• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    江漢雞群體FSHβ 基因遺傳多態(tài)位點(diǎn)分析

    2022-01-08 11:43:40潘愛鑾蒲躍進(jìn)梁振華杜金平朱昌友皮勁松
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年23期
    關(guān)鍵詞:遺傳變異江漢元件

    黃 濤,潘愛鑾,申 杰,吳 艷,蒲躍進(jìn),張 昊,孫 靜,梁振華,杜金平,朱昌友,皮勁松

    (1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心/動(dòng)物胚胎與分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢 430064;2.湖北省畜牧良種場(chǎng),武漢 434010)

    江漢雞為中國地方品種,是湖北省非常重要的地方雞遺傳資源。江漢雞是在江漢平原上進(jìn)化長(zhǎng)時(shí)間馴化而成的,具有自身明顯的特征,以黃麻羽居多,體重較輕,屬蛋肉兼用型,自然群體里有部分雞產(chǎn)綠殼蛋[1]。雖然江漢雞具有產(chǎn)品品質(zhì)好、抗逆性強(qiáng)、耐粗飼等優(yōu)點(diǎn),但也存在一些不足,主要表現(xiàn)在生長(zhǎng)速度較慢、產(chǎn)蛋少、飼料轉(zhuǎn)化率低、生產(chǎn)成本高[2]。湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所家禽試驗(yàn)場(chǎng)開展對(duì)江漢雞的保種與開發(fā)利用工作,基于江漢雞的配套利用[3]進(jìn)行選育,挖掘江漢雞遺傳特色是對(duì)其進(jìn)行開發(fā)利用的緊迫任務(wù),獲取江漢雞群體遺傳變異信息,對(duì)功能位點(diǎn)的預(yù)測(cè)與篩選或許有利于今后的開發(fā)利用。

    卵泡雌激素(FSH)是促卵泡素(Follicle stimulating hormone,F(xiàn)SH),由垂體前葉分泌,是一種糖蛋白激素。FSH 分子是由α 和β 2 個(gè)亞基組成的異質(zhì)二聚體,當(dāng)β 亞基與α 亞基結(jié)合時(shí)其才具有生物學(xué)活性[4]。FSHβ基因?qū)﹄u性成熟和生殖等具有調(diào)控作用,能刺激卵泡發(fā)育和成熟,產(chǎn)生雌激素和促進(jìn)排卵。李江曼[5]在不同品種雞的FSHβ基因檢測(cè)到單堿基突變位點(diǎn)與寧都黃雞的產(chǎn)蛋性能顯著相關(guān);秦玉梅等[6]在雞FSHβ基因中發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)與玫瑰冠雞和海蘭褐蛋雞300 日齡產(chǎn)蛋數(shù)顯著相關(guān)。本研究基于基因組重測(cè)序結(jié)果鑒定江漢雞群體FSHβ基因的遺傳變異信息,通過生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)功能性變異位點(diǎn)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)樣品

    江漢雞來源于湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所家禽試驗(yàn)雞場(chǎng)。在18 周齡時(shí)隨機(jī)抽取30 只進(jìn)行腋下采血,于抗凝管中保存。DNA的提取采用天根DNA 提取試劑盒(TIANamp Blood DNA Kit)進(jìn)行,提取的DNA 用NanoDrop 2 000 進(jìn)行濃度測(cè)定。將各樣品稀釋到100 ng/μL,然后每個(gè)樣品取3 μL進(jìn)行混池。

    1.2 重測(cè)序分析

    DNA 樣品送往百易匯能公司進(jìn)行建庫測(cè)序。在獲取原始數(shù)據(jù)后,首先使用cutadapt 軟件進(jìn)行clean reads 操作。下載Galgal6 參考基因組,使用bwa 軟件建立索引。運(yùn)用SAMtools 軟件對(duì)clean reads 進(jìn)行序列比對(duì)組裝。生成Bam 文件,建立索引后導(dǎo)入IGV軟件中收集變異位點(diǎn)。使用GATK 軟件對(duì)bam 文件進(jìn)行變異位點(diǎn)整理生成vcf文件,該文件里包含基因組遺傳變異信息。

    1.3 生物信息學(xué)預(yù)測(cè)

    針對(duì)FSHβ基因序列中的遺傳變異,篩選潛在的功能性變異。分析內(nèi)容包括3 個(gè)部分,分別為M6A 分析、調(diào)控元件分析和miRNA 結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)分析。設(shè)定mRNA(NM_204257.1)序列第一個(gè)堿基為+1。使用RNAfold web server 進(jìn)行cds 區(qū)二級(jí)結(jié)構(gòu)分析;使用SRAMP(http://www.cuilab.cn/sramp/)在線軟件對(duì)序列進(jìn)行M6A 分析;在對(duì)調(diào)控元件進(jìn)行分析時(shí),采用JASPAR(http://jaspar.genereg.net/)在線分析軟件,設(shè)置置信參數(shù)大于85。在對(duì)miRNA 結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)分析時(shí),采用miRDB(http://mirdb.org/)在線軟件進(jìn)行分析,保留target score為60以上的結(jié)果。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 江漢雞群體FSHβ 基因遺傳變異

    基于基因組重測(cè)序數(shù)據(jù),獲取江漢雞群體FSHβ基因所有遺傳變異信息(圖1、圖2)。FSHβ基因包括有2 個(gè)內(nèi)含子和3 個(gè)外顯子。外顯子又可以分為5′utr、cds和3′utr。本研究在江漢雞群體中發(fā)現(xiàn)該基因共有35 個(gè)SNPs 和2 個(gè)indels。其中外顯子有31個(gè)SNPs,其分布為5′utr 區(qū)0 個(gè),cds 區(qū)2 個(gè),3′utr 區(qū)29 個(gè);內(nèi)含子有4 個(gè)SNPs。此外,發(fā)現(xiàn)的2 個(gè)indels位于3′utr區(qū)。

    圖1 江漢雞群體FSHβ 基因內(nèi)遺傳變異信息統(tǒng)計(jì)

    圖2 江漢雞FSHβ 基因內(nèi)出現(xiàn)6 個(gè)連續(xù)堿基indel(紅框)

    2.2 FSHβ 蛋白結(jié)構(gòu)分析

    在江漢雞中發(fā)現(xiàn)位于FSHβ基因cds 區(qū)有2 個(gè)SNPs,位于+297 位置G 突變成A,屬于非同義突變,造成其由甘氨酸變成絲氨酸。位于+431 位置C 突變成T,屬于同義突變,未發(fā)生氨基酸變化。比較非同義突變對(duì)RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),G 突變成A 自由能由-441.29 kJ/mol 變?yōu)?444.22 kJ/mol,C突變成T自由能由-441.29 kJ/mol變?yōu)?441.71 kJ/mol。+297 和+431 位點(diǎn) 突變 前后cds 區(qū)RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)變化情況見圖3。甘氨酸突變成絲氨酸,蛋白質(zhì)分子式由C643H967N161O203S17變成C644H969N161O204S17??偲骄H水性由-0.069 變成-0.072,不穩(wěn)定指數(shù)和理論等電點(diǎn)未發(fā)生變化。

    圖3 突變對(duì)FSHβ 二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響

    2.3 FSHβ 基因M6A 分析

    使用SRAMP 在線軟件對(duì)FSHβ的mRNA(NM_204257.1)序列進(jìn)行分析,預(yù)測(cè)M6A 修飾位點(diǎn)。結(jié)果顯示該轉(zhuǎn)錄本內(nèi)有10 個(gè)潛在的M6A 修飾位點(diǎn),對(duì)應(yīng)的位置分別在+110、+152、+376、+392、+518、+1398、+1408、+1684、+1691、+1874。其中,1 個(gè)位點(diǎn)具有極高置信度(very high confidence),5 個(gè)位點(diǎn)具有高置信度(high confidence),3 個(gè)位點(diǎn)具有中置信度(moderate confidence),1 個(gè)位點(diǎn)具有低置信度(low confidence),這10 個(gè)位點(diǎn)在江漢雞群體中沒有發(fā)生遺傳變異。

    2.4 FSHβ 基因調(diào)控元件預(yù)測(cè)分析

    使用JASPAR 在線軟件對(duì)FSHβ的mRNA(NM_204257.1)序列進(jìn)行分析,預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。在設(shè)置置信參數(shù)為85%后,獲取70 個(gè)潛在的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控元件,主要涉及5 個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(圖4),分別包括TFAP2A、RUNX1、AG、AGL3 和arnt。在江漢雞群體中,發(fā)現(xiàn)7 個(gè)SNPs 位于調(diào)控元件的序列中(表1)。值得注意的是,TFAP2A 靶向的調(diào)控元件序列中分別包含2 個(gè)SNPs,且都位于正鏈上。

    表1 FSHβ 基因轉(zhuǎn)錄本內(nèi)有江漢雞遺傳變異位點(diǎn)的調(diào)控作用元件

    圖4 轉(zhuǎn)錄因子種類與數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果

    2.5 FSHβ 基因靶向miRNA 預(yù)測(cè)分析

    使用miRDB 在線軟件對(duì)FSHβ的mRNA(NM_204257.1)序列進(jìn)行分析,預(yù)測(cè)miRNA 結(jié)合位點(diǎn)。設(shè)置分?jǐn)?shù)在60 以上后獲取51 個(gè)miRNAs,這些miRNAs具有靶向轉(zhuǎn)錄本調(diào)控基因表達(dá)的潛力。通過對(duì)這51個(gè)miRNAs的種子序列進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)部分miRNA的種子序列中包含有江漢雞SNPs。其中g(shù)ga-miR-6605-5p的種子序列中包含多達(dá)3 個(gè)SNPs。將種子序列有SNPs的miRNAs 列出(表2),可用于江漢雞繁殖性狀中的調(diào)控作用研究。

    表2 種子序列中包含有江漢雞遺傳變異位點(diǎn)的miRNAs

    3 小結(jié)與討論

    隨著基因組重測(cè)序技術(shù)的普及,獲取地方雞基因組遺傳變異信息變得越來越容易。但是,如何在海量的遺傳變異位點(diǎn)中篩選出功能性變異依然具有很大的挑戰(zhàn)性。地方遺傳資源的開發(fā)與利用,歸根結(jié)底要利用功能性的遺傳變異進(jìn)行遺傳改良,而這也是應(yīng)用性研究的主要內(nèi)容。本研究關(guān)注繁殖激素FSH的β 亞基基因序列,利用基因組重測(cè)序技術(shù),獲取該基因序列在江漢雞群體中所有的遺傳變異位點(diǎn)。通過M6A 預(yù)測(cè)分析、調(diào)控元件預(yù)測(cè)分析和miRNA 結(jié)合序列分析,篩選出具有潛在功能性的遺傳變異位點(diǎn),用于今后的進(jìn)一步研究。

    FSHβ基因內(nèi)有豐富的遺傳變異位點(diǎn),且存在品種特性。王鵬等[7]在儋州雞FSHβ基因鑒定出25 個(gè)SNP 位點(diǎn),其中21 個(gè)SNPs 也存在于江漢雞群體中。通過比較發(fā)現(xiàn),兩個(gè)品種之間有部分SNPs 屬于品種特有,這些遺傳變異位點(diǎn)具有較高的研究?jī)r(jià)值。

    FSHβ基因富含遺傳多態(tài)位點(diǎn),有報(bào)道與產(chǎn)蛋性狀有關(guān)。在江漢雞+931 位置SNP,洪坤月等[8]發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)與綠殼蛋雞開產(chǎn)日齡相關(guān)。在江漢雞+1024位置有SNP,田艷苓等[9]發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)與濟(jì)寧百日雞開產(chǎn)日齡有關(guān)。李江曼[5]在+868 位置發(fā)現(xiàn)SNP 與寧都黃雞產(chǎn)蛋性能顯著相關(guān),但是江漢雞群體中沒有該變異。在江漢雞轉(zhuǎn)錄本3′utr 區(qū)+1299 位置為純合型,但在玫瑰冠雞和海蘭褐蛋雞中,秦玉梅等[6]發(fā)現(xiàn)該位置的堿基突變,且與300 日齡產(chǎn)蛋數(shù)有關(guān),該結(jié)果與孫杰等[10]的研究結(jié)果基本一致。王亞男[11]在FSHβ基因中發(fā)現(xiàn)了3 處SNPs 與京海黃雞體增重有關(guān),3 處變異位點(diǎn)對(duì)應(yīng)在轉(zhuǎn)錄本+606、+607 和+898位置,該位置與江漢雞變異情況一致,預(yù)測(cè)結(jié)果顯示+606、+607 位置位于TFAP2A 調(diào)控元件內(nèi),推測(cè)在體增重過程中其參與一定調(diào)控作用。韓厚明[12]在文昌雞FSHβ基因外顯子中發(fā)現(xiàn)3 處SNPs,其對(duì)應(yīng)在轉(zhuǎn)錄本+898、+931 和+1024 位置,與江漢雞變異情況一致。不過,文昌雞中上述3 個(gè)位點(diǎn)未見與產(chǎn)蛋性能關(guān)聯(lián)。

    總之,對(duì)江漢雞FSHβ基因進(jìn)行遺傳多態(tài)性分析,發(fā)現(xiàn)35 個(gè)SNPs 和2 個(gè)indels。值得注意的是,在這些變異位點(diǎn)之中,1 個(gè)SNP 位于cds 區(qū)造成甘氨酸變成絲氨酸。此外還發(fā)現(xiàn)7 個(gè)SNPs 位于潛在的調(diào)控元件序列中,7 個(gè)SNPs 和1 個(gè)indel 位于潛在的miRNA 結(jié)合序列中。所篩選的上述遺傳變異位點(diǎn),可能參與了FSHβ基因的表達(dá)調(diào)控,在江漢雞遺傳特性中扮演一定的角色。

    猜你喜歡
    遺傳變異江漢元件
    江漢英美術(shù)作品
    江漢英美術(shù)作品
    望江漢
    心聲歌刊(2020年6期)2021-01-14 00:23:30
    先導(dǎo)編輯技術(shù)可編輯近90%的人類遺傳變異
    基于改進(jìn)遺傳變異算子的海島算法
    電子制作(2019年24期)2019-02-23 13:22:18
    藝術(shù)百家 江漢英
    QFN元件的返工指南
    火力楠子代遺傳變異分析及優(yōu)良家系選擇
    GABABR2基因遺傳變異與肥胖及代謝相關(guān)表型的關(guān)系
    在新興產(chǎn)業(yè)看小元件如何發(fā)揮大作用
    日韩欧美一区视频在线观看| 欧美三级亚洲精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 国产免费又黄又爽又色| 91精品三级在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 人成视频在线观看免费观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲av.av天堂| 99热网站在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲精品久久午夜乱码| 91精品国产国语对白视频| 能在线免费看毛片的网站| 男人爽女人下面视频在线观看| 午夜激情福利司机影院| 久久久久久久大尺度免费视频| 国模一区二区三区四区视频| 国产亚洲精品久久久com| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 人妻人人澡人人爽人人| 日韩免费高清中文字幕av| 国产精品久久久久久精品电影小说| 欧美性感艳星| 亚洲伊人久久精品综合| 边亲边吃奶的免费视频| 欧美最新免费一区二区三区| 蜜桃在线观看..| 另类精品久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 精品国产一区二区久久| 精品久久久久久久久亚洲| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产一区二区在线观看av| 亚洲精品自拍成人| 国产精品人妻久久久久久| a级毛色黄片| 91久久精品国产一区二区成人| www.色视频.com| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲av免费高清在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精品,欧美精品| 在线精品无人区一区二区三| 特大巨黑吊av在线直播| videossex国产| 亚洲精品色激情综合| 寂寞人妻少妇视频99o| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 丝瓜视频免费看黄片| 天天影视国产精品| 精品一区二区三卡| 成人亚洲欧美一区二区av| 欧美激情国产日韩精品一区| 五月开心婷婷网| 22中文网久久字幕| 五月伊人婷婷丁香| 国产一区亚洲一区在线观看| 精品久久久久久电影网| 男女边吃奶边做爰视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲av免费高清在线观看| 久久精品久久久久久久性| 久久久国产欧美日韩av| 赤兔流量卡办理| 国产探花极品一区二区| 亚洲成人av在线免费| 天堂中文最新版在线下载| 欧美日韩视频精品一区| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久久久视频综合| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线观看三级黄色| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 啦啦啦啦在线视频资源| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 在线观看一区二区三区激情| 国产av一区二区精品久久| 99re6热这里在线精品视频| 国产有黄有色有爽视频| 日本av免费视频播放| 极品人妻少妇av视频| 久久久久视频综合| 成人漫画全彩无遮挡| 国产av国产精品国产| 久久 成人 亚洲| 免费观看性生交大片5| 国产成人免费无遮挡视频| 青春草亚洲视频在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 欧美性感艳星| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 一边亲一边摸免费视频| 色视频在线一区二区三区| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲精品国产av成人精品| 国产一区亚洲一区在线观看| 成人手机av| 99视频精品全部免费 在线| 免费黄色在线免费观看| 在线观看国产h片| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产色婷婷99| 国产色婷婷99| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品中文字幕在线视频| 精品一区二区三区视频在线| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产免费一区二区三区四区乱码| 黑人猛操日本美女一级片| 欧美日韩精品成人综合77777| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 日韩在线高清观看一区二区三区| 91精品国产九色| 精品久久久精品久久久| 国产亚洲欧美精品永久| 国产高清不卡午夜福利| 久久婷婷青草| 中文字幕制服av| 老司机影院成人| 国产成人av激情在线播放 | 欧美日韩精品成人综合77777| 国产成人精品福利久久| 国产在线一区二区三区精| 午夜老司机福利剧场| 精品久久久久久久久av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 丁香六月天网| 少妇 在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 内地一区二区视频在线| 亚洲五月色婷婷综合| 一区二区三区四区激情视频| 成人国产av品久久久| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 秋霞在线观看毛片| 欧美另类一区| 日韩制服骚丝袜av| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 青春草亚洲视频在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 日本wwww免费看| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲国产日韩一区二区| 丝袜喷水一区| 春色校园在线视频观看| 欧美国产精品一级二级三级| 少妇被粗大猛烈的视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 在线播放无遮挡| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲欧美清纯卡通| 久久综合国产亚洲精品| 精品午夜福利在线看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲成人av在线免费| 97精品久久久久久久久久精品| 一级毛片电影观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久国产精品大桥未久av| 特大巨黑吊av在线直播| 秋霞在线观看毛片| 熟女人妻精品中文字幕| 一级黄片播放器| 日韩一区二区三区影片| 春色校园在线视频观看| 一区二区三区乱码不卡18| av卡一久久| av一本久久久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲内射少妇av| 国产黄频视频在线观看| 国产成人精品一,二区| 丝袜在线中文字幕| 九色亚洲精品在线播放| 欧美性感艳星| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲综合色网址| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 最新的欧美精品一区二区| 国产男女超爽视频在线观看| 少妇精品久久久久久久| 2021少妇久久久久久久久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲美女黄色视频免费看| 热99久久久久精品小说推荐| 欧美3d第一页| 高清不卡的av网站| 伦理电影免费视频| 午夜激情久久久久久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 午夜激情久久久久久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 黑丝袜美女国产一区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 春色校园在线视频观看| 91久久精品国产一区二区成人| 精品一区在线观看国产| 精品国产乱码久久久久久小说| av.在线天堂| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久这里有精品视频免费| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 51国产日韩欧美| 老司机亚洲免费影院| 国产免费一区二区三区四区乱码| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产 精品1| 日韩一区二区视频免费看| 寂寞人妻少妇视频99o| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 美女视频免费永久观看网站| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久久久视频综合| 丰满乱子伦码专区| 国产免费视频播放在线视频| 国内精品宾馆在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 精品国产国语对白av| 亚洲av免费高清在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 性色av一级| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 黄色欧美视频在线观看| 18+在线观看网站| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 亚洲精品日本国产第一区| av在线app专区| 久久久久久久久久久免费av| 3wmmmm亚洲av在线观看| 少妇的逼好多水| 伦理电影免费视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 日韩欧美精品免费久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 一个人免费看片子| 蜜桃在线观看..| .国产精品久久| 久久热精品热| 一区在线观看完整版| 美女国产视频在线观看| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品av麻豆狂野| 热99国产精品久久久久久7| www.av在线官网国产| 成年女人在线观看亚洲视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 伦理电影大哥的女人| 免费观看av网站的网址| 街头女战士在线观看网站| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 少妇的逼好多水| 中文字幕av电影在线播放| 老司机影院成人| 老熟女久久久| 少妇高潮的动态图| 观看av在线不卡| 18禁在线播放成人免费| 久久精品久久久久久久性| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 婷婷色麻豆天堂久久| 草草在线视频免费看| 黄片播放在线免费| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲人成网站在线观看播放| 男女边摸边吃奶| 丰满乱子伦码专区| 免费看av在线观看网站| 黄色配什么色好看| 日韩精品有码人妻一区| 日韩欧美精品免费久久| av黄色大香蕉| 我的老师免费观看完整版| 777米奇影视久久| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一区二区三区四区激情视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产成人精品婷婷| 丝袜脚勾引网站| 亚洲,欧美,日韩| 成人国产av品久久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 日本色播在线视频| 亚洲内射少妇av| 久久99热这里只频精品6学生| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产在线一区二区三区精| 18+在线观看网站| 插逼视频在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 满18在线观看网站| 观看av在线不卡| 97在线视频观看| av电影中文网址| 欧美日韩亚洲高清精品| 99精国产麻豆久久婷婷| 日本黄色日本黄色录像| 国产永久视频网站| 久久久久久久久大av| 观看美女的网站| 国产 精品1| tube8黄色片| 免费看光身美女| 亚洲精品自拍成人| 精品久久蜜臀av无| 亚洲av免费高清在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 欧美最新免费一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 青春草亚洲视频在线观看| 少妇熟女欧美另类| 97超碰精品成人国产| 欧美日韩在线观看h| av卡一久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲成色77777| 日韩伦理黄色片| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 人成视频在线观看免费观看| 成人影院久久| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久精品人人爽人人爽视色| 成人国产麻豆网| 婷婷色综合www| 久久婷婷青草| 日韩av在线免费看完整版不卡| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲国产精品国产精品| 制服丝袜香蕉在线| 久久久国产一区二区| 精品人妻熟女av久视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美3d第一页| 免费看光身美女| 搡女人真爽免费视频火全软件| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av在线观看美女高潮| 日本黄大片高清| 欧美精品国产亚洲| 欧美日韩亚洲高清精品| 免费av不卡在线播放| 亚洲精品色激情综合| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产在线免费精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 久久亚洲国产成人精品v| 搡女人真爽免费视频火全软件| 精品一区二区三区视频在线| 久久亚洲国产成人精品v| 国产国语露脸激情在线看| 日韩免费高清中文字幕av| 少妇的逼水好多| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 久久ye,这里只有精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产av码专区亚洲av| 日韩强制内射视频| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲av国产av综合av卡| 日日爽夜夜爽网站| 嘟嘟电影网在线观看| 国产免费现黄频在线看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国内精品宾馆在线| 国产精品99久久久久久久久| 国产成人91sexporn| 久久久久网色| 亚洲性久久影院| 日本wwww免费看| 午夜福利影视在线免费观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 22中文网久久字幕| 久久精品久久精品一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲欧洲日产国产| 如何舔出高潮| 欧美最新免费一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 99久久精品国产国产毛片| 中文字幕久久专区| 久久免费观看电影| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 99热这里只有是精品在线观看| 99国产精品免费福利视频| 少妇人妻久久综合中文| 国产精品99久久99久久久不卡 | 插逼视频在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 老女人水多毛片| 国产 一区精品| 日韩亚洲欧美综合| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲美女视频黄频| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久久久久久久久人人人人人人| 精品久久久久久久久av| 特大巨黑吊av在线直播| 色网站视频免费| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜影院在线不卡| av福利片在线| 国产日韩欧美视频二区| 欧美xxⅹ黑人| 久久韩国三级中文字幕| 午夜视频国产福利| 日韩中文字幕视频在线看片| 美女视频免费永久观看网站| 91国产中文字幕| 亚洲国产色片| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲色图综合在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 99re6热这里在线精品视频| 又大又黄又爽视频免费| 91精品国产国语对白视频| 久久久a久久爽久久v久久| 成人毛片a级毛片在线播放| 成人漫画全彩无遮挡| 午夜精品国产一区二区电影| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| av免费在线看不卡| 欧美日韩在线观看h| 男男h啪啪无遮挡| av视频免费观看在线观看| 精品久久久久久电影网| 妹子高潮喷水视频| 满18在线观看网站| 99九九在线精品视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 成人国产av品久久久| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久青草综合色| h视频一区二区三区| 成人国产av品久久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 最近中文字幕2019免费版| xxx大片免费视频| 秋霞在线观看毛片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲av福利一区| 国产亚洲一区二区精品| 国产探花极品一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美丝袜亚洲另类| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 午夜久久久在线观看| 乱人伦中国视频| av免费观看日本| 亚洲欧美一区二区三区国产| 免费av不卡在线播放| 午夜久久久在线观看| av在线app专区| 日本午夜av视频| 下体分泌物呈黄色| videosex国产| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲精品成人av观看孕妇| 插逼视频在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久久亚洲精品成人影院| 国产高清有码在线观看视频| 老女人水多毛片| 欧美bdsm另类| 热re99久久精品国产66热6| 精品熟女少妇av免费看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| www.色视频.com| 亚洲精品456在线播放app| 22中文网久久字幕| 日韩欧美精品免费久久| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 日本wwww免费看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产高清不卡午夜福利| xxxhd国产人妻xxx| 国产成人午夜福利电影在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 九九爱精品视频在线观看| 国产极品天堂在线| 精品一区二区三区视频在线| 精品酒店卫生间| 一级毛片 在线播放| 熟妇人妻不卡中文字幕| av播播在线观看一区| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲av日韩在线播放| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 伊人久久国产一区二区| 国产 一区精品| 美女国产高潮福利片在线看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| av天堂久久9| 免费看不卡的av| 少妇的逼好多水| av在线老鸭窝| 又大又黄又爽视频免费| 久热久热在线精品观看| 91国产中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品熟女少妇av免费看| 综合色丁香网| 亚洲,欧美,日韩| 国产精品一区二区在线不卡| 赤兔流量卡办理| 97在线视频观看| 人妻 亚洲 视频| 一级a做视频免费观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| xxx大片免费视频| 国产色爽女视频免费观看| 26uuu在线亚洲综合色| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品第二区| 国产成人精品无人区| 国内精品宾馆在线| 波野结衣二区三区在线| 精品少妇久久久久久888优播| 黄色配什么色好看| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产在线免费精品| 美女福利国产在线| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美性感艳星| av视频免费观看在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久亚洲国产成人精品v| 国国产精品蜜臀av免费| 国产色婷婷99| 在线观看三级黄色| 亚洲欧美色中文字幕在线| 成人国产av品久久久| 国产黄频视频在线观看| 久久人人爽人人片av| 国产精品国产三级专区第一集| 简卡轻食公司| 国产免费一级a男人的天堂| 男人爽女人下面视频在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 男女边摸边吃奶| 久久午夜福利片| 五月开心婷婷网| 日韩强制内射视频| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产精品.久久久| 免费观看无遮挡的男女| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 制服人妻中文乱码| 亚洲欧美成人精品一区二区| av一本久久久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 多毛熟女@视频| av女优亚洲男人天堂| 久久久久久久久久人人人人人人| 99久久综合免费| 久久久久久久久久久免费av| 卡戴珊不雅视频在线播放| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 一级毛片电影观看| 午夜视频国产福利| 一级毛片电影观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美激情 高清一区二区三区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | freevideosex欧美| 妹子高潮喷水视频| 美女主播在线视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 极品人妻少妇av视频| 国产色婷婷99| 亚洲欧洲日产国产| 国产伦理片在线播放av一区|