急性腦梗死患者TNF-α和TNF-β的含量變化及相關(guān)因素分析

廖慶紅　付建輝★　汪　飛　陳詩(shī)莉

急性腦梗死患者TNF-α和TNF-β的含量變化及相關(guān)因素分析

廖慶紅付建輝★汪飛陳詩(shī)莉

目的 探討急性腦梗死患者腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、腫瘤壞死因子-β（TNF-β）的含量變化及其相關(guān)因素的分析。方法 選取65例腦梗死患者為觀察組，同期健康體檢人群40例為對(duì)照組，檢測(cè)TNF-α及TNF-β水平。結(jié)果 觀察組TNF-α與TNF-β水平均明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平與神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積呈明顯正相關(guān)（P均＜0.01）。評(píng)分越高，腦梗死面積越大，TNF-α和TNF-β水平增高越明顯。TNF-α與TNF-β水平呈明顯正相關(guān)（r=0.455，P＜0.01）。結(jié)論 TNF-α與TNF-β參與了腦梗死早期發(fā)病過(guò)程。TNF-α與TNF-β水平與腦梗死病情的嚴(yán)重程度及預(yù)后有關(guān)。

TNF-α TNF-β 腦梗死

腫瘤壞死因子（TNF）作為一種具有廣泛生物效應(yīng)的炎性細(xì)胞因子，分為T(mén)NF-α和TNF-β兩種。研究顯示，發(fā)生急性腦梗死時(shí)，TNF-α在病灶周?chē)把獫{中濃度增高［1］。TNF-α被認(rèn)為是腦梗死疾病病理生理機(jī)制中的關(guān)鍵介質(zhì)，參與腦梗死的炎癥免疫過(guò)程。目前大多數(shù)研究集中于TNF-α在心腦血管疾病中的作用機(jī)制，而TNF-β與腦梗死的關(guān)系并未引起重視。本文就TNF-α和TNF-β與腦梗死發(fā)生的相關(guān)性作進(jìn)一步探討，旨在了解急性腦梗死患者血清中TNF-α和TNF-β含量變化，探討其在急性腦梗死中的作用及臨床意義。報(bào)道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 連續(xù)收集2012年6月至2014年6月腦梗死患者65例為觀察組，男43例，女22例；年齡39～86歲，平均年齡（58.3±7.3）歲。同時(shí)隨機(jī)抽取門(mén)診健康人群40例為對(duì)照組，男28例，女12例；年齡45～80歲，平均年齡（55.9±6.7）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均符合WHO腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）發(fā)病48～72 h內(nèi)經(jīng)頭顱MRI/CT檢查，明確梗死灶。（3）患者均知情同意，自愿參加。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有房顫、感染性心內(nèi)膜炎等可致心源性腦栓塞疾病。（2）近期有急性感染性疾病。（3）嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙或造血系統(tǒng)疾病，腫瘤等。（4）近期服用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑以及溶栓治療者。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2分組 腦梗死組根據(jù)第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議通過(guò)的腦卒中患者神經(jīng)功能缺損評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)中“改良愛(ài)丁堡-斯堪的那維亞卒中量表”進(jìn)行分組，輕型組0～15分，中型組16～30分，重型組31～45分。根據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為輕型23例、中型24例、重型18例。根據(jù)頭顱CT或MRI所示病灶大小，將腦梗死分為大面積腦梗死（病灶直徑＞4cm）亞組15例，中等面積腦梗死（病灶直徑1.5～4.0cm）亞組28例，小面積腦梗死（病灶直徑＜1.5cm）亞組22例。

1.3方法 （1）標(biāo)本采集：所有觀察對(duì)象清晨抽取空腹肘靜脈血5ml，標(biāo)本用無(wú)菌生化抗凝試管留取，以3000r/min離心10min后分離血清，置于-20℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。（2）TNF-α和TNF-β檢測(cè)：采用ELISA法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自美國(guó)TPI公司，儀器為FJ-2008型自動(dòng)γ免疫計(jì)數(shù)儀檢測(cè)。操作嚴(yán)格按試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。此外，甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-c）檢測(cè)。TC、TG用酶法，HDL-c、LDL-c用直接法測(cè)定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包。計(jì)量資料以 （x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析及兩兩比較的SNK法測(cè)定，不同面積組間血清中TNF-α和TNF-β含量比較采用成組的t檢驗(yàn)，并且進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。TNF-α和TNF-β之間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1腦梗死組與對(duì)照組一般資料比較 腦梗死組患者的年齡、性別構(gòu)成與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而TG、TC、LDL-c濃度均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），但HDL-c濃度則明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。2.2 腦梗死組與對(duì)照組TNF-α和TNF-β含量變化 有臨床神經(jīng)功能缺損的各組腦梗死患者TNF-α和TNF-β水平均分別明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；重型組血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、輕型組（P＜0.01）；中型組TNF-α和TNF-β水平均高于輕型組（P＜0.05）。

2.3梗死面積不同的腦梗死患者TNF-α和TNF-β測(cè)定結(jié)果 大面積組患者血清TNF-α和TNF-β明顯高于中等面積組和小面積組（P＜0.01）。中等面積組明顯高于小面積組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.4腦梗死組血清TNF-α和TNF-β水平與梗死面積、神經(jīng)功能缺損評(píng)分的關(guān)系 血清TNF-α和TNF-β呈直線正相關(guān)（r=0.328，P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平分別與梗死面積、臨床神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)（P均＜0.01）。

3　討論

研究發(fā)現(xiàn)TNF-α具有促進(jìn)修復(fù)以及造成腦組織缺血再灌注損傷的雙重作用［2］。體外實(shí)驗(yàn)中，給予神經(jīng)元興奮性、代謝性及氧化應(yīng)激性損傷刺激后，TNF-α具有促使軸索再生的保護(hù)作用［3］。在腦梗死炎癥反應(yīng)中，TNF-α通過(guò)損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞、增加血管壁通透性，釋放多種炎性介質(zhì)誘導(dǎo)產(chǎn)生炎癥，以及增加興奮性氨基酸、一氧化氮及自由基等的產(chǎn)生和釋放，產(chǎn)生神經(jīng)毒性，從而加重腦梗死后組織損傷的作用。有研究表明TNF-α表達(dá)與細(xì)胞凋亡呈正相關(guān)，表達(dá)水平下降，神經(jīng)細(xì)胞凋亡下降，從而減輕了炎癥反應(yīng)［4］。

TNF-β主要是由Th1分泌，可誘導(dǎo)活化B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。TNF-β可引起核酸內(nèi)切酶和caspase家族的級(jí)聯(lián)反應(yīng)促使細(xì)胞凋亡［5］。TNF-β在心腦血管疾病發(fā)病過(guò)程中的機(jī)制尚不清楚。TNF-β基因多態(tài)性與腦梗死密切相關(guān)，TNF-β基因高表達(dá)導(dǎo)致腦卒中發(fā)生的幾率增大［6］。在基因水平上炎性細(xì)胞因子的變異可能會(huì)導(dǎo)致患者患腦卒中危險(xiǎn)性增高。本資料發(fā)現(xiàn)腦梗死患者血清中TNF-α、TNF-β水平明顯高于正常對(duì)照組，說(shuō)明急性腦梗死患者發(fā)病早期即出現(xiàn)TNF-α、TNF-β升高現(xiàn)象。在梗死面積方面，大面積組患者血清TNF-α和TNF-β水平明顯高于中等面積組和小面積組，中等面積組明顯高于小面積組。在神經(jīng)功能缺損評(píng)分方面，重型組血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、輕型組（P＜0.05）；中型組的血清TNF-α和TNF-β水平均高于輕型組（P＜0.05）。血清TNF-α和TNF-β水平分別與梗死面積、臨床神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)，說(shuō)明兩者之間存在密切的關(guān)系。表明腦缺血后過(guò)度表達(dá)的TNF-α和TNF-β可以加重缺血再灌注損傷。隨著梗死面積及神經(jīng)功能缺損的加重，血管內(nèi)皮完整性受到破壞，內(nèi)皮功能損傷越嚴(yán)重，越加劇炎癥反應(yīng)，TNF-α和TNF-β表達(dá)越高，因此，推測(cè)TNF-α和TNF-β的水平在一定程度上反映了患者病情的輕重程度。

此外，本資料顯示血清中TNF-α和TNF-β呈直線正相關(guān)。兩者在腦梗死的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到正反饋的聯(lián)合作用。因此如何有效降低TNF-α和TNF-β水平，對(duì)于減輕炎癥反應(yīng)，神經(jīng)功能的恢復(fù)，改善預(yù)后具有重要意義，這也為治療腦梗死提供了新的方法。本資料不足之處在于實(shí)驗(yàn)樣本量小、干擾因素較多，一定程度上實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生偏倚，因此需要長(zhǎng)期、大樣本量、多中心、多因素的隨機(jī)雙盲對(duì)照研究。

1 Trenkmann M，Brock M，GayRE，et al.Tumor necrosis factor alphainduced microRNA-18a activates rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through a feedback loop in NF-kappa B signaling.Arthritis Rheum，2013，65（4）：916～927.

2 Chu WM. Tumor necrosis factor.Cancer letters，2013，328（2）：222～225.

3 Mattson MP，Barger SW，F(xiàn)urnkawa K，et al.Cellular signaling roles of TGF beta TNF alpha and beta App in brain injury responses and Alzheimers disease.Brain Res Rev，1997，23（1～2）：47～61.

4 Chen J，Wu X，Shao B，et al. Increased expression of TNF receptorassociated factor 6 after rat traumatic brain injury. Cell Mol Neurobiol，2011， 31（2）： 269～275.

5 張全云，丁月東，汪允珍.氯胺酮對(duì)兔全腦缺血-再灌注海馬細(xì)胞凋亡及TNF-β和IL-10的影響.臨床麻醉學(xué)雜，2012，28（12）：1226～1229.

6 Szolnoki.Lymrphotoxin-alpha gene 2526 allelie variant is a risk factor for large-vesel-associated ischemic.Stroke，2005，27（2）：205～211.

314100 浙江省嘉善縣第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（廖慶紅汪飛 陳詩(shī)莉）

200040 上海復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（付建輝）