楊 鵬1 張俊文 吳志倉 姚學(xué)梅 張?jiān)?/p>
(1.永靖縣小嶺鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,甘肅永靖 731600;2.永靖縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,甘肅永靖 731600)
小反芻獸疫(PPR)是由小反芻獸疫病毒(PPRV)引起的一種急性、烈性、接觸性傳染病,臨床上主要發(fā)生于綿羊、山羊等小反芻動(dòng)物,牛一般呈亞臨床感染不產(chǎn)生臨床癥狀,豬可被實(shí)驗(yàn)感染,未發(fā)現(xiàn)人被感染的病例。病羊以體溫升高,眼鼻出現(xiàn)分泌物,口炎,肺炎和腹瀉為主要特征,急性感染病例體溫可升至41℃以上并持續(xù)3~5天,鼻腔常流膿性黏液,呼出惡臭氣體。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為A類動(dòng)物疫病,我國亦將其列為一類動(dòng)物疫病。
小反芻獸疫病毒(PPRV)可通過直接、間接接觸或氣溶膠傳播,傳染源主要為患病動(dòng)物和隱性感染動(dòng)物,感染畜的分泌物和排泄物均含有病毒。為降低小反芻獸疫(PPR)對養(yǎng)羊業(yè)的威脅,提高羊群抵御疫病風(fēng)險(xiǎn)的能力,我們項(xiàng)目組于2016年在永靖縣瑞霖養(yǎng)殖有限公司等3個(gè)規(guī)模養(yǎng)羊場進(jìn)行小反芻獸疫(PPR)弱毒活疫苗免疫接種試驗(yàn),以了解該疫苗的安全性,同時(shí)從體液免疫角度評(píng)估其有效性,為小反芻獸疫(PPR)的疫苗免疫防控提供參考和借鑒。
小反芻獸疫弱毒活疫苗:新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)為2016032-1。
小反芻獸疫競爭ELISA抗體檢測試劑盒:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn),批號(hào)為20161115118。
試驗(yàn)羊只:由永靖縣瑞霖養(yǎng)殖有限公司等3個(gè)非免疫規(guī)?;驁鎏峁?00只。見表1。
表1 參試羊情況統(tǒng)計(jì)
1.2.1 非免疫羊群感染情況檢測 為排除野毒感染情況,通過ELISA方法對600只試驗(yàn)羊進(jìn)行野毒感染抗體檢測,判斷羊群是否感染小反芻獸疫(PPR),排除可能的野毒感染對試驗(yàn)的影響,所有羊抗體檢測陰性后,開始疫苗接種試驗(yàn)。
1.2.2 免疫后羊群反應(yīng)觀察及安全性評(píng)估 分別對600只試驗(yàn)羊進(jìn)行耳號(hào)標(biāo)記和準(zhǔn)確記錄,按照疫苗說明書要求對試驗(yàn)羊進(jìn)行疫苗接種,疫苗接種后7d,密切觀察試驗(yàn)羊食欲、飲水、精神狀態(tài)、發(fā)病情況、體溫變化等指標(biāo),評(píng)估疫苗接種的安全性。
1.2.3 免疫抗體消減監(jiān)測及免疫效果評(píng)估 疫苗免疫后30d、120d、270d分別采集試驗(yàn)羊血清,通過ELISA方法檢測疫苗免疫抗體,試驗(yàn)操作按小反芻獸疫競爭ELISA抗體檢測試劑盒使用說明書進(jìn)行。同時(shí),對該期間羊群的發(fā)病情況進(jìn)行跟蹤,調(diào)查小反芻獸疫的發(fā)生情況。
通過ELISA方法,對試驗(yàn)羊野毒感染情況進(jìn)行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),600只試驗(yàn)羊樣本檢測結(jié)果均為陰性,羊群未感染小反芻獸疫(PPR),符合試驗(yàn)要求。
對永靖縣瑞霖養(yǎng)殖有限公司等3個(gè)規(guī)模養(yǎng)羊場的羊群進(jìn)行小反芻獸疫疫苗接種免疫后,經(jīng)7d密切觀察,所有免疫羊群無不良反應(yīng)和任何異常情況發(fā)生,此結(jié)果說明,該疫苗使用臨床安全。
在免疫后30d、120d、270d分別采集血清樣品通過ELISA方法對試驗(yàn)羊小反芻獸疫疫苗抗體進(jìn)行檢測,結(jié)果見表2~4。
表2 免疫后30d抗體水平監(jiān)測情況
表3 免疫后120d抗體水平監(jiān)測情況
表4 免疫后270d抗體水平監(jiān)測情況
從表24可見,疫苗免疫后30d,3個(gè)公司試驗(yàn)羊小反芻獸疫(PPR)免疫抗體平均陽性率達(dá)94.8%,其中鑫翔公司陽性率最高達(dá)到96%,財(cái)杰公司最低為93%;此后120d,3個(gè)公司試驗(yàn)羊抗體陽性率均呈上升趨勢;直至免疫后270d,鑫翔公司和財(cái)杰公司試驗(yàn)羊抗體陽性率上升至100%,但瑞霖公司抗體陽性率下降至97.5%??傮w來看,試驗(yàn)羊群PPR抗體陽性率均處于較高水平。
整個(gè)試驗(yàn)過程中,600只試驗(yàn)羊均正常生長發(fā)育,未出現(xiàn)死亡,也未發(fā)生過疑似小反芻獸疫(PPR)病例,進(jìn)一步說明弱毒活疫苗免疫是安全的。
(1)對永靖縣養(yǎng)羊業(yè)而言,小反芻獸疫(PPR)是一種新出現(xiàn)的疫病,在防疫上還缺少有效的應(yīng)對策略以供參考。通過本設(shè)計(jì)試驗(yàn),對疫苗免疫防控進(jìn)行綜合評(píng)估,結(jié)果發(fā)現(xiàn)弱毒活疫苗可誘導(dǎo)較強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答,使用過程中試驗(yàn)羊臨床健康,不論是綿羊還是山羊,均得到相似的試驗(yàn)結(jié)果。
(2)免疫抗體誘導(dǎo)是疫苗免疫效果評(píng)估的重要指標(biāo)。Vinayagamurthy Balamurugan 等在不同間隔時(shí)間對免疫小反芻獸疫疫苗的山羊進(jìn)行抗體滴度檢測,結(jié)果表明,在接種疫苗后21d,抗體檢出率達(dá)到高峰且能穩(wěn)定持續(xù)至免疫后310d以上,這與我們的研究結(jié)果相類似。另有報(bào)道顯示,PPR弱毒活疫苗免疫26個(gè)月后,抗體檢出率仍能保持在85%以上,表現(xiàn)為持久的保護(hù)性。從這些監(jiān)測結(jié)果結(jié)合本試驗(yàn),可說明PPR活疫苗不僅免疫誘導(dǎo)能力強(qiáng),而且免疫持續(xù)期長,對PPR的控制是一種較為可行的選擇。
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