羅格列酮對早期2型糖尿病腎病的保護(hù)作用及機(jī)制

劉云濤　李建偉　黃　亮　簡　磊

(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院內(nèi)分泌科，湖北　宜昌　443000)

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羅格列酮對早期2型糖尿病腎病的保護(hù)作用及機(jī)制

劉云濤李建偉黃亮簡磊

(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院內(nèi)分泌科，湖北宜昌443000)

〔摘要〕目的探討羅格列酮(RGZ)對早期糖尿病腎病(EDN)的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法55例健康人為對照組(NC組)，115例早期2型糖尿病腎病(T2DN)患者隨機(jī)分為聯(lián)合RGZ組，58例及聯(lián)合格列美脲治療組(GLI組，57例)；測定血清缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)，胰島素樣生長因子(IGF)-1、超氧化物歧化酶(SOD)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、一氧化氮(NO)、尿微量白蛋白(UMA)。治療14 w后觀察EDN患者上述指標(biāo)水平變化。 結(jié)果①治療14 w后兩治療組間空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HBA1c)變化無明顯差異。RGZ組治療后HIF-1α、VEGF 、hs-CRP、IGF-1、UMA顯著降低(P<0.05或P<0.01)；SOD顯著上升(P<0.01)；②GLI組治療后SOD顯著上升(P<0.05)。UMA顯著下降(P<0.05)，但高于RGZ組。結(jié)論RGE對早EDN有保護(hù)作用，其機(jī)制部分與抑制HIF-1α、VEGF 、hs-CRP、IGF-1，抗氧化有關(guān)，與改善糖代謝無關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕羅格列酮;2型糖尿??；糖尿病腎病

第一作者：劉云濤(1978-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事糖尿病及其并發(fā)癥的研究。

早期糖尿病腎病(EDN)的發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，已證實(shí)PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮(RGE)可明顯降低2型糖尿病腎 病(T2DN)患者尿蛋白〔1〕。目前尚無RGE對糖尿病腎病(DN)保護(hù)機(jī)制的臨床研究報(bào)道。本研究探討RGE對患者的保護(hù)機(jī)制。

1對象與方法

1.1研究對象選擇2011年4月至2012年12月我院門診、腎內(nèi)科、內(nèi)分泌科門診及住院部患者，體檢中心體檢者。正常個(gè)體55例(NC組)，口服葡萄糖耐量(OGTT)試驗(yàn)排除2型糖尿病，平均年齡(57.55±6.69)歲，男29例，女26例。血糖控制不理想的2型糖尿病早期腎病組(EDN組)115例,平均年齡(57.45±6.64)歲，男59例，女56例，UAER≥20 μg/min,但≤200 μg/min;EDN組使用二甲雙胍將空腹血糖(FPG)控制在8.0～13.0 mmol/L后隨機(jī)分為聯(lián)合RGZ組58例、聯(lián)合格列美脲治療組(GLI組，57例)。所有2型糖尿病患者均符合1999年世界衛(wèi)生組織(WHO)對2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均糖尿病飲食，入選者均排除1型糖尿病、特殊類型糖尿病。通過血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)及潛血試驗(yàn)、胸片、肝腎功能、腫瘤標(biāo)志物測定排除肝腎功能不全及腫瘤、感染。在3個(gè)月內(nèi)未發(fā)生糖尿病酮癥酸中毒及其他急性并發(fā)癥。排除其他類型腎病。近2 w未服用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)類藥物、血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑(ARB)類藥物。

1.2研究方法

1.2.1相關(guān)生化指標(biāo)測定受試者禁食8 h后于清晨抽取空腹肘靜脈血測FPG、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、糖化血紅蛋白(HbA1c)。HbA1c用日本ARKRAY HA8160糖化血紅蛋白分析儀及其配套試劑檢測；FPG、腎功能、血脂、UAER使用美國雅培ARCHITECT C8000全自動(dòng)生化分析儀檢測。超氧化物歧化酶(SOD)測試盒由南京建成生物研究所提供,采用羥胺法測定。缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α測定采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)試劑盒購自晶美生物工程有限公司，采用ELISA法測定。胰島素樣生長因子(IGF)-1采用ELISA法，美國DSL公司試劑盒。胰島素使用德國羅氏Cobas e411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測。超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，采用韓國Bodi Tech Med免疫熒光分析儀通過免疫熒光干式定量法檢測。血清一氧化氮(NO)采用硝酸還原酶法，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。尿微量白蛋白(UMA)檢測采用美國Immage 800特種蛋白分析儀免疫散射比濁法檢測。

1.2.2藥物治療及干預(yù)RGZ組給予RGZ片(商品名：愛能，成都恒瑞制藥有限公司)4～8 mg/d；GLI組給予格列美脲片(商品名：萬蘇平，江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司)1～2 mg/d；維持血糖相對穩(wěn)定(FPG 5.4～8.3 mmol/L，餐后2 h血糖維持于7～11 mmol/L),療程14 w。

2結(jié)果

2.1一般臨床資料和臨床生化指標(biāo)的比較EDN組尿微量白蛋白(UMA)、HIF-1α、VEGF、hs-CRP、NO、IGF-1均高于NC組(P<0.01),SOD低于NC組(P<0.01)，見表1。

2.2EDN組治療前后臨床特征的變化RGZ組治療14 w后 FPG、HbA1c、HIF-1α、VEGF 、hs-CRP、IGF-1、UAER較治療前降低(P<0.05或P<0.01)；SOD有所上升(P<0.01)；GLI組治療后FPG及HbA1c與RGZ組無差異，降低幅度后SOD較治療前上升(P<0.05)，UMA有所下降(P<0.05)，但仍高于RGZ組(P<0.05)。見表1。

2.3相關(guān)性分析血清HIF-1α、FPG、HbA1c、IGF-1、VEGF、hs-CRP、NO與UMA正相關(guān)(r分別為0.591、0.552、0.638、0.501、0.541、0.525、0.536，P<0.05或P<0.01),SOD與UMA負(fù)相關(guān)(r=-0.549,P<0.05)，與性別、年齡、SBP、DBP、TG、TC、LDL、HDL無關(guān)，r分別為0.366、0.378、0.242、0.256、0.217、0.387、0.226、0.366，均P>0.05。

表1　各組治療前后臨床、生化指標(biāo)比較±s)

與NC組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與本組治療前比較：3)P<0.05,4)P<0.01；與RGZ組治療后比較：5)P<0.05

3討論

本研究發(fā)現(xiàn)在治療后血糖及HbA1c無明顯差異的情況下RGZ降低UMA的作用更為明顯，這說明RGZ發(fā)揮了非降糖的腎臟保護(hù)作用。本研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α、VEGF、SOD、hs-CRP、IGF-1、NO與UMA正相關(guān)，這說明這些因素在DN中發(fā)揮了重要作用。

研究發(fā)現(xiàn)，EDN大鼠HIF-1α的表達(dá)增多，與腎臟肥大指數(shù)和腎小球體積呈正相關(guān)，并且HIF-1α上調(diào)能夠誘導(dǎo)糖尿病大鼠腎小球及腎小管細(xì)胞凋亡增加，從而促進(jìn)的DN的進(jìn)展〔2〕。HIF-1α與 VEGF關(guān)系密切，HIF-1α可增加 VEGF的表達(dá)，可能HIF-1α是VEGF的上游調(diào)控器〔3〕。而在糖尿病腎病早期即有VEGF增加并沉積于足細(xì)胞及系膜細(xì)胞，導(dǎo)致腎小球通透性增高、腎小球基底膜增厚，尿蛋白增加，而抑制VEGF上述情況可得到改善〔4〕。已證實(shí)PPARγ激動(dòng)劑能抑制2型糖尿病大鼠腎臟HIF-1α、VEGF的表達(dá)從而減少尿蛋白、改善腎功能〔5〕。本研究發(fā)現(xiàn)RGZ治療后HIF-1α、VEGF下降明顯。而在相同的血糖降低幅度下，格列美脲治療治療后HIF-1α、VEGF并無明顯下降。本研究認(rèn)為，RGZ降低HIF-1α、VEGF是其保護(hù)腎臟的非降糖機(jī)制之一。

已發(fā)現(xiàn)糖尿病早期出現(xiàn)腎小球肥大，腎小球高濾過，同時(shí)伴有腎內(nèi)IGF-1的增加，IGF-1可作用于腎小球足細(xì)胞導(dǎo)致糖尿病大鼠腎臟增生、高濾過，促進(jìn)DN的發(fā)生〔6〕。本研究發(fā)現(xiàn)RGZ治療后IGF-1明顯下降，而在格列美脲治療后IGF-1并無明顯下降。本研究認(rèn)為RGZ降低IGF-1是其在DN中發(fā)揮保護(hù)作用的重要機(jī)制。

氧化應(yīng)激是DN發(fā)生發(fā)展的重要因素。新進(jìn)研究發(fā)現(xiàn)PPARγ激動(dòng)劑在非降糖作用下具有抗氧化應(yīng)激，保護(hù)細(xì)胞凋亡的作用〔7〕。本研究發(fā)現(xiàn)給予RGZ治療后SOD活性明顯上升。雖然胰島素治療后SOD有所上升，但上升幅度不如RGZ治療組?？紤]GLI治療后SOD上升是糖代謝改善所致，而RGZ治療發(fā)揮了非降糖作用的抗氧化應(yīng)激。

炎癥反應(yīng)是DN發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，PPARγ激動(dòng)劑具有抑制炎癥的作用〔8〕。本研究發(fā)現(xiàn)給予RGZ治療后hs-CRP明顯下降，而DLI治療后無此現(xiàn)象。這說明RGZ對DN的保護(hù)作用其機(jī)制部分依賴于抑制炎癥反應(yīng)。

研究發(fā)現(xiàn)NO在EDN階段增多，導(dǎo)致腎小球增生，超濾過，促進(jìn)DN的發(fā)展〔9〕。已證實(shí)PPARγ激動(dòng)劑吡格列酮能降低EDN大鼠血清NO水平從而降低尿蛋白、保護(hù)腎功能〔10〕。本研究發(fā)現(xiàn)RGZ治療后NO下降。而格列美脲治療后NO無明顯變化。本研究認(rèn)為，RGZ發(fā)揮了與吡格列酮一樣的作用，RGZ治療后NO水平降低是其保護(hù)腎臟，減少尿蛋白的機(jī)制之一。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)RGZ治療EDN患者，UAER水平明顯下降。RGZ除改善糖代謝外，還通過抑制HIF-1α、VEGF、hs-CRP、IGF-1、NO、抗氧化發(fā)揮了減少尿蛋白的作用，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

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〔2014-03-05修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

〔中圖分類號(hào)〕R587.1

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015)22-6405-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.22.041