樂東擬單性木蘭(Parakmeria lotungensis)古樹種質(zhì)資源保存技術(shù)研究

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(1.貴陽市林業(yè)科技推廣站， 貴州 貴陽 550003； 2.貴州大學(xué)， 貴陽 550000)

樂東擬單性木蘭(Parakmerialotungensis)屬木蘭科擬單性木蘭屬種植物，我國特有種，國家三級珍稀瀕危植物[1]，又名光葉木蘭，為常綠高大喬木，高達30 m，胸徑達90 cm以上，材質(zhì)堅硬，紋理通直，結(jié)構(gòu)緊密，是珍貴的速生優(yōu)質(zhì)用材；樹皮褐色或灰褐色，全株無毛；葉革質(zhì)，倒卵狀橢圓形或窄橢圓形，表面深綠色有蠟質(zhì)層具光澤；花蕾卵形或橢圓、卵形；花單朵頂生，雜性，白色，長圓形，果為聚合果，成熟將沿背縫線開裂，種子裂出，假種皮紅色。主要分布于廣東北部、西南部，湖南東部，江西南部，浙江南部，海南，貴州雷公山、黎平等地，海拔800～1 100 m的山坡林中。對土壤要求不嚴，在酸性、中性、微堿性土壤中皆能正常生長。在土層肥厚濕潤，透氣性良好的立地生長迅速，忌積水和通氣不良。具有較大的溫度適應(yīng)范圍，夏季耐41 ℃高溫，冬季耐-12 ℃的低溫，為擴大其栽培范圍奠定了基礎(chǔ)[2-3]。樂東擬單性木蘭花有特殊的芳香味，曬干后，搗碎時香味更濃，可提取芳香油，花蕾和花均具有一定的藥用價值，能治咳嗽氣喘，胸腹脹滿，瀉痢等癥[4]。

供試的樂東擬單性木蘭是生長在貴陽市花溪區(qū)高坡鄉(xiāng)沙坪村，樹齡約700年的一株古樹；生長在海拔1 340 m(高于全國平均分布340 m)的坡中部，坡度30°，胸徑33.6 cm，樹高11 m，成為該種在貴州的最西分布，也是在全國的最西分布點，對研究木蘭科系統(tǒng)發(fā)育和分類具有極高的科研價值，是非常珍稀的種質(zhì)資源；由于受自然災(zāi)害及人為破壞，該株古樹現(xiàn)只剩小部份側(cè)枝，處于瀕危狀態(tài)，且多年不結(jié)實，難以實現(xiàn)種子繁殖；為保存這一珍稀種質(zhì)資源，重點對這株古樹進行嫁接繁殖技術(shù)研究，達到在短期內(nèi)繁殖擴大其種群數(shù)量，同時也為其它瀕危古樹種質(zhì)資源保存提供依據(jù)。

1 試驗地概況

試驗地位于花溪區(qū)桐木嶺實驗苗圃。該地位于花溪區(qū)南部，地理位置處于北緯26°11′～26°34′，東經(jīng)106°27′～106°52′之間，海拔為1 100 m；屬于亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候，具有明顯的高原性氣候特點，冬暖夏涼，春秋氣候多變，光、熱、水同季；極端最高氣溫34.7 ℃，極端最低氣溫-9.7 ℃，最熱月(7月)平均氣溫23.3 ℃，最冷月(1月)平均氣溫4.7 ℃，年均溫15.2 ℃，年均日照時數(shù)1 214.6 h，無霜期285 d，年均降雨量1 178 mm，相對濕度85%；自然土壤為石灰土，地表常呈黑色、團粒結(jié)構(gòu)，自然肥力高，但土壤淺薄，抗旱能力差。

2 材料與方法

2.1 穗條選擇

嫁接選取的穗條有2種。一種是直接從樂東擬單性木蘭古樹剪取的一年生嫩枝，另一種是從嫁接成活后的嫁接苗上剪取的嫩枝。

2.2 砧木的選擇及定植

砧木選擇親緣關(guān)系較近的白玉蘭及云南擬單性木蘭，嫁接前一年培育容器苗各500株，次年選生長健壯，無病蟲害，苗高40～50 cm，地莖0.65 cm以上，按株行距20 cm×20 cm定植于大田，成活后備用。

2.3 嫁接時間

4月初，砧木開始萌動，芽膨大但尚未萌發(fā)，接穗芽用即將萌動的一年生休眠芽。6月中旬，當(dāng)母樹上的芽成熟之后進行嫁接。10月中旬，在樹液停止流動前，日平均溫度在20 ℃左右時。以上3個時期，每個時期按嫁接方法分芽接，切接，每一個方法各接20株，3個重復(fù)。春接、夏接60 d后，秋接翌年發(fā)芽40 d后統(tǒng)計嫁接成活率和抽梢長度。

2.4 嫁接方法

2.4.1 芽 接

采用帶木質(zhì)部的嵌芽接，此法在早春砧木離皮困難時應(yīng)用，嵌芽接時因接穗芽嵌在砧木切口上，周圍形成層都能接合，嫁接速度快，成活率高，又節(jié)省接穗。其操作過程為：在砧木離地10 cm處去葉，然后由上而下地斜切一刀，切口深入木質(zhì)部，再在切口上方2 cm處，由上而下連同木質(zhì)部往下削，一直削到下部刀口處，取下一切砧木。接穗切削，先在接穗芽的下部向下斜切一刀，然后在芽的上部，由上而下地連同木質(zhì)部往下削到刀口處，兩刀口相遇，芽片即可取下，芽片長約2 cm寬度視接穗粗度而定，要求接穗芽片大小和砧木上切去的部位基本相等。將接穗的芽片嵌入砧木切口中，下邊要插緊，最好使雙方接口上、下、左、右的形成層對齊或是上、下、右(或左)對齊。用寬1～1.5 cm，長40 cm黑色塑料條自下而上地捆綁好接合部，嫁接當(dāng)年芽即萌發(fā)，捆綁時必須把芽露出來。不同芽接3個時期各試驗接20株，3個重復(fù)，共180株。

2.4.2 枝 接

將砧木在離地10 cm處剪斷(或2年生以上的砧木在前一年未接合的砧木上發(fā)的枝條在離地120 cm左右的一年生枝干上樹皮光滑、較直的部位剪斷，以下稱高接)，然后用刀垂直切一切口，切口的寬度大致和接穗相等，即當(dāng)接穗比較粗時切口靠近砧木中心，接穗比較細時，切口偏向一邊，長度一般2.5 cm左右。接穗切削接穗上留2～3個芽，下端削一個約長1.5 cm的大斜面，再在背面削一個馬耳形長約0.5 cm小斜面，把接穗插入砧木的垂直切口中，大斜面向里，使砧穗雙方的形成層對齊，如接穗較細，要對準一邊，接穗露白0.2～0.5 cm，用寬2～3 cm，長30～40 cm的黑色塑料條，將剪口和切口全部包嚴捆緊，接穗頂端用蠟封或塑料條封緊。以上試驗各接20株，3個重復(fù)。早春和生長期嫁接的60 d后，晚秋接的翌年松綁后40 d統(tǒng)計成活率、生長情況，并記載。

2.5 光照試驗

嫁接用的捆綁帶為寬2 cm左右的黑色和白色2種塑料帶，用枝接方法各接60株，接后15 d各抽5株打開傷口觀察愈傷組織生長情況，在顯微鏡下觀察愈傷組織，細胞排列松緊，形狀大小，有無葉綠素，并記載。

2.6 嫁接苗的管理

1) 除萌蘗。嫁接成活及剪砧后，砧木會長出許多萌蘗，與接穗爭搶養(yǎng)分和水份，影響成活率，必須及時除去砧木的萌蘗，除萌工作一般進行3～4次。

2) 解捆綁。塑料條會影響接穗和砧木的生長，必須在適時解除，一般在接穗生長到15 cm左右，并明顯加粗時，逐漸解開塑料條，以免接口生長不牢固而使接穗苗折斷。

3) 立支柱。結(jié)合松解塑料條，應(yīng)在砧木的接穗處綁1根支柱，把新梢綁在支柱上，以防人為碰傷和風(fēng)折。

4) 防治病蟲害。對蟲害可用2.5%高效氯氰脂1∶1 000防治，病害可用25%多菌靈1∶1 000防治。

5) 加強水肥管理。嫁接后的植株生長旺盛，喜肥需水，應(yīng)及時施肥和澆水，雨季注意排澇，以促進嫁接苗的生長。

2.7 實驗設(shè)計

本試驗采用隨機區(qū)組設(shè)計，按3個區(qū)組平均值記。

3 結(jié)果與分析

3.1 砧木對嫁接成活的影響

從表1可以看出，白玉蘭用古樹一年生枝條芽接成活率為20.7%，云南擬單性木蘭為1.7%，前者比后者高19%。用嫁接苗成活后的一年生枝條嫁接在白玉蘭上成活率為52.2%，比古樹枝條嫁接成活率提高31.5%。云南擬單性木蘭用古樹一年生枝條芽接成活率僅1.7%，用嫁接苗成活后的一年生枝條嫁接成活率13.5%。說明云南擬單性木蘭與古樹樂東擬單性木蘭親緣關(guān)系雖近，但親和力較差。而白玉蘭與古樹樂東擬單性木蘭親和力較強。

經(jīng)方差分析，古樹一年生枝條在2種母樹上成活率及新梢長差異極顯著，以白玉蘭作砧木嫁接成活率較高。另外高接(接口離地120 cm以上)成活后，樹冠形成早，比矮接(離地10 cm)提前2年。

表1 不同砧木對嫁接成活的影響

砧木接穗芽接數(shù)(株)成活數(shù)(株)成活率(%)新梢長(cm)云南擬單木蘭古樹一年生枝條6011．713．1古樹嫁接成活后枝條608．113．523．2白玉蘭古樹一年生枝條6012．420．717．3古樹嫁接成活后枝條6031．352．227．8F值21．310．8顯著性????

注：成活數(shù)為3個重復(fù)的平均成活數(shù)；在0.01水平下，*表示顯著，**表示極顯著。

3.2 不同嫁接時期和不同嫁接方法對成活率的影響

不同嫁接時期和不同嫁接方法對嫁接成活率的影響分析結(jié)果如圖1。

圖1 不同嫁接時期和不同嫁接方法對成活率影響曲線圖

從圖1可以看出，對枝接和芽接成活率進行比較，枝接成活率比芽接成活率分別高36.9%、12.9%、33.2%。因為古樹樂東擬單性木蘭嵌芽接為單芽，有的芽接后能發(fā)芽，而有的芽雖保持綠色，但長期不發(fā)芽，成韁芽，說明有部份芽生命力弱，所以芽接成活低。而枝接上每個接穗有2～3個芽，其中只要1～2個芽生命力強，嫁接成活幾率就大，因此枝接成活率比芽接高。

對不同時期嫁接成活率進行比較，嫁接的外界條件主要有4個，溫度、濕度、空氣和光照，早春樹液開始流動時，氣溫較低，愈合慢，接穗就會在愈合成活之前抽開，無論芽接和枝接成活率會受到影響。生長季嫁接在6～7月，夏季高溫達30 ℃左右(在陽光直射下溫度更高)，不利于愈合。晚秋(10月)，溫度適宜(20 ℃左右)，避開高溫天氣，當(dāng)年生枝條上的芽生命力強，愈合快，芽當(dāng)年雖不萌發(fā)，但翌年春季溫度回升后，芽接剪砧、枝接松綁后芽很快萌發(fā)，嫁接成活率比春、夏季高。

3.3 光照對愈傷組織生長的影響

不同光照條件對愈傷組織生長的影響有一定的差異，光照對愈傷組織生長影響的實驗結(jié)果統(tǒng)計分析見表2。

表2 光照對愈傷組織生長的影響

接口光照條件嫁接數(shù)(株)成活數(shù)(株)成活率(%)愈傷組織發(fā)生情況有光(白色塑料帶)6031．252．1生長慢，少，淺綠色，質(zhì)地緊密避光(黑色塑料帶)6049．483．2生長快，多，白色、質(zhì)地疏松

注：成活數(shù)為3個重復(fù)的平均成活數(shù)。

表2研究結(jié)果表明：用黑塑料帶包扎，只要使砧穗接合面處于較暗的環(huán)境中，從形成層處長出的愈傷組織生長快而多，呈白色，質(zhì)地疏松，在顯微鏡下觀察細胞的個頭較大，排列疏松，處于分裂狀態(tài)的細胞多；而處于光照下的愈傷組織生長慢，數(shù)量少，而且表面光滑，呈淺綠色，在顯微鏡下觀察細胞個頭較小，排列較緊，處于分裂狀態(tài)的細胞較少。所以用黑色塑料條包扎效果較好，比白色塑料條包扎提高成活率31.1%，新梢長度，分枝數(shù)比白色塑料帶包扎高1～2倍[5]。方差分析表明在0.01水平下極顯著。

4 結(jié)論與討論

4.1古樹樂東擬單性木蘭，通過嫁接，砧木選擇親緣關(guān)系較近的白玉蘭為宜，而云南擬單性木蘭用作砧木，親和力較差，是否和生理活動不協(xié)調(diào)有關(guān)，有待進一步研究。

4.2古樹樂東擬單性木蘭嫁接時間以晚秋較好，早春次之，夏季較差。早春氣溫較低，砧穗愈合需時間較長，穗芽易被抽干，成活率較低。生長期6—7月，溫度高達30 ℃以上，陽光直射嫁接口處溫度更高，不易愈合，嫁接不易成活。晚秋溫度適宜，接穗芽生命力強，嫁接后砧穗容易愈合，翌年氣溫升高，容易發(fā)芽，抽梢。

4.3由于古樹芽的成熟度不一致，有的芽成熟后易發(fā)芽，而有的芽很難發(fā)芽，而芽接由于單芽有的芽發(fā)育不全，不發(fā)芽，因此影響成活率。枝接用2～3個飽滿芽，只要其中1～2個芽生命力強，嫁接就易成活，所以枝接成活率高。另外，高接比矮接樹冠提早2年形成?？商崆俺銎远ㄖ?，供城市綠化用。

4.4砧穗接合口處在黑暗條件下，愈傷組織容易形成，愈合快，細胞容易融合，嫁接成活率高。

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4.5砧木、接穗富有生活力，并且雙方有親和力是嫁接成活的基礎(chǔ)，外加合適的嫁接時期，溫度、接口濕度、空氣、黑暗以及良好的嫁接技術(shù)等措施，可以提高嫁接成活率。

4.6為了保持古樹的遺傳特性和功能的穩(wěn)定，嫁接、扦插、組織培養(yǎng)可以同時進行，只要得到少量苗木，就可以使古樹重新返老還童。

[1]中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒定[M].北京:科學(xué)出版.

[2]張惠良,史紅霞,張往祥.樂東擬單性木蘭苗木生長特性和育苗技術(shù)[J].浙江林業(yè)科技,2003(6):44-46.

[3]田淑娟,喻理飛.珍稀瀕危植物單性木蘭(Kmeriaseptentrionalis)脅迫條件下的種子發(fā)芽特性研究[J].種子,2010,29(3):4-8.

[4]陳炳華,王明茲,劉劍秋.樂東擬單性木蘭花部揮發(fā)油的化學(xué)成分及其抑菌活性[J].武漢植物研究,2002,20(3):229-232.

[5]李興龍,陸忠權(quán),周繼青.“獨山秀峰牌”西紅柿幼苗嫁接技術(shù)應(yīng)用研究[J].種子,2012,31(4):121-126.