肉桂酸鍺對小鼠S180瘤Ki-67表達(dá)的影響

林 波

江蘇護(hù)理職業(yè)學(xué)院 江蘇省淮安市 223300

肉桂酸鍺對小鼠S180瘤Ki-67表達(dá)的影響

林 波

江蘇護(hù)理職業(yè)學(xué)院 江蘇省淮安市 223300

目的：探討肉桂酸鍺對小鼠S180瘤細(xì)胞增值活性的影響。方法：建立小鼠S180移植瘤模型，應(yīng)用肉桂酸鍺灌胃給藥后，通過免疫組織化學(xué)觀察腫瘤細(xì)胞的Ki-67的表達(dá)情況。結(jié)果：觀察肉桂酸鍺各劑量組瘤細(xì)胞較NS組變化明顯，肉桂酸鍺高、中、低劑量組陽性表達(dá)率分別為70%、60%、70%，CTX組為60%，均低于NS組（90%）與NS組比較明顯降低（P＜0.05）。結(jié)論：肉桂酸鍺能明顯抑制S180移植瘤的Ki-67的表達(dá)。

肉桂酸鍺；增值活性；Ki-67

1 實驗材料和方法

荷瘤小鼠模型的建立 取傳代接種后7-8天生長良好的S180腹水瘤源小鼠,無菌條件下從腹腔抽出瘤液（經(jīng)臺盼藍(lán)染色法檢驗瘤細(xì)胞活性>95%）,用滅菌生理鹽水調(diào)整瘤細(xì)胞數(shù)至4.0X107/ml,每鼠右前腋皮下接種0.2ml瘤細(xì)胞懸液，形成實體瘤。將接種了S180瘤的小鼠隨機分為5組，每組10只，分別為生理鹽水陰性對照組（NS組）、環(huán)磷酰胺陽性對照組（CTX組)（2.5mg/ ml）和肉桂酸鍺實驗組（低、中、高劑量組），其中低劑量組為0.1 mg/ml、中劑量組為0.2 mg/ml、高劑量組為0.4 mg/ml。接種次日同時灌胃給藥，給藥量 0.2ml/20g，每日給藥一次，連續(xù)10日，停藥次日斷椎處死，解剖剝離皮下瘤體。

2 實驗結(jié)果判定

2.1 染色結(jié)果評定標(biāo)準(zhǔn)

Ki-67陽性表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核。對免疫組化結(jié)果，采用半定量計分法判定，即根據(jù)陽性腫瘤細(xì)胞所占比例和染色強度進(jìn)行綜合評分。雙人雙盲法觀察切片，拍照留取典型免疫組化照片。每個標(biāo)本切片中選高倍（40×10）視野5個，以該視野內(nèi)陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的均值作為該標(biāo)本的陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。

2.2 染色評定結(jié)果

Ki-67免疫組化標(biāo)記結(jié)果顯示，NS組陽性率最高，達(dá)90%，CTX組60%，肉桂酸鍺實驗組陽性表達(dá)率分別為70%、60%、70%，與NS組比較明顯降低（P<0.05）。（見表1）。

表1：各組瘤組織中Ki-67表達(dá)的比較

3 討論

1983年，Gerdes等發(fā)現(xiàn)在增殖細(xì)胞中有一種特殊的核抗原表達(dá),且此種抗原在細(xì)胞分裂期表達(dá)增加,于M期達(dá)高峰, 而度過分裂周期后迅速下降，這就是Ki-67。研究表明,Ki-67 能夠可靠而迅速地反映惡性腫瘤細(xì)胞的增殖率, 其表達(dá)的高低對評價多種惡性腫瘤細(xì)胞的增殖狀態(tài)、生物學(xué)行為都具有重要意義 。邱胡越等[1]在對ER陽性且HER-2陰性乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，Ki-67在該種腫瘤復(fù)發(fā)組的陽性率較高，預(yù)后差。而非復(fù)發(fā)組的陽性率較低，說明Ki-67的表達(dá)與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān)。龐旭峰[2]報道肝細(xì)胞癌P53和Ki-67蛋白表達(dá)與肝切除術(shù)后預(yù)后關(guān)系密切，有助于肝癌術(shù)后預(yù)后的判斷。癌基因的檢測及增殖細(xì)胞核抗原的檢測對判斷該腫瘤生物學(xué)行為有意義。目前已成為評價細(xì)胞增殖活性的特異性指標(biāo)。

本實驗應(yīng)用免疫組化S-P法，對Ki-67蛋白進(jìn)行免疫組化標(biāo)記，檢測其與各實驗組腫瘤組織細(xì)胞增殖情況的關(guān)系。結(jié)果顯示，肉桂酸鍺高、中、低劑量組Ki-67表達(dá)率分別為70%，60%，70%，與NS組比較，具有顯著性差異（P<0.05）。說明肉桂酸鍺可能通過抑制腫瘤細(xì)胞的分裂而起到抑制腫瘤生長的作用。

[1]胡越，賈衛(wèi)娟，譚翠，顧然，楊雅平，劉鳳桃，蘇逢錫.Ki-67、PgR在ER陽性且HER-2陰性乳腺癌Luminal分型中的意義[J].嶺南現(xiàn)代臨床外科,2016(02).

[2]龐旭峰.肝細(xì)胞癌P53和Ki-67蛋白表達(dá)與肝切除術(shù)后預(yù)后的關(guān)系[D].青島：青島大學(xué),2012.

[3]高紹儀.氯基酸堵氧化物的藥物活性[J].世界醫(yī)學(xué)信息(有機鍺專輯),1990:47-54.