牛至油對仔豬生產(chǎn)性能、抗體水平及糞便微生物的影響

韓慶功，宋云義，崔艷紅，羅 正，劉保國*

(1.河南科技學(xué)院 動物科學(xué)學(xué)院,河南 新鄉(xiāng) 453003； 2.建明工業(yè)(珠海)有限公司,廣東 珠海 519040)

牛至油對仔豬生產(chǎn)性能、抗體水平及糞便微生物的影響

韓慶功1，宋云義2，崔艷紅1，羅 正2，劉保國1*

(1.河南科技學(xué)院 動物科學(xué)學(xué)院,河南 新鄉(xiāng) 453003； 2.建明工業(yè)(珠海)有限公司,廣東 珠海 519040)

為研究牛至油在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的飼喂效果，選用12頭母豬所產(chǎn)的126頭斷奶仔豬，按窩隨機(jī)分成3組(對照組、牛至油組、抗生素組)，各組仔豬以窩為單位，以每窩為1個重復(fù)組，每組 4個重復(fù)，測定仔豬日糧中添加牛至油對其生產(chǎn)性能、豬瘟抗體水平及糞便微生物的影響。結(jié)果顯示，與對照組、抗生素組相比，牛至油組日增質(zhì)量分別顯著提高18.03%、14.89%，但對照組與抗生素組相比差異不顯著；牛至油組豬瘟抗體水平高于對照組、抗生素組，在38、48、58日齡時，與對照組相比分別提高11.32%(P>0.05)、12.55%(P<0.05)、15.55%(P<0.05)，與抗生素組相比分別提高58.47%(P<0.05)、18.69%(P<0.05)、31.02%(P<0.05)。整體上，添加牛至油組仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量比對照組、抗生素組少，而乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量均比對照組、抗生素組多。以上結(jié)果表明，斷奶仔豬日糧中添加牛至油可以替代抗生素，且具有良好的促生長效果。

牛至油； 仔豬； 生產(chǎn)性能； 抗體； 糞便微生物

近年來，隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖企業(yè)集約化程度越來越高，畜禽群發(fā)疾病的風(fēng)險(xiǎn)越來越大，在配合飼料中添加一定量的抗生素，不僅能預(yù)防畜禽疾病，并能提高畜禽的成活率和飼料轉(zhuǎn)化率。然而，隨著人們對食品安全的重視，抗生素濫用、抗藥性、二重感染、藥物殘留等越來越成為人們關(guān)注的問題。使用抗生素替代物，減少或避免抗生素在生產(chǎn)過程中的使用是目前養(yǎng)殖業(yè)及食品行業(yè)關(guān)注的熱點(diǎn)。

發(fā)達(dá)國家為了在不用抗生素后維持動物一定的生長速度及抗病力，生產(chǎn)安全衛(wèi)生的畜產(chǎn)品，選擇使用牛至油產(chǎn)品作為抗生素的替代品。牛至油是從植物牛至中提取的一種純天然、新型廣譜抗菌藥物添加劑。牛至成分包含約50種不同化合物，其中 30 多種是抗菌化合物。牛至油主要由百里香素、t-萜品烯、百里香酚及香芹酚等成分組成，其中起主要作用的是香芹酚(香荊芥酚)和百里香酚[1]。在國內(nèi)由于人們?nèi)狈εＶ劣偷恼J(rèn)識，或化工合成的牛至油產(chǎn)品質(zhì)量低劣，牛至油在生產(chǎn)中的應(yīng)用較少。為此，通過在飼料中添加抗生素替代物牛至油，探討其對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、抗體水平和腸道菌群的影響，以期為在養(yǎng)豬生產(chǎn)過程中合理利用牛至油替代抗生素提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)及時間 試驗(yàn)于2014年9月15日—10月20日在河南省鶴壁市河南誼發(fā)牧業(yè)有限公司種豬場進(jìn)行。

1.1.2 試驗(yàn)材料 植物精油至多興(主要成分為牛至油)由建明工業(yè)(珠海)有限公司生產(chǎn)；恩拉霉素由浙江海正藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；硫酸黏桿菌素由河北遠(yuǎn)征禾木藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；供試飼料由河南誼發(fā)牧業(yè)有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 試驗(yàn)豬群及分組 試驗(yàn)選擇12頭胎次為 4～6 胎、分娩期相差 3 d左右的長×大二元母豬， 隨機(jī)分成3個處理組(對照組、牛至油組、抗生素組)，由河南誼發(fā)牧業(yè)有限公司豬場提供28日齡斷奶仔豬共126頭。各處理組仔豬以窩為單位，每窩為1個重復(fù)小組，每個處理組 4個重復(fù)，每圈豬自然成群，不再調(diào)圈，防止調(diào)圈的應(yīng)激，采取同舍飼養(yǎng)，自由采食，全自動飲水器供水，各分組室內(nèi)均勻分布。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 空白對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，牛至油組在基礎(chǔ)日糧中添加植物精油至多興(300 g/t)，抗生素組在基礎(chǔ)日糧中添加硫酸黏桿菌素(10 mg/kg)+恩拉霉素(10 mg/kg)。

1.2.2 測定指標(biāo) 健康指標(biāo)：腹瀉率、毛色、精神狀態(tài)、死淘率。死亡豬只稱質(zhì)量記錄，便于進(jìn)行料重比統(tǒng)計(jì)，要求每天詳細(xì)記錄。

生產(chǎn)性能指標(biāo)：試驗(yàn)開始、結(jié)束時分別空腹稱質(zhì)量，計(jì)算日采食量以及料重比。

免疫指標(biāo)：豬瘟抗體水平。從斷奶到保育結(jié)束，試驗(yàn)正式開始時采血，以后每10 d采血1次。每組固定同一豬只采樣。用注射器進(jìn)行前腔靜脈采血3 mL左右，在室溫待血清自然析出后，倒入1.5 mL離心管中，3 000 r/min 離心 15 min，離心后的血清分裝于1.5 mL離心管中，編號，保存于-20 ℃冰箱待檢。采用IDEXX CSFV抗體試劑盒檢測。

糞便微生物：每組每隔10 d采樣1次，每次每組采集8頭豬的新鮮糞便，低溫保存。在無菌工作臺中，用電子天平稱取糞便樣品0.5 g，將其放于無菌小燒杯中，隨后加入50 mL無菌生理鹽水，用無菌玻璃棒攪拌混勻。用移液槍取0.5 mL樣品液加入到4.5 mL無菌生理鹽水中，混勻，依次稀釋至10-2或10-3后使用。主要測定乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌含量，培養(yǎng)基主要選用乳酸桿菌選擇培養(yǎng)基、雙歧桿菌BS培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂、膽硫乳瓊脂、營養(yǎng)瓊脂等。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

測定結(jié)果采用SAS 8.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛至油對斷奶仔豬健康的影響

試驗(yàn)豬場現(xiàn)代化程度高，飼養(yǎng)管理規(guī)范，由于環(huán)境控制及疾病凈化較好，整個豬群精神狀態(tài)良好，試驗(yàn)過程中無流行性傳染病發(fā)生，對照組零星出現(xiàn)了疾病現(xiàn)象，而牛至油組及抗生素組無，說明牛至油、抗生素對疾病有一定的抵抗效果。

2.2 牛至油對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

由表1可以看出，與對照組、抗生素組相比，牛至油組日增質(zhì)量分別顯著提高了18.03%、14.89%，抗生素與對照組差異不顯著；各組間日采食量差異均不顯著；與對照組相比，牛至油組、抗生素組料重比分別顯著降低了7.51%、6.70%。表明，牛至油和抗生素對斷奶仔豬有一定的促生長作用，牛至油可以作為抗生素的替代品，具有較好的飼養(yǎng)效果。

表1 牛至油對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

注:同列數(shù)據(jù)標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下同。

2.3 牛至油對仔豬豬瘟抗體水平的影響

由表2可見，試驗(yàn)開始即豬只28日齡時第1次采血進(jìn)行抗體水平檢測，牛至油組、抗生素組抗體平均水平差異不顯著。與對照組、抗生素組相比，38日齡時，牛至油組平均抗體水平分別提高了11.32%(P>0.05)、58.47%(P<0.05)；48日齡時，牛至油組的平均抗體水平分別提高了12.55%(P<0.05)、18.69%(P<0.05)，抗生素組和對照組之間差異不顯著；58日齡時，與對照組、抗生素組相比，牛至油組抗體水平分別提高了15.55% (P<0.05)、31.02% (P<0.05)。說明牛至油能夠提高豬只的免疫能力，使抗體水平維持較長的時間，可減少免疫的次數(shù)。

表2 牛至油對仔豬豬瘟抗體水平的影響

2.4 牛至油對仔豬糞便微生物數(shù)量的影響

整個試驗(yàn)期間，從豬糞便中沒有檢測到沙門氏菌。在試驗(yàn)開始即28日齡，培養(yǎng)至第5小時，對照組、牛至油組與抗生素組均檢測到產(chǎn)氣莢膜梭菌；38日齡和48日齡，在培養(yǎng)第2小時、3 小時、4 小時和5 小時，3組均檢測到產(chǎn)氣莢膜梭菌；58日齡，只有抗生素組在培養(yǎng)至第4 小時檢測到了產(chǎn)氣莢膜梭菌，但隨飼喂時間的延長，每組產(chǎn)氣莢膜梭菌的含量有逐漸減少的趨勢。

由表3可以看出，細(xì)菌總數(shù)在試驗(yàn)開始28日齡時，3組之間差異不顯著；38日齡時，與對照組相比，牛至油組、抗生素組細(xì)菌總數(shù)顯著增加，但牛至油組、抗生素組之間差異不顯著；48日齡時，3組之間差異不顯著；58日齡時牛至油組、抗生素組與對照組相比，細(xì)菌總數(shù)顯著增加。在豬只28日齡時，牛至油組與對照組相比，大腸桿菌數(shù)量顯著降低，但牛至油組與抗生素組之間、抗生素組與對照組之間差異均不顯著； 38日齡時， 牛至油組與抗生素組之間差異顯著，牛至油組、抗生素組與對照組之間差異均不顯著，牛至油組與對照組相比大腸桿菌數(shù)量減少32.78%；48日齡時，牛至油組與對照組和抗生素組之間差異均顯著，與對照組相比，大腸桿菌數(shù)量顯著減少44.33%；58日齡時，各組豬只的大腸桿菌數(shù)量差異不顯著，與對照組相比，牛至油組大腸桿菌數(shù)量減少21.51%。

表3 牛至油對仔豬糞便微生物數(shù)量的影響 ×104 cfu/mL

注：同行數(shù)據(jù)標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

整個試驗(yàn)期間，牛至油組豬只糞便中的有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量明顯高于對照組和抗生素組，38日齡時牛至油組乳酸桿菌的數(shù)量是對照組的2.54倍(P<0.05)，48日齡時為對照組的1.06倍(P>0.05)，58日齡時為對照組的1.91倍(P>0.05)；牛至油組雙歧桿菌的數(shù)量隨著豬只日齡的增加而增加，38日齡、48日齡、58日齡時分別是對照組的1.51倍(P>0.05)、1.30倍(P>0.05)、1.98倍(P>0.05)。說明日糧中添加牛至油能夠在一定程度上抑制腸道病原菌的增殖，促進(jìn)有益菌的定植。

3 結(jié)論與討論

牛至油是我國農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)使用的飼料藥物添加劑之一，也是我國批準(zhǔn)應(yīng)用的唯一植物源的安全、高效、綠色、無配伍禁忌的較高純天然活性成分的中藥添加劑。牛至油能防治禽畜胃腸道細(xì)菌病，其芳香氣味能直接刺激消化道及感受器，促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞更新脫落，腸道保持健康狀態(tài)，減少病原微生物的附著，具有提高食欲和促進(jìn)消化酶分泌的作用，從而增加體質(zhì)量和提高飼料利用率[2]。牛至油在防治禽畜斷奶后腹瀉，控制其斷奶窩質(zhì)量、采食量、日增質(zhì)量、飼料轉(zhuǎn)化率、生產(chǎn)性能方面均有明顯效果，并可作為禽畜的非藥物生長促進(jìn)劑，且無明顯毒副反應(yīng)。

3.1 植物精油的促生長作用

牛至油特有的芳香氣味可刺激動物的食欲，通過信息反饋系統(tǒng)有效激活消化酶的活性，使食糜的黏稠度發(fā)生變化，促進(jìn)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)充分吸收。牛至油中含量最高的香芹酚和百里香酚對腸黏膜成熟腔上皮細(xì)胞有活性效應(yīng)，能增加腸腔容量和腸絨毛的絨毛高度與隱窩深度的比例。較大的絨毛能夠確保營養(yǎng)物質(zhì)和電解質(zhì)有更多的吸收面積，抵抗腸絨毛萎縮和防止消化不良及吸收障礙。加速腸絨毛表面成熟腔上皮細(xì)胞的更新率，減少病原體對腔上皮細(xì)胞的感染和提高營養(yǎng)吸收能力，從而具有促進(jìn)動物生長發(fā)育的作用[3-5]。

周曉容等[6]在生長豬日糧中按100 g/t的劑量添加10%牛至油預(yù)混劑，結(jié)果表明，其具有改善豬生產(chǎn)性能和提高養(yǎng)分表觀消化率的趨勢，可降低單位增重飼料成本。陳如水等[7]研究在斷奶仔豬日糧中使用發(fā)酵豆粕替代普通豆粕并添加植物精油對斷奶仔豬生長性能的影響，結(jié)果表明，日糧中添加發(fā)酵豆粕和植物精油，仔豬末質(zhì)量和平均日增質(zhì)量分別提高 14.81%和 19.51%，平均日采食量提高6.84%，料肉比、單位增重成本和腹瀉率分別降低10.71%、7.67%、50.67%。周曉情等[8]研究表明，在 20～40 kg小豬階段，添加小肽 + 牛至油可以提高生長性能、飼料消化率。本試驗(yàn)在斷奶仔豬日糧中添加牛至油，其日增質(zhì)量和料重比均高于對照組，飼料利用效率明顯優(yōu)于對照組，與前人研究報(bào)道相似。說明日糧中添加牛至油具有改善、提高飼料利用效率的功效。

3.2 植物精油對免疫功能的影響

仔豬獲得免疫保護(hù)主要來自2個方面:一是由母乳獲得的被動免疫保護(hù)；二是在自然狀態(tài)下，由仔豬自身發(fā)育而獲得的主動免疫保護(hù)。仔豬斷奶后由于缺乏母源抗體的保護(hù)，只能依靠自身的免疫系統(tǒng)。劉猛[9]通過在日糧中添加植物精油后，檢測仔豬血液中血清總蛋白(TP)含量、血清白蛋白(ALB)含量、免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM 含量發(fā)現(xiàn)，總蛋白和白蛋白的含量增加較多，IgG 的含量也有所增加，IgM 和 IgA 的含量相對增加最少，但是差異均達(dá)到了顯著水平，植物精油對于仔豬提高自身的免疫功能具有增強(qiáng)作用。王亮等[10]研究4 種抗生素替代產(chǎn)品(牛至油提取物、苦木甘草提取物、植物精油復(fù)合物和抗菌肽)對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血液生化及免疫性能的影響，結(jié)果表明，牛至油提取物的作用效果最佳，使仔豬平均日增質(zhì)量增加21.55%，平均日采食量增加2.97%，降低料重比，可以有效改善仔豬腹瀉，腹瀉率降低 26.42%。對仔豬血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的測定結(jié)果表明,幾種替代品均能夠促進(jìn)仔豬機(jī)體蛋白質(zhì)沉積，提高仔豬的生長性能和血清免疫球蛋白含量，但其中以牛至油提取物的作用效果最佳。本試驗(yàn)通過在飼料中添加牛至油后，針對仔豬主要疫病之一豬瘟抗體水平變化進(jìn)行了檢測，試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，添加牛至油組豬瘟抗體水平提高，且抗體比較整齊，具有良好的保護(hù)率，說明其具有一定的增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答功能，能有效提高抗體水平和保護(hù)率。

3.3 植物精油對腸道微生物的影響

牛至油的抗菌作用主要通過對細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的變性和凝固來實(shí)現(xiàn)，其活性成分具有很強(qiáng)的表面活性和脂溶性，能迅速穿透致病微生物細(xì)胞膜，使其細(xì)胞成分滲透，造成致病微生物水分失衡而導(dǎo)致死亡。牛至油中的有效抗菌成分是酚類及其合成前體、菇醇及菇烯等。

仔豬斷奶后由于環(huán)境、飼料、溫度、營養(yǎng)等原因，消化功能容易受到應(yīng)激紊亂，引發(fā)腸道微生物區(qū)系平衡失調(diào)，導(dǎo)致腸道有益菌活性降低，條件性致病菌數(shù)量增加，從而誘發(fā)仔豬發(fā)生腹瀉造成仔豬死亡。相關(guān)研究表明，植物精油能有效抑制大腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、梭菌等有害菌的繁殖，促進(jìn)胃腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌、乳鏈球菌、擬桿菌、消化球菌等有益菌的增殖，從而調(diào)整仔豬胃腸道內(nèi)微生物區(qū)系平衡，起到防腹瀉的作用。王新偉等[11]采用紙片擴(kuò)散法以及雙倍稀釋法研究牛至油、香芹酚、檸檬醛和肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果、最小抑菌濃度(CMIC)和最小殺菌濃度(CMBC)，結(jié)果表明，牛至油、香芹酚、檸檬醛和肉桂醛對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有明顯的抑制作用。抑菌效力表現(xiàn)為肉桂醛>香芹酚>牛至油>檸檬醛。曹建國等[12]發(fā)現(xiàn)，用含10%牛至油預(yù)混劑1 000 mg/kg的飼糧連續(xù)飼喂仔豬30 d，試驗(yàn)組與對照組相比，空腸中乳酸桿菌數(shù)量增加，雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量變化不顯著，盲腸中雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量增加，大腸桿菌數(shù)量下降。湯法銀等[13]研究牛至油與小檗堿等5種藥物聯(lián)用對12株產(chǎn)ESBLs雞大腸桿菌和標(biāo)準(zhǔn)菌的部分抑菌濃度(FIC)指數(shù)，分析牛至油與小檗堿等5種藥物間的相互作用，結(jié)果表明，12株產(chǎn)ESBLs雞大腸桿菌對牛至油、小檗堿敏感，對其余4種抗菌藥均有不同程度的耐藥性；小檗堿與牛至油聯(lián)用均表現(xiàn)為協(xié)同作用。本試驗(yàn)通過對糞便中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌的檢測表明，添加牛至油后糞便中大腸桿菌數(shù)量較對照組降低，有益菌乳酸桿菌、雙歧桿菌的數(shù)量增加。說明添加牛至油后可以改善仔豬腸道菌群關(guān)系，提高有益菌數(shù)量，減少斷奶仔豬發(fā)生腹瀉的概率。

目前，對于牛至油，已較廣泛地在豬、家禽、反芻動物、水產(chǎn)動物上進(jìn)行了臨床應(yīng)用研究。本試驗(yàn)通過在斷奶仔豬日糧中添加300 g/t的牛至油發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，斷奶仔豬日增質(zhì)量提高了18.03%，豬瘟抗體水平在38、48、58日齡時分別提高了11.32%、12.55%、15.55%；糞便中的有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌明顯高于對照組和抗生素組。表明飼料中添加牛至油具有促進(jìn)動物生長、提高機(jī)體免疫應(yīng)答、改善腸道菌群關(guān)系等作用。因此，牛至油作為一種新型的綠色飼料添加劑，在動物生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

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Effects of Oregano Oil on the Performance,Serum Antibody and Fecal Microbe of Piglet

HAN Qinggong1，SONG Yunyi2，CUI Yanhong1，LUO Zheng2，LIU Baoguo1*

(1.College of Animal Science and Veterinary Medicine，Henan Institute of Science and Technology， Xinxiang 453003,China; 2.Kemin Industries Inc.Zhuhai，Zhuhai 519040,China)

To study the effect of oregano oil on pig production,126 weaned piglets produced by 12 sows were selected and randomly divided into 3 groups according to the nest(control group,oregano oil group,antibiotics group).Each group had 4 replicates(one litter as 1 replicate).The effects of oregano oil in piglet rations on growth performance,swine plague antibody level and fecal microorganism were tested.The results showed that the day weight gain of oregano oil group significantly incresed by 18.03%,14.89% compared to the control group and antibiotic group,respectively.There was no significant difference between control group and antibiotics group.The swine plague antibody level of oregano oil group was better than control group,antibiotics group,which respectively increased by 11.32%(P>0.05),12.55%(P<0.05),15.55%(P<0.05) compared with control group and increased by 58.47%(P<0.05),18.69%(P<0.05),31.02%(P<0.05) compared with antibiotics group at 38,48,58 days of age.As a whole,theE.colicontents in feces of piglets of the oregano oil group were less than control group,antibiotic group,and the numbers of lactobacillus and bifidobacterium were more than antibiotics group,control group.The above results showed that oregano oil could replace the antibiotics and had good growth promoting effects on the weaned piglets.

oregano oil; piglet; growth performance; antibody; fecal microorganism

2015-12-23

河南科技學(xué)院校企合作項(xiàng)目(20603061)

韓慶功(1976-)，男，河南汝州人，講師，碩士，主要從事動物臨床疾病的診斷與防治研究。 E-mail：hanqinggong7606@163.com

*通訊作者：劉保國(1968-)，男，河南南陽人，副教授，主要從事畜禽規(guī)范化飼養(yǎng)和疾病防治研究。 E-mail:liubaoguo858@126.com

S816.7

A

1004-3268(2016)07-0113-05