和滑膜中TGF-β1和骨形成蛋白2（BMP2）的表達(dá)。用免疫組化方法檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，研究發(fā)現(xiàn)，消骨痛湯能上調(diào)OA軟骨TGFβ1和BMP2的表達(dá)水平，刺激軟骨蛋白多糖的合成，促進(jìn)軟骨細(xì)胞的修復(fù)和再生，維持關(guān)節(jié)軟骨的內(nèi)環(huán)境平衡，防止軟骨的退化，對(duì)治療OA有一定的治療作用。劉不盡［16］探討銀杏葉提取物對(duì)骨內(nèi)高壓下關(guān)節(jié)軟骨代謝的保護(hù)作用，采用RT-PCR檢測(cè)軟骨組織軟骨代謝相關(guān)基因骨蛋白生長(zhǎng)因子（BMP）-2、TGF-β1mRNA的表達(dá)差異。研究得出銀杏葉提取物注射液可以有效降低骨水泥阻塞骨干髓腔后引起的骨內(nèi)高壓，調(diào)節(jié)BMP-2、TGF-β1 mRNA的表達(dá)從而減輕關(guān)節(jié)軟骨的損害。韋宋譜等［17］探討河蚌葡聚糖（HBP-A）治療OA大鼠6周后的含藥血清對(duì)軟骨細(xì)胞MMP-13和βcatenin基因表達(dá)的影響。培養(yǎng)48 h后觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，采用PCR進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，得出結(jié)論HBP-A含藥血清通過降低MMP-13和β-catenin基因的表達(dá)起到保護(hù)軟骨細(xì)胞的作用。

4　對(duì)膠原蛋白形成和氧自由基的影響

荊琳等［18］通過運(yùn)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈技術(shù)，觀察溫陽(yáng)益髓方對(duì)軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖的影響，并通過病理切片觀察Ⅱ型膠原和蛋白多糖的染色結(jié)果。得出溫陽(yáng)益髓方能增加KOA家兔軟骨中Ⅱ型膠原表達(dá)及蛋白多糖的水平，對(duì)維持正常膠原表型、保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨有一定的作用。Liu Wei等［1］以補(bǔ)腎活血法中藥復(fù)方含藥血清干預(yù)脂多糖刺激的體外培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞炎癥模型，可有效抑制軟骨細(xì)胞NO、丙二醛（MDA）產(chǎn)生，上調(diào)超氧化物歧化酶（SOD）分泌量，對(duì)抗過氧化損傷，從而產(chǎn)生軟骨保護(hù)作用；并以補(bǔ)腎活血法中藥復(fù)方灌胃干預(yù)Hulth法家兔OA模型，結(jié)果見中藥可顯著降低模型兔的血清、尿羥脯氨酸（Hyp）水平，增加內(nèi)源性SOD的活性，降低MDA和NO釋放量，由此促進(jìn)軟骨修復(fù)，調(diào)節(jié)骨膠原代謝平衡，并且具有一定的量效關(guān)系。徐平等［19］觀察少陽(yáng)生骨方與鹽酸氨基葡萄糖膠囊對(duì)去分化軟骨細(xì)胞增殖以及Ⅱ型膠原表達(dá)的影響，得出結(jié)論少陽(yáng)生骨方能促進(jìn)去分化軟骨細(xì)胞的增殖、Ⅱ型膠原的表達(dá)，提示少陽(yáng)生骨方能有效保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨。彭麗晨等［20］采用16月齡SD大鼠，連續(xù)給予痛痹顆粒45 d，末次給藥后取血清測(cè)SOD、MDA含量，來探討痛痹顆粒對(duì)大鼠自由基代謝及血液流變性的影響，結(jié)果可見痛痹顆粒治療OA的作用機(jī)制可能與改善機(jī)體血液流變性，清除氧自由基和抗衰老作用有關(guān)。

5　對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖的作用

劉洪波等［21］探討健骨伸筋湯對(duì)大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖與凋亡的影響。采用改良的Hulth法造模，通過免疫組化、原位末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測(cè)軟骨細(xì)胞的增殖與凋亡，結(jié)果見健骨伸筋湯可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞的增殖，還可以抑制軟骨細(xì)胞異常凋亡，從而起到防治OA的作用。楊仁軒等［22］從滑液和骨髓中分離培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs），以龍鱉血清干預(yù)MSCs，觀察不同來源MSCs的標(biāo)記物和炎癥因子的表達(dá)情況，以及向軟骨細(xì)胞分化能力的影響，結(jié)果見龍鱉血清對(duì)SF-MSC和BM-MSC均有抑制細(xì)胞因子釋放，誘導(dǎo)SF-MSC和BM-MSC向軟骨分化的能力。徐揚(yáng)等［23］觀察中藥威靈仙提取物對(duì)KOA軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)活力的影響，采用同Live/Dead染色法測(cè)定人軟骨細(xì)胞活力指數(shù)，TUNEL染色法測(cè)定人軟骨細(xì)胞凋亡指數(shù)，提示威靈仙提取物在合適的質(zhì)量濃度時(shí)能有效提高人軟骨細(xì)胞活力，抑制人軟骨細(xì)胞凋亡，尤以0.1 g/L時(shí)效果最佳。

6　對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的作用

袁長(zhǎng)深等［24］通過觀察丹參加玻璃酸鈉關(guān)節(jié)內(nèi)注射，探討其對(duì)家兔膝關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)效應(yīng)與機(jī)制，造模后，將80只日本大耳白兔隨機(jī)分為A組、B組、C組、D組。給藥4周、8周后處死實(shí)驗(yàn)兔，TUNEL法檢測(cè)軟骨細(xì)胞凋亡率，提示丹參加玻璃酸鈉關(guān)節(jié)內(nèi)注射能明顯降低兔膝關(guān)節(jié)軟骨的細(xì)胞凋亡率，減緩膝關(guān)節(jié)軟骨的退變，對(duì)軟骨起保護(hù)作用。李淑潔等［25］探討牛膝提取物對(duì)碘乙酸鈉（MIA）誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞保護(hù)作用，采用MTT法檢測(cè)各組軟骨細(xì)胞活力，Hoechst33258染色法檢測(cè)各組軟骨細(xì)胞形態(tài)變化，分光光度法檢測(cè)各組軟骨細(xì)胞中Caspase3活性，Western blot分析各組AKT激活狀況及下游靶分子Bax、Bcl-2的表達(dá)，結(jié)果提示牛膝提取物具有保護(hù)MIA誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞作用，通過抑制軟骨細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)，可能與PI3K/AKT信號(hào)通路有關(guān)。楊安群等［26］則探討當(dāng)歸注射液—牛膝總皂苷對(duì)家兔KOA軟骨細(xì)胞凋亡及PI3K/AKT通路的影響，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)軟骨細(xì)胞的凋亡率，應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨PI3K/AKT通路AKT的Thr308表位活化程度，提示當(dāng)歸注射液—牛膝總皂苷可有效減少OA病變過程中軟骨細(xì)胞的凋亡，一定程度改善OA病理，其機(jī)制可能與其干預(yù)家兔早期膝OA軟骨組織PI3K/AKT信號(hào)通路的激活從而提高 AKT的Thr308表位活化程度有關(guān)。劉淼等［27］觀察八味柔肝散對(duì)家兔OA軟骨細(xì)胞凋亡的影響。建模后8周行組織學(xué)觀察Mankin評(píng)分，采用硝酸還原酶法測(cè)定關(guān)節(jié)液NO、iNOS活性，TUNEL檢測(cè)軟骨細(xì)胞的凋亡指數(shù)，結(jié)果提示八味柔肝散可以減輕OA關(guān)節(jié)軟骨的病理改變，降低關(guān)節(jié)液iNOS、NO水平和軟骨細(xì)胞凋亡指數(shù)，抑制OA家兔軟骨細(xì)胞的凋亡，減緩OA病變的發(fā)展。李楠等［28］通過觀察龜鹿二仙膠及其拆方對(duì)SD大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨退變的影響，探討龜鹿二仙膠的配伍機(jī)制，中藥灌胃2、4、8周后放射免疫法檢測(cè)血清雌二醇（E2）、免疫組化檢測(cè)Bax、Bcl-2、IL-1β、MMP-13、Ⅱ型膠原的表達(dá)，結(jié)果見龜鹿配伍人參可提高血清E2水平、抑制關(guān)節(jié)軟骨產(chǎn)生炎癥、促進(jìn)軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原合成；龜鹿配伍枸杞可以抑制軟骨細(xì)胞凋亡。肖龍等［29］觀察筋骨痹痛湯藥物血清對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞Bcl-2、Bax表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響，提示結(jié)論筋骨痹痛湯藥物血清對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡具有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能是通過促進(jìn)Bcl-2表達(dá)和抑制Bax表達(dá)，調(diào)節(jié)Bcl-2與Bax的比例來實(shí)現(xiàn)。戴七一等［30］探討逍遙散降低雌性家兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的可能作用機(jī)制，采用免疫組化法檢測(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡線粒體通路相關(guān)基因的表達(dá)，可見逍遙散可明顯上調(diào)Bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax、Caspase-3與細(xì)胞色素C的表達(dá)，可能是逍遙散降低膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一。

7　對(duì)關(guān)節(jié)軟骨組織形態(tài)學(xué)的影響

從組織病理學(xué)及病理生化的角度，深入研究中藥對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)作用機(jī)制，可以為臨床治療提供確切的依據(jù)。如寧顯明等［31］觀察補(bǔ)腎活血中藥對(duì)腎虛型KOA的治療作用。將雌性SD大鼠54只，造模成功后，隨機(jī)分為：中藥組，雙醋瑞因組，模型組，每組18只。分別在用藥后2、4、8周各組隨機(jī)處死動(dòng)物6只，行動(dòng)物軟骨的組織病理學(xué)觀察、血清E2水平檢測(cè)。結(jié)果中藥組在軟骨厚度及軟骨同源細(xì)胞數(shù)方面都優(yōu)于模型組與雙醋瑞因組，可見補(bǔ)腎活血中藥有一定修復(fù)軟骨和延緩KOA軟骨退變的作用。原巧寧等［32］通過對(duì)大鼠KOA模型的關(guān)節(jié)軟骨病理學(xué)形態(tài)觀察，研究獨(dú)活寄生湯對(duì)OA的治療效果，通過制作病理切片，采用OA軟骨病理變化Mankin評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)關(guān)節(jié)軟骨病理改變，結(jié)果提示獨(dú)活寄生湯能延緩關(guān)節(jié)軟骨的退行性病變，高劑量與托珠單抗注射液作用接近。吳權(quán)等［33］根據(jù)中醫(yī)治療OA常用治法，觀察活血、溫經(jīng)及補(bǔ)益肝腎3類中藥對(duì)KOA家兔關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)的影響，同樣采用Mankin軟骨組織學(xué)評(píng)分法進(jìn)行評(píng)分，提示活血、溫經(jīng)及補(bǔ)益肝腎3類中藥均能改善KOA動(dòng)物膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)，達(dá)到保護(hù)軟骨、延緩軟骨退變的目的，但不能阻斷和逆轉(zhuǎn)軟骨退變的進(jìn)程?；钛愔兴幹饕ㄟ^抑制軟骨細(xì)胞分裂增生來保護(hù)軟骨，起效較快；補(bǔ)益肝腎類中藥主要通過抑制軟骨基質(zhì)蛋白多糖分解來保護(hù)軟骨，起效較慢。戚晴雪等［34-35］探討通絡(luò)止痛方在低頻超聲促透下對(duì)大鼠不同程度KOA模型的行為學(xué)、軟骨及滑膜組織形態(tài)學(xué)及血清中軟骨基質(zhì)相關(guān)細(xì)胞因子（CTX）-Ⅱ、COMP及MMP-3的影響，通過Mankin評(píng)分予以評(píng)價(jià)，結(jié)果應(yīng)用低頻超聲促透通絡(luò)止痛方可以有效地減緩大鼠輕、中度KOA的病理進(jìn)展或是減緩軟骨的退行性變，這可能是通過降低血清中CTX-Ⅱ，COMP和MMP-3含量，減緩軟骨基質(zhì)的退變所致，但對(duì)重度KOA軟骨退變的緩解作用并不明顯。

8　小結(jié)與展望

近年來，運(yùn)用中藥復(fù)方及相關(guān)提取物的關(guān)節(jié)軟骨保護(hù)作用在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中不斷得到證實(shí)：中藥能通過調(diào)節(jié)相關(guān)細(xì)胞因子、生物活性分子、蛋白酶表達(dá)及血液循環(huán)等因素改善關(guān)節(jié)炎癥狀，影響軟骨細(xì)胞代謝，防止或延緩關(guān)節(jié)軟骨退變。較既往多為中藥復(fù)方研究相比，近幾年對(duì)單味藥及中藥提取物研究增多，為臨床防治關(guān)節(jié)軟骨破壞提供了更多理論基礎(chǔ)。但目前研究仍存在一些問題：某些補(bǔ)腎類中藥能促進(jìn)軟骨修復(fù)與增殖或抑制軟骨凋亡，但作用機(jī)制尚不十分清楚；中藥對(duì)骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展相關(guān)基因表達(dá)譜的調(diào)控作用越來越多被研究，但很多相關(guān)基因尚不明確；含藥血清成分復(fù)雜，中藥有效成分不太明晰，不利于進(jìn)一步地臨床應(yīng)用；另外，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)軟骨細(xì)胞代謝的研究進(jìn)展及干細(xì)胞在增殖、分化、轉(zhuǎn)分化的研究仍是熱點(diǎn)問題，值得我們密切關(guān)注。

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（本文編輯：高杉，張震之）

The progress of traditional Chinese medicine protection mechanisms of articular cartilage

ZHANG Lei1，2，WANG Zhao-xu3，WU Yuan-hao1，LIU Wei1
（1.The First Affiliated Hospital of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；2.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；3.The Health Service Center of Xiangyang Community of Hangzhou Street of Tianjin Binhai New Area，Tianjin 300451，China）

Through literature review，based on morphology，cytokines，overview of chondrocyte apoptosis and other aspects，this article outlined the mechanism of traditional Chinese medicine for theprotecting articular cartilage.Traditional Chinese medicine in the treatment of arthritis，primarily through reducing damage，delay differentiation and degeneration and promote cartilage repair work，which included:1）inhibit cartilage cell expression of inflammatory cytokines and produce；2）inhibit MMPs expression of articular cartilage；3）promote growth factor expression；4）promote collagen formation；5）promote the articular cartilage cell proliferation；6）inhibition of articular cartilage cell apoptosis，etc.

traditional Chinese medicine；articular cartilage；mechanism

R684

A

1672-1519（2016）05-0316-05

10.11656/j.issn.1672-1519.2016.05.16

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81473635），國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81503506）；天津市高等學(xué)?？萍及l(fā)展基金計(jì)劃項(xiàng)目（20120220）；天津市衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)中醫(yī)中西醫(yī)結(jié)合科研課題項(xiàng)目（2015091）。

張磊（1975-），男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事中醫(yī)內(nèi)科學(xué)臨床及科研工作。

劉維，E-mail：fengshiliuwei@163.com。

2016-02-20）