離子色譜法測(cè)定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的含量

鐘春華　陳剛勝　李孝壁　姜濤　胡春勇

【摘要】目的建立了一種離子色譜法測(cè)定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸含量的分析方法。方法采用陰子交換色譜柱ionex IonPac AS114mm×250mm），10mmol/L氫氧化鈉溶液為流動(dòng)相，流速為1.0mL/min，電導(dǎo)檢測(cè)，柱溫為30%，檢測(cè)器溫度為35℃。結(jié)果檸檬酸在0.05～3.06μg/mL范圍線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9995（n=6），精密度試驗(yàn)的RSD為<0.39%（n=6）；焦磷酸在0.06～4.48μg/mL范圍線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9999（n=6），精密度試驗(yàn)的RSD為<0.39‰（n=6）。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)單、環(huán)境好，靈敏度高，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，能滿(mǎn)足可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】離子色譜；可溶性焦磷酸鐵；檸檬酸；焦磷酸

【中圖分類(lèi)號(hào)】R943 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】2095-0616（2015）21-54-03

可溶性焦磷酸鐵（ferric pyrophosphate）為焦硫酸鈉、檸檬酸二鈉或檸檬酸三鈉或檸檬酸、硫酸鐵水合物組合的混合物，是由Rockwell Medical Inc研發(fā)的一種鐵離子吸收調(diào)節(jié)劑，主要用于接受透析治療的慢性腎病患者的缺鐵性貧血，商品名為T(mén)riferic。該產(chǎn)品中規(guī)定焦磷酸鹽（按焦磷酸鈉計(jì)）含量應(yīng)為10.0%～20.0%，檸檬酸鹽（按檸檬酸鈉計(jì)）的含量應(yīng)為14.0%～30.0%，鐵含量應(yīng)為7.0%～11.0%，對(duì)于鐵的含量測(cè)定采用其他方法進(jìn)行測(cè)定，本文不做研究，主要針對(duì)可溶性焦磷酸鐵中的焦磷酸鹽和檸檬酸鹽的含量進(jìn)行研究。離子色譜法作一種特殊的液相色譜方法，已經(jīng)應(yīng)用在食品、藥品、化工、化妝品、臨床檢測(cè)等多個(gè)行業(yè)，作為檢測(cè)陰離子、陽(yáng)離子及部分有機(jī)酸和有機(jī)胺等測(cè)定手段，已使用的越來(lái)越來(lái)廣泛。離子色譜法在國(guó)外藥典中早被采用，2010中國(guó)藥典中也首次將離子色譜法收入附錄，有許多藥物本身含量或有關(guān)物質(zhì)無(wú)法采用常規(guī)液相方法，而逐漸采用離子色譜方法進(jìn)行測(cè)定，在質(zhì)量控制方面取得了很好的成果。

本研究根據(jù)焦磷酸鐵中主要成分檸檬酸、焦磷酸等的相關(guān)特性，建立了離子色譜測(cè)定可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸鹽、焦磷酸鹽的測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單、環(huán)境污染小，靈敏度高，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，能滿(mǎn)足可溶性焦磷酸鐵中檸檬酸、焦磷酸的測(cè)定。

1實(shí)驗(yàn)器材

電子分析天平，梅特勒XS105；熱電DIONEX ISC-2100離子色譜，Dionex CERS500抑制器，DS6 Heated Conductivity Cell電導(dǎo)檢測(cè)器；CHROMELEON 6.8化學(xué)工作站；采用陰子交換色譜柱ionex IonPac AS114mm×250mm。

試劑：所有化學(xué)試劑均為分析純，檸檬酸鈉（含量大于99.0%，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑股份有限公司）；焦磷酸鈉（含量>98.0%，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑股份有限公司）；氫氧化鈉（含量>99.0%，南京化學(xué)試劑公司）；水為娃哈哈純凈水。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件

采用陰子交換色譜柱（DIONEX IonPac AS114mm×250mm）；采用以10mmol/L氫氧化鈉溶液作為洗脫液，流速為分1.0mL/min；柱溫設(shè)置為30℃，采用抑制性電導(dǎo)檢測(cè)器，檢測(cè)器的溫度設(shè)置為35℃。

2.2系統(tǒng)適用性

本品主要成分為檸檬酸、焦磷酸、鐵，但本方法不研究鐵，只對(duì)檸檬酸、焦磷酸進(jìn)行研究，焦磷酸有可能降解會(huì)產(chǎn)生一定量的磷酸，故此將檸檬酸、焦磷酸、磷酸按進(jìn)行混合考查系統(tǒng)適用性。從表1和圖1中可以看出三個(gè)組分離子分離良好，說(shuō)明該方法的系統(tǒng)適用性很好。

2.3檢測(cè)限、定量限

精密稱(chēng)取檸檬酸、焦磷酸適量，用水溶解，配制成一系列溶液，分別進(jìn)樣至信噪比（峰高/基線噪聲）（3±1）為檢測(cè)限，至信噪比（10±2）為定量限，見(jiàn)表2。

2.4線性關(guān)系試驗(yàn)

按照標(biāo)準(zhǔn)限度濃度配制線l生試驗(yàn)溶液，檸檬酸鈉在0.05～3D6μg/mL，焦磷酸鈉在0.06～4.48μg/mL，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程分別為：A=0.6930C-0.0251、A=0.7274C+0.0046，相關(guān)系數(shù)分別為r=0.9995、r=0.9999，說(shuō)明本方法線性良好，見(jiàn)表3～4。

2.5精密度

精密稱(chēng)取檸檬酸鈉、焦磷酸鈉適量，用水溶解并定量逐漸稀釋成每1mL中含檸檬酸鈉、焦磷酸鈉各約1.5μg、2.2μg的溶液，平行進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，計(jì)算峰面積的平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，見(jiàn)表5～6。

由表5～6的數(shù)據(jù)顯示，6次進(jìn)樣，檸檬酸、焦磷酸的峰面積的平均值分別為1.0224、1.6489，RSD分別為0.39%、0.32%，表明方法的精密度很好。

3討論

焦磷酸、檸檬酸采用常規(guī)的液相方法無(wú)法進(jìn)行控制和檢測(cè)，通過(guò)文獻(xiàn)查閱和試驗(yàn)，最終選擇了離子色譜方法進(jìn)行研究和檢測(cè)，本文選擇抑制性電導(dǎo)檢測(cè)器，采用離子色譜法對(duì)可溶性焦磷酸鐵中的焦磷酸鹽和檸檬酸鹽的含量方法進(jìn)行了研究。由于焦磷酸在溶液狀態(tài)長(zhǎng)期放置時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生一定量的磷酸，會(huì)對(duì)焦磷酸鐵中焦磷酸鹽和檸檬酸的測(cè)定有一定的干擾，故此將磷酸也加入到了專(zhuān)屬性試驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)焦磷酸鹽和檸檬酸、磷酸根的專(zhuān)屬性考察，說(shuō)明分離度能夠滿(mǎn)足要求，且焦磷酸可能降解產(chǎn)生的磷酸鹽不會(huì)干擾測(cè)定，說(shuō)明所建立的方法有很好的專(zhuān)屬性。

通過(guò)檢測(cè)限、定量限的研究，說(shuō)明該方法有較高的響應(yīng)靈敏度，足以滿(mǎn)足檢測(cè)靈明度的要求，另通過(guò)對(duì)焦磷酸和檸檬酸在一定濃度范圍的線性、含量測(cè)定精密度等項(xiàng)目的研究，說(shuō)明方法能有效、準(zhǔn)確的測(cè)定可溶性焦磷酸鐵中焦磷酸鹽和檸檬酸的含量。endprint