補(bǔ)充黑木耳多糖和運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂血癥大鼠血脂代謝的影響

孫 穎，孟昭琴,魏建華

血脂是指血漿中的中性脂肪(如甘油三酯、膽固醇)和類脂類物質(zhì)(如磷脂、糖脂、固醇、類固醇)的總稱，是生命細(xì)胞基礎(chǔ)代謝的必需物質(zhì)。高脂血癥是指由某些原因引起的脂肪代謝紊亂導(dǎo)致血漿中脂質(zhì)水平高于正常的一種病癥，一般有高膽固醇癥、高低密度脂蛋白癥、低高密度脂蛋白癥、高甘油三酯癥和混合型高脂血癥幾種形式。高脂血癥與人體的多種病癥的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系，故高血脂癥也被稱為“多病之源”。它能引起動(dòng)脈粥樣硬化，損傷心腦血管，導(dǎo)致一系列病癥的發(fā)生，如冠心病、腦中風(fēng)、高血壓、糖尿病等。這些疾病治愈率低，致殘致死率高。高脂血癥的發(fā)病人口在逐年不斷增加，其并發(fā)癥的危害也日益增大，世界各國(guó)對(duì)高脂血癥的防治都不遺余力，各種診療手段也不斷產(chǎn)生，未來對(duì)高脂血癥的主要研究方向是綠色健康療法。現(xiàn)階段的研究方向主要是飲食療法和運(yùn)動(dòng)干預(yù)。筆者也是順應(yīng)這一趨勢(shì)，將黑木耳多糖和運(yùn)動(dòng)干預(yù)進(jìn)行有機(jī)的結(jié)合，為高脂血癥進(jìn)行綠色治療尋找途徑，希望獲得更好的治療方法。

黑木耳多糖是從黑木耳中提取的多糖成分，具有降低血脂、膽固醇、血液粘度，抗血栓形成，降低血糖，抗糖尿病以及降低脂褐質(zhì)含量等功效。黑木耳對(duì)人體無毒副作用，是一種重要的藥食兼用真菌。而長(zhǎng)期有規(guī)律的健身運(yùn)動(dòng)對(duì)血脂有明顯的調(diào)節(jié)作用[1]。有研究表明：中等強(qiáng)度、長(zhǎng)時(shí)間周期性的有氧運(yùn)動(dòng)是一種非常有效的非藥物治療手段。認(rèn)為改善脂代謝所需運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度應(yīng)低于改善心肺功能的強(qiáng)度，以40%～60%最大攝氧量或60%～70%最大心率運(yùn)動(dòng)，對(duì)高脂血癥的治療效果顯著；還有部分研究表明：高脂血癥作為一種疾病，病人不宜進(jìn)行強(qiáng)度較大的運(yùn)動(dòng)，應(yīng)當(dāng)以散步、慢跑等低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)為主，以保證身體的安全性。

本研究在歸納前人研究成果的基礎(chǔ)上，制定60分鐘游泳運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)。值得注意的是，運(yùn)動(dòng)鍛煉雖然可以降低高血脂，但他們的血脂水平仍高于正常值，所以在開展運(yùn)動(dòng)治療的同時(shí)，應(yīng)結(jié)合采用其他治療手段(如飲食治療、藥物治療)，才能取得更好的療效。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

健康成年雄性SD大鼠60只，體重 300±20g，清潔級(jí)。徐州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1高脂飼料的制備高脂飼料的配制：10%豬油+5%膽固醇+2%膽酸鈉+83%基礎(chǔ)飼料，由徐州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心加工。

1.2.2動(dòng)物模型的建立及分組選取健康雄性SD大鼠60只，體重 300±20g，于室內(nèi)飼養(yǎng)室飼養(yǎng)，分籠飼養(yǎng)，并配有不銹鋼罩、玻璃吸水瓶和不銹鋼吸管，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)齒類動(dòng)物固體飼料喂養(yǎng)，自由飲食。自然采光，通風(fēng)條件良好，動(dòng)物室溫18～25℃，相對(duì)濕度50～55%。適應(yīng)環(huán)境一周后，將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(H組)(10只)和模型組(50只)。H組采取正常飲食，模型組喂養(yǎng)高脂飼料，充足給料，喂養(yǎng)2周，末次喂養(yǎng)后禁食12小時(shí)。大鼠尾動(dòng)脈取血，檢測(cè)TC、TG的濃度。經(jīng)分析后發(fā)現(xiàn)，模型組TC、TG比H組顯著升高，差異非常顯著(P<0.01)，表示造模成功。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為4組，分別為高脂對(duì)照組(G)、服用黑木耳多糖組(F)、運(yùn)動(dòng)組(D)、服用黑木耳多糖+運(yùn)動(dòng)組(E)(如表1)。G、F、D、E各組大鼠的TC、TG水平組間不具有差異性。

表1 大鼠實(shí)驗(yàn)分組(每組10只)

1.2.3服用黑木耳多糖及運(yùn)動(dòng)方案分組后，H組飼喂基礎(chǔ)飼料；G、F、D、E組飼喂高脂飼料；F、E組每只大鼠灌服黑木耳多糖100mg/kg.d，灌服的黑木耳多糖是黑木耳多糖與生理鹽水的溶液，生理鹽水0.01g/mL，其余各組大鼠灌服等量的生理鹽水。D、E組進(jìn)行游泳運(yùn)動(dòng)。水溫30℃～32℃，游泳池為100cm×60cm×80cm無毒白色塑料桶。第三周訓(xùn)練逐漸增加運(yùn)動(dòng)量(見表2)；第四周后保持60分鐘強(qiáng)度訓(xùn)練。訓(xùn)練時(shí)間為10周，每周訓(xùn)練6天，周日休息。每周二測(cè)量一次體重。

表2 第三周適應(yīng)運(yùn)動(dòng)遞增表

1.2.4測(cè)試指標(biāo)實(shí)驗(yàn)第12周結(jié)束后，大鼠禁食12小時(shí)，各組大鼠用20%的氨基甲酸乙酯5mL/kg(約2mL/只)腹腔麻醉，采用腹主動(dòng)脈取血、離心、取血清，測(cè)定TC、TG、HDL、LDL濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

進(jìn)行方差齊性和正態(tài)分布檢驗(yàn)；組間比較采用單因素方差分析；采用雙因素方差分析運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖兩個(gè)因素對(duì)各指標(biāo)的影響。

2 研究結(jié)果

2.1 大鼠體重的變化情況

服用黑木耳多糖可以使大鼠體重顯著增加。其主要原因是由于黑木耳多糖含有大量的多糖成分，能調(diào)節(jié)血脂，可以有效緩解高脂血癥帶給機(jī)體的損害，另外黑木耳多糖還有潤(rùn)肺益胃、潤(rùn)燥利腸的作用，增強(qiáng)大鼠的胃口，使其體重增加；運(yùn)動(dòng)可以增加大鼠的能量消耗，減少脂肪含量。研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期有規(guī)律的有氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以降低和控制體重。各組大鼠的體重總體趨勢(shì)都是在不斷增加的，其中F組大鼠體重增長(zhǎng)最快，G組次之，E組增長(zhǎng)最低。其中，G組的體重大于H組體重，說明同等條件下高脂膳食可以使大鼠的體重增加；高脂組之間比較，F(xiàn)組>G組>D組>E組，說明單獨(dú)服用黑木耳多糖對(duì)大鼠的體重具有明顯的增加功效。在前5周時(shí)D組大鼠體重增長(zhǎng)迅速，其原因可能是短時(shí)間運(yùn)動(dòng)使機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，刺激大鼠食量增加，從而導(dǎo)致體重增長(zhǎng)；當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)動(dòng)后，大鼠體重的增長(zhǎng)量逐漸降低。各組大鼠前3周體重增長(zhǎng)迅速，主要原因是高脂膳食刺激了大鼠的攝食量，使其體重增長(zhǎng)迅速；從第4周開始，增長(zhǎng)速度開始放慢，原因可能是高脂膳食過于油膩，長(zhǎng)期飼喂影響了大鼠食量。各組施加干預(yù)條件，也影響了大鼠體重的變化。

2.2 大鼠血脂指標(biāo)變化

如表3所示，與G組相比，其他各組大鼠TC均有所降低，其中F組和E組具有非常顯著性差異(P<0.01)，D組具有顯著差異(P<0.05)； 通過雙因素方差分析發(fā)現(xiàn)，服用黑木耳多糖主效應(yīng)對(duì)大鼠TC影響非常顯著(P<0.01)，運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)不顯著(P>0.05)，運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖對(duì)TC的交互作用不顯著(P>0.05)。

表3 各組大鼠血脂指標(biāo)變化情況(n=9)

注：與G相比*P<0.05，**P<0.01。

與G組相比，D組和F組大鼠TG水平明顯降低，差異具有非常顯著性(P<0.01)，其中F組效果最顯著，E組差異具有顯著性(P<0.05)。

通過雙因素方差分析發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)對(duì)大鼠TG影響顯著(P<0.05)；服黑木耳多糖主效應(yīng)不顯著(P>0.05)；運(yùn)動(dòng)和服黑木耳多糖對(duì)TG的交互作用非常顯著(P<0.01)。

與G組相比，E組LDL水平明顯降低，具有非常顯著性差異(P<0.01)，F(xiàn)組有顯著性差異(P<0.05)，D有所降低但差異無顯著性(P>0.05)。服用黑木耳多糖主效應(yīng)對(duì)大鼠LDL影響非常顯著(P<0.01)，運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)不顯著(P>0.05)，運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖對(duì)LDL的交互作用不顯著(P>0.05)。

與G組相比，其他各組大鼠HDL都明顯升高，具有非常顯著性差異(P<0.01)，D組、F組和E組差距很小。服用黑木耳多糖主效應(yīng)和運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)對(duì)大鼠HDL影響都非常顯著(P<0.01)；運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖對(duì)HDL的交互作用也非常顯著(P<0.01)。

3 討論

3.1 運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖對(duì)大鼠TC、TG水平的影響

高TC與動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生、冠心病(CHD)發(fā)病率及病死率有直接的關(guān)系。過高的TC會(huì)在血管壁上沉積，形成斑塊，斑塊不斷增大最終破裂成血凝塊，形成AS。據(jù)缺血性心臟病長(zhǎng)期研究結(jié)果顯示：在不同濃度膽固醇的心肌梗死或不穩(wěn)定性心絞痛患者中,TC降低可以使各種冠心病事件的發(fā)生率明顯減少。TC水平每增加1%，冠心病患病幾率增加2%～3%[2]；黑木耳多糖及其提取物對(duì)降低高脂血癥大鼠TC水平具有顯著療效。于偉等在研究黑木耳多糖對(duì)高脂血癥小鼠的降血脂作用中發(fā)現(xiàn)，黑木耳多糖可以顯著降低高脂血癥小鼠的TC水平，糾正脂質(zhì)代謝異常；周國(guó)華[3]等通過給予高脂血癥模型小鼠不同劑量的黑木耳多糖，證實(shí)了黑木耳多糖對(duì)TC等血脂指標(biāo)具有明顯的調(diào)節(jié)作用。本研究發(fā)現(xiàn)服用黑木耳多糖對(duì)高脂血癥大鼠的TC水平具有明顯的降低作用，表明了黑木耳多糖對(duì)降低高脂血癥大鼠TC具有顯著療效。

中低強(qiáng)度和中等強(qiáng)度的有氧運(yùn)動(dòng)可以有效地降低大鼠TC水平。史亞麗[4]等采用有氧游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)中老年高血脂大鼠進(jìn)行研究。每天進(jìn)行120分鐘的游泳運(yùn)動(dòng)，發(fā)現(xiàn)5周的游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠TC水平有影響，但差異不顯著；周東波[5]等運(yùn)用中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)中年男性高血脂癥患者進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示TC水平顯著降低。本研究采用60分鐘游泳運(yùn)動(dòng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，TC顯著降低，說明TC降低水平與運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)度有一定的關(guān)系。

運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖相結(jié)合共同作用，TC水平明顯降低，低于單獨(dú)運(yùn)動(dòng)組，但高于服用黑木耳多糖，原因可能是運(yùn)動(dòng)降低TC的機(jī)制與黑木耳多糖降低TC機(jī)制有一定的沖突，表現(xiàn)出聯(lián)合作用低于單獨(dú)服用黑木耳多糖的療效。通過雙因素方差分析發(fā)現(xiàn)，服用黑木耳多糖主效應(yīng)對(duì)大鼠TC水平的影響非常顯著，運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)不顯著，運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖對(duì)TC的交互作用不顯著。

大量研究證實(shí)，高TG是引起CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。臨床上采用降低TC水平的調(diào)脂藥物對(duì)高脂血癥患者進(jìn)行治療后發(fā)現(xiàn)，TC和LDL明顯下降，但仍有一部分人發(fā)生冠心病和動(dòng)脈粥樣病變。最新又提出了“脂質(zhì)三聯(lián)癥”的新觀點(diǎn)，即TG及LDL水平升高、HDL水平降低，具有更強(qiáng)的致AS作用。

當(dāng)進(jìn)行運(yùn)動(dòng)時(shí)，機(jī)體內(nèi)脂肪在相關(guān)酶的作用下經(jīng)各種途徑氧化分解，為機(jī)體提供能量。在運(yùn)動(dòng)過程中，機(jī)體中的TG參與供能，這就為運(yùn)動(dòng)的調(diào)脂作用提供了理論基礎(chǔ)。運(yùn)動(dòng)時(shí)供能的脂質(zhì)主要來源于肌肉的TG和血液中的游離脂肪酸，有氧運(yùn)動(dòng)可以使供能脂質(zhì)的需求明顯增加，從而促使TG通過脂蛋白脂肪酶進(jìn)行水解；隨著運(yùn)動(dòng)進(jìn)一步加強(qiáng)，供能的脂質(zhì)動(dòng)員隨之加強(qiáng)，TG加速水解，從而使TG水平降低。朱命祺[6]等通過60分鐘有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)中老年高脂血癥患者進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示TG水平顯著性降低。本研究中60分鐘游泳運(yùn)動(dòng)TG水平明顯降低，證實(shí)了有氧運(yùn)動(dòng)可以降低TG水平的理論，且TG水平的降低與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的相關(guān)性較小。

黑木耳多糖可以有效降低TG水平。本研究結(jié)果顯示，服用黑木耳多糖對(duì)降低TG水平具有顯著性作用；運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖聯(lián)合干預(yù)，TG水平有所降低，但都高于服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)組。原因可能是運(yùn)動(dòng)降低TC的機(jī)制與黑木耳多糖降低TC機(jī)制有沖突，表現(xiàn)出聯(lián)合作用低于單獨(dú)服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)的療效，具體機(jī)制需要進(jìn)一步研究。通過雙因素方差分析發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)主效應(yīng)對(duì)大鼠TG水平的影響顯著，服用黑木耳多糖主效用不顯著，運(yùn)動(dòng)和服用黑木耳多糖對(duì)TG的交互作用非常顯著。

3.2 運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖對(duì)大鼠LDL、HDL水平的影響

隨著LDL水平的增加，缺血性心血管病的發(fā)病的趨勢(shì)TC相類似。LDL是所有血清脂蛋白中最具有致AS性的脂蛋白，粥樣硬化斑塊中的膽固醇主要來自血液循環(huán)中的LDL。LDL通過受體運(yùn)送到細(xì)胞被利用，過剩的膽固醇易在血管內(nèi)皮細(xì)胞堆積，這是致AS的主要病因[7]。

運(yùn)動(dòng)可以降低LDL水平。Lehtonen等人研究同樣表明運(yùn)動(dòng)能降低血液中的TG及LDL的濃度。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，運(yùn)動(dòng)可以減低LDL水平，但不具有顯著性差異。原因可能是高脂膳食增加了大鼠的LDL水平。雖然經(jīng)過運(yùn)動(dòng)，LDL仍然處于一個(gè)較高的水平。

黑木耳多糖可以有效降低LDL水平。本研究結(jié)果也顯示，服用黑木耳多糖對(duì)降低LDL水平具有顯著性作用。

運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖相結(jié)合共同作用，LDL水平顯著降低，都低于服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)組。原因可能是運(yùn)動(dòng)與黑木耳多糖對(duì)降低LDL水平有互補(bǔ)的作用，表現(xiàn)出聯(lián)合作用優(yōu)于單獨(dú)服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)的療效。

HDL被視為具有抗動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白。它能夠自由地出入動(dòng)脈。HDL可將外周組織包括動(dòng)脈壁泡沫細(xì)胞上的膽固醇帶出來，促使細(xì)胞內(nèi)的TC的清除，轉(zhuǎn)運(yùn)給肝臟進(jìn)行分解代謝，使其不易在外周組織和巨噬細(xì)胞內(nèi)蓄積。HDL還具有抗LDL氧化的作用，并能促使損傷內(nèi)皮細(xì)胞的加快修復(fù)，從而降低致AS和CHD的機(jī)率。

運(yùn)動(dòng)可以增加HDL水平與脂蛋白脂肪酶表達(dá)增加有關(guān)[8]。有研究表明，優(yōu)秀運(yùn)動(dòng)員血漿中HDL的含量明顯高于對(duì)照組；Grety等對(duì)10～15歲少兒調(diào)查表明，體育運(yùn)動(dòng)程度與HDL呈正相關(guān)，與TC、TG及LDL呈負(fù)相關(guān)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，運(yùn)動(dòng)可以明顯升高大鼠的HDL水平。

黑木耳多糖可以有效升高HDL水平。本研究結(jié)果顯示，服用黑木耳多糖對(duì)升高HDL水平具有顯著性作用。

運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖相結(jié)合共同作用，HDL水平顯著升高，與服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)組差距不大，表現(xiàn)出聯(lián)合作用與單獨(dú)服用黑木耳多糖和單獨(dú)運(yùn)動(dòng)的療效相仿。

4 結(jié)論

(1)黑木耳多糖、60分鐘游泳運(yùn)動(dòng)和黑木耳多糖加60分鐘游泳運(yùn)動(dòng)都可以有效地降低高脂血癥大鼠的TC、TG、LDL，升高HDL。具有良好的調(diào)節(jié)血脂的功效。

(2)黑木耳多糖對(duì)降低大鼠的TC、TG、LDL，升高HDL的效果更加顯著。說明黑木耳多糖對(duì)調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂的功效最顯著。

[1] 韓春然,徐麗萍.黑木耳多糖的提取、純化及降血脂作用的研究[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào),2007(7):54～58.

[2] 劉榮、欒淑瑩，等.酸性黑木耳多糖降血脂功能的實(shí)驗(yàn)研究[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2016(4)：408～410.

[3] 周國(guó)華,于國(guó)萍.黑木耳多糖降血脂作用的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2005(1):46～48.

[4] 史亞麗,辛?xí)粤?王昌留，等.有氧游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)老年高血脂大鼠脂代謝影響的研究[J].北京體育大學(xué)學(xué)報(bào)，2004(8):1053～1055.

[5] 周東波，郭兆彬，王斌.中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)處方對(duì)中年男性高血脂癥患者血脂的影響[J].運(yùn)動(dòng)，2011(12):44～48.

[6] 朱命祺,王建設(shè),李玉周.有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)中老年高脂血癥患者血脂水平的影響[J].河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2010(4):170～173.

[7] 卞春，王振宇，John Shi，等.黑木耳多糖生物功能的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技，2015(16)：390～394.

[8] 尹紅力，趙鑫，佟麗麗，等.黑木耳多糖體外和體內(nèi)降血脂功能[J].食品科學(xué)，2015(21):221～226.