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    石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對配對前后水煎液中揮發(fā)性成分的含量變化分析

    2016-01-13 03:09:18張慧,王穎,侯林
    藥學(xué)研究 2015年5期
    關(guān)鍵詞:配伍遠(yuǎn)志石菖蒲

    石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對配對前后水煎液中揮發(fā)性成分的含量變化分析

    張慧,王穎,侯林

    (山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,山東 濟(jì)南 250014)

    摘要:目的研究經(jīng)典藥對石菖蒲-遠(yuǎn)志配伍前后水煎液中揮發(fā)性成分的含量變化。方法煎煮法分別獲得石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對和單味藥材的水煎液,氣相色譜法(GC)測定水煎液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量。結(jié)果石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對中α-細(xì)辛醚的含量為0.048%,β-細(xì)辛醚的含量為0.812%;石菖蒲單煎中α-細(xì)辛醚的含量為0.049%,β-細(xì)辛醚的含量1.012%;結(jié)論石菖蒲、遠(yuǎn)志配伍后,α-細(xì)辛醚含量無明顯變化,β細(xì)辛醚含量顯著降低(P<0.05)。

    關(guān)鍵詞:石菖蒲;遠(yuǎn)志;配伍;α- 細(xì)辛醚;β-細(xì)辛醚

    基金項(xiàng)目:山東中醫(yī)藥大學(xué)2013年SRT項(xiàng)目(No.2013277),本項(xiàng)目在山東中醫(yī)藥大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練平臺完成

    作者簡介:張慧,女,研究方向:制藥工程,E-mail:814793244@qq.com

    通訊作者:侯林,男,研究方向:中藥新藥的研發(fā)研究,Tel:0531-89628597,E-mail:houlin3057@163.com

    中圖分類號:R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

    Analysis of volatilis components′ variation in decoction before and afterAcorusTatarinowii

    Schott andPolygalatenuifoliaWilld matched-pairs

    ZHANGHui,WANGYing,HOULin

    (ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jinan250014,China)

    Abstract:ObjectiveTo research the volatilis components′ variation in decoction before and after Acorus Tatarinowii Schott and Polygala tenuifolia Willd matched-pairs.MethodsThe decoction of matched pair of Acorus Tatarinowii Schott and Polygala tenuifolia Willd and each herb were extracted by bulliens aqua,the contents of α-asaricin and β-asaricin in the decoction were determined by GC.ResultsThe contents of α-asaricin and β-asaricin in the decoction of matched pair of Acorus Tatarinowii Schott and Polygala tenuifolia Willd were 0.048% and 0.812%.The contents of α-asaricin and β-asaricin in the decoction of Acorus Tatarinowii Schott were 0.049% and 1.012%.ConclusionAfter the match of Acorus Tatarinowii Schott and Polygala tenuifolia Willd,the content of β-asaricin was decreased obviously(P<0.05),but there was not obviously change of α-asaricin.

    Key words:AcorusTatarinowiiSchott;PolygalatenuifoliaWilld;Matched-pairs;α-asaricin;β-asaricin

    石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對出自《圣濟(jì)總錄》,名曰遠(yuǎn)志湯,遠(yuǎn)志通于腎交于心,石菖蒲開竅啟閉寧神,二藥伍用,通心竅、交心腎,益腎、健腦、聰智,開竅、啟閉、寧神之力增強(qiáng)[1]。揮發(fā)油是石菖蒲的主要藥效物質(zhì),α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚是石菖蒲揮發(fā)油的主要組成部分,分別占揮發(fā)油的6.35%和66.15%左右[2],本研究擬采用水煎煮法分別對石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對和單味藥材進(jìn)行提取,GC法測定水煎液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量,以期分析配伍對α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚含量的影響。

    1試驗(yàn)儀器與試劑

    安捷倫7890型氣相色譜儀;色譜工作站GC-MS postrun Aralysisi;FA2004型電子天平(上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司);500 mL電熱套(山東鄄城新華電熱儀器廠);α-細(xì)辛醚對照品(Chromadex,98.9%);β-細(xì)辛醚對照品(Dr.Ehrenstorfer,70.9%);遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志PolygalatenuifoliaWilld的干燥根;石菖蒲為天南科植物石菖蒲AcorusTatarinowiiSchott的干燥根;乙腈為色譜純;其他試劑均為分析純。

    2試驗(yàn)方法

    2.1色譜條件[3,4]色譜柱:Agilent HP-5,進(jìn)樣口溫度:250 ℃;溶劑延遲2 min;載氣:氮?dú)猓涣髁浚? mL·min-1。程序升溫條件:初始溫度60 ℃,保持5 min,以15 ℃·min-1升至280 ℃,保持1 min,進(jìn)樣量0.5 μL,分流比5∶1。

    2.2對照品溶液的制備精密稱定98.9%的α-細(xì)辛醚對照品8.69 mg,置10 mL的容量瓶中得0.859 mg·mL-1的α-細(xì)辛醚對照品溶液,精密稱定70.9%的β-細(xì)辛醚對照品9.73 mg,置10 mL的容量瓶中得0.690 mg·mL-1的β-細(xì)辛醚對照品溶液。

    2.3供試品溶液的制備取石菖蒲和遠(yuǎn)志飲片各25 g,置于圓底燒瓶中,加10倍量的水浸泡30 min,煎煮20 min,濾過,濾渣加8倍量的水煎煮15 min,濾過,合并濾液定容至1 000 mL,既得石菖蒲遠(yuǎn)志合煎液。同法制備石菖蒲的單煎液。

    2.4方法學(xué)考察線性關(guān)系考察:取α-細(xì)辛醚對照品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件,進(jìn)行測定,自動進(jìn)樣器分別進(jìn)樣0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 μL,分流比5∶1,以峰面積Y對質(zhì)量X進(jìn)行線性回歸,得回歸方程Y=5 037.9X+2.053 4,r=0.999 9(n=6),α-細(xì)辛醚在0.001 7~0.017 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性相關(guān)。取β-細(xì)辛醚對照品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件,進(jìn)行測定,自動進(jìn)樣器分別進(jìn)樣0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 μL,分流比5∶1,以峰面積Y對質(zhì)量X進(jìn)行線性回歸,得回歸方程Y=4 871.4X+1.553 4,r=0.999 5(n=6),β-細(xì)辛醚在0.013 8~0.138 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性相關(guān)。

    精密度考察:分別取2種對照品溶液,按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測定,平行操作5次,α-細(xì)辛醚的峰面積RSD為0.98%,β-細(xì)辛醚的峰面積RSD為1.26%,表明儀器的精密度良好。

    穩(wěn)定性考察:分別取兩種供試品溶液,室溫放置,分別在0、2、4、8、12、18、24 h時,取樣,按照“2.1”項(xiàng)下的方法測定峰面積,α-細(xì)辛醚的峰面積RSD為1.64%,β-細(xì)辛醚的峰面積RSD為2.13%,表明供試品溶液在室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定。

    加樣回收試驗(yàn):精密量取石菖蒲供試液10 mL(5份),分別加入α-細(xì)辛醚對照品0.2 mg,β-細(xì)辛醚對照品2.0 mg,按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測定,α-細(xì)辛醚的回收率為95.22%,RSD=2.31%(n=5),β-細(xì)辛醚的回收率為96.35%,RSD=2.07%(n=5)。

    2.5樣品含量測定分別取供試品溶液,按照按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測定,計(jì)算石菖蒲-遠(yuǎn)志合煎和石菖蒲單煎液中的α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚含量,試驗(yàn)結(jié)果見圖1、表1。

    圖1 含量測定色譜圖

    樣品名α-細(xì)辛醚含量(%)β-細(xì)辛醚含量(%)石菖蒲單煎0.0491.012石菖蒲-遠(yuǎn)志合煎0.0480.812*

    注:與石菖蒲單煎比較,*P<0.05

    結(jié)果顯示,石菖蒲與遠(yuǎn)志配伍后,水煎液中α-細(xì)辛醚的含量未發(fā)生顯著變化,β-細(xì)辛醚含量顯著下降(P<0.05)。

    3討論

    石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對配伍前后的物質(zhì)含量變化是研究其配伍機(jī)制的基礎(chǔ)。目前在主要成分的變化方面進(jìn)行了以下研究:房敏峰等[5]用石油醚提取藥對遠(yuǎn)志-石菖蒲及其單味藥材,采用GC-MS技術(shù),在 NIST98標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫中檢索,確定主要成分及相對含量并進(jìn)行比較;楊波等[6]分別用水蒸氣蒸餾法和索氏提取法提取藥對遠(yuǎn)志-石菖蒲及其單味藥材中的揮發(fā)性和脂溶性成分,GC-MS分析其提取物所含成分;張文娟等[7]以遠(yuǎn)志皂苷元和α-細(xì)辛醚為指標(biāo),采用甲醇超聲提取法分別對遠(yuǎn)志、石菖蒲和遠(yuǎn)志-石菖蒲藥對進(jìn)行提取,HPLC法測定經(jīng)典藥對前后的含量變化。以上研究從現(xiàn)代中藥化學(xué)的方面考慮,采用了有機(jī)溶劑或水蒸氣蒸餾的方法提取揮發(fā)油成分,而忽視了石菖蒲-遠(yuǎn)志藥對是在傳統(tǒng)的煎煮法的前提下使用的。本研究在研究其配伍機(jī)制的時候,考慮到用藥傳統(tǒng),以水煎煮的方法分別獲得單用和伍用的試驗(yàn)數(shù)據(jù),可以為其配伍機(jī)制的闡述提供更合理的支撐。

    研究結(jié)果顯示,石菖蒲和遠(yuǎn)志配伍以后,α-細(xì)辛醚的含量未發(fā)生顯著變化,β-細(xì)辛醚含量顯著下降(P<0.05)。β-細(xì)辛醚是石菖蒲的主要藥效成分,也是潛在毒性物質(zhì),歐盟對其使用有明確的上限規(guī)定[8]。本研究顯示石菖蒲遠(yuǎn)志配伍后,其含量下降,可能與其配伍減毒相關(guān)。石菖蒲、遠(yuǎn)志的成分復(fù)雜,配伍對其他成分的影響還需要進(jìn)一步研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1]呂景山.施今墨對藥[M].第3版.北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:265-266.

    [2]魏剛,方永奇,柯雪紅,等.石菖蒲開竅醒神物質(zhì)基礎(chǔ)的藥學(xué)系列研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(8):51-53.

    [3]姬闖,王瑩,侯林,等.不同提取方法制備石菖蒲揮發(fā)性成分的GC-MS比較研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2014,41(1):136-138.

    [4]崔清華,王瑩,侯林,等.響應(yīng)面分析法優(yōu)選石菖蒲揮發(fā)油提取工藝[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(15):62-65.

    [5]房敏峰,張文娟,李云峰,等.GC-MS分析藥對遠(yuǎn)志-石菖蒲中的脂溶性成分[J].中國藥業(yè),2009,18(23):3-5.

    [6]楊波,劉娜,季新燕,等.藥對遠(yuǎn)志-石菖蒲揮發(fā)性與脂溶性成分的GC-MS 初步研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2012,39(8):1584-1586.

    [7]張文娟,鄭曉暉,房敏峰,等.經(jīng)典藥對遠(yuǎn)志-石菖蒲配伍前后指標(biāo)成分的變化分析[J].中國藥業(yè),2009,18(15):6-7.

    [8]王瑩.石菖蒲抗老年癡呆藥效物質(zhì)提取純化工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].濟(jì)南:山東中醫(yī)藥大學(xué),2012.

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