過瘤胃蛋氨酸對奶牛瘤胃體外發(fā)酵及泌乳奶牛生產(chǎn)性能的影響

王劍飛王夢芝馮春燕張 鑫張 軍洪 偉王洪榮

（1．上海美農(nóng)生物科技股份有限公司，上海201807；2．揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009；3．揚(yáng)州市揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司，揚(yáng)州225004）

?

過瘤胃蛋氨酸對奶牛瘤胃體外發(fā)酵及泌乳奶牛生產(chǎn)性能的影響

王劍飛1王夢芝2?馮春燕1張 鑫2張 軍3洪 偉1王洪榮2?

（1．上海美農(nóng)生物科技股份有限公司，上海201807；2．揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009；3．揚(yáng)州市揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司，揚(yáng)州225004）

摘 要：本文主要研究過瘤胃蛋氨酸對奶牛瘤胃體外發(fā)酵及泌乳奶牛生產(chǎn)性能的影響。體外發(fā)酵試驗(yàn)：分別在培養(yǎng)液中添加蛋氨酸、過瘤胃蛋氨酸，以無添加為對照，在培養(yǎng)0、2、4、8、12、16 和24 h測定pH以及氨態(tài)氮、細(xì)菌蛋白和原蟲蛋白含量；動(dòng)物試驗(yàn)：選用30頭健康的泌乳荷斯坦奶牛采用隨機(jī)區(qū)組分為3組，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加13．50 g／（頭·d）蛋氨酸、30．00 g／（頭·d）過瘤胃蛋氨酸，以無添加為對照。預(yù)試期7 d，正試期42 d。結(jié)果表明：1）體外發(fā)酵試驗(yàn)，培養(yǎng)液pH、氨態(tài)氮和細(xì)菌蛋白含量在組間都沒有顯著差異（P＞0．05）；與對照組相比，過瘤胃蛋氨酸組和蛋氨酸組均顯著提高了培養(yǎng)液原蟲蛋白含量（P＜0．05），但2個(gè)試驗(yàn)組間沒有顯著差異（P＞0．05）。2）動(dòng)物試驗(yàn)，第28天時(shí)，以及乳蛋白率和乳脂率在3組間都沒有顯著的差異（P＞0．05）。第42天時(shí)，過瘤胃蛋氨酸組的乳蛋白率和乳脂率顯著高于其他2組（P＜0．05），而該組的血清尿素氮和乳尿素氮含量顯著低于其他2組（P＜0．05）；另外，該組的飼糧粗蛋白質(zhì)消化率也顯著高于其他2組（P＜0．05）。綜上，過瘤胃蛋氨酸對奶牛瘤胃體外發(fā)酵沒有顯著影響，但可在一定程度上提高奶牛乳蛋白率和乳脂率和飼糧粗蛋白質(zhì)的消化率。

關(guān)鍵詞：過瘤胃蛋氨酸；奶牛；粗蛋白質(zhì)消化率；乳蛋白率

蛋氨酸是泌乳奶牛的第一或第二限制性氨基酸［1］，影響奶牛蛋白質(zhì)營養(yǎng)供給和泌乳性能。有研究表明，牛奶中乳蛋白的含量比產(chǎn)奶量對補(bǔ)充賴氨酸（Lys）和蛋氨酸（Met）的反應(yīng)更敏感，尤其是在奶牛達(dá)到產(chǎn)奶高峰以后［2］。但由于奶牛瘤胃微生物對飼糧中氨基酸的降解，如原蟲和細(xì)菌的脫氨基作用［3－4］，在奶牛飼糧中直接添加蛋氨酸很難調(diào)控到達(dá)小腸的限制性氨基酸水平。因此，如何使得蛋基酸能夠到達(dá)小腸被吸收利用對飼糧蛋白質(zhì)利用及乳蛋白含量的提高有著重要的意義。由于奶牛飼糧中直接添加蛋氨酸在進(jìn)入瘤胃后，會(huì)被瘤胃微生物部分降解，而不能完全到達(dá)小腸滿足宿主對蛋氨酸的需求［5－6］。過瘤胃蛋氨酸則可以保護(hù)蛋氨酸在瘤胃內(nèi)維持穩(wěn)定的狀態(tài)，并使其在小腸內(nèi)釋放并被吸收，從而滿足宿主對蛋氨酸的營養(yǎng)需要。部分研究也證實(shí)，不同保護(hù)方法制備的過瘤胃蛋氨酸在試驗(yàn)狀態(tài)下，不同程度地提高了試驗(yàn)?zāi)膛５漠a(chǎn)奶量和奶品質(zhì)［7－8］。但對于過瘤胃蛋基酸的過瘤胃保護(hù)率、小腸釋放率以及對飼糧粗蛋白質(zhì)消化率影響的系統(tǒng)研究還不多見。本研究以噴霧冷卻技術(shù)物理包被的過瘤胃蛋氨酸為研究對象，研究過瘤胃蛋氨酸在奶牛消化道不同部位的保護(hù)和釋放性能，對瘤胃體外發(fā)酵性能以及泌乳奶牛氮素利用的影響，以期為奶牛生產(chǎn)中過瘤胃蛋氨酸的研發(fā)和應(yīng)用提供一些參考。

1　材料與方法

1．1 試驗(yàn)材料的瘤胃保護(hù)率、小腸消化率

過瘤胃蛋氨酸為上海美農(nóng)生物科技股份有限公司產(chǎn)品，蛋氨酸有效含量是45%。

采用尼龍袋法測定瘤胃保護(hù)率。試驗(yàn)選用揚(yáng)州市揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司所屬奶牛場的裝有瘤胃瘺管的3頭泌乳奶牛為試驗(yàn)動(dòng)物。在早飼后1 h，通過瘤胃瘺管將尼龍袋放進(jìn)瘤胃內(nèi)。分別在0、2、4、8、12和24 h取出尼龍袋，測定瘤胃保護(hù)率。計(jì)算公式：

P＝a＋b（1－e－ct）［9］。

式中：P為瘤胃保護(hù)率，a、b和c分別為快速降解部分、慢速降解部分和慢速降解部分的降解速率常數(shù)。測得過瘤胃蛋氨酸的瘤胃保護(hù)率為80．63%。

采用體外法測定小腸消化率。取過瘤胃蛋氨酸瘤胃非降解產(chǎn)物（在瘤胃液中降解16 h），先加入胃蛋白酶溶液（pH＝2）處理1 h，再用小腸混合溶液（pH＝7．8）處理24 h，之后檢測消化液中蛋氨酸的含量，推算產(chǎn)品中蛋氨酸的消化率［10］。測得小腸消化率為91．66%。

1．2 體外發(fā)酵試驗(yàn)

1．2．1 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選用揚(yáng)州市揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司所屬奶牛場的裝有瘤胃瘺管的3頭泌乳奶牛作為體外發(fā)酵試驗(yàn)瘤胃液供體?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，采用全混合日糧（TMR）形式飼喂。

1．2．2 體外發(fā)酵試驗(yàn)

晨飼前，通過瘤胃瘺管從3頭瘺管奶牛瘤胃內(nèi)采取瘤胃液各300 mL，過4層紗布后濾液混合均勻，與預(yù)先配制好的唾液鹽溶液按1∶2的比例混合，于39℃水浴中進(jìn)行瘤胃體外發(fā)酵試驗(yàn)。具體參考Menke等［11］的方法。

1．2．3 試驗(yàn)分組與樣品采集

試驗(yàn)分為蛋氨酸組（0．45 g蛋氨酸）、過瘤胃蛋氨酸組（1 g過瘤胃蛋氨酸）和對照組，每組設(shè)置5個(gè)重復(fù)。蛋氨酸組與過瘤胃蛋氨酸組蛋氨酸含量一致。分別在發(fā)酵試驗(yàn)開始后的0、2、4、8、12、16和24 h取培養(yǎng)液樣品。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1　Composition and nutrient levels of the basal diet（DM basis）　%

1．2．4 測定指標(biāo)

pH：pHS－3C型pH計(jì)于采樣后立即測定；氨態(tài)氮（NH3?N）含量：酚－次氯酸鈉比色法［12］測定；細(xì)菌和原蟲蛋白含量：TCA法測定。

1．3 動(dòng)物試驗(yàn)

1．3．1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧

于2013年12月—2014年1月在揚(yáng)州市揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司所屬的奶牛場進(jìn)行。選用30頭日產(chǎn)奶量（30±3）kg、胎次為1～2胎之間、泌乳天數(shù)（60±3）d、健康狀況良好的荷斯坦泌乳奶牛為試驗(yàn)動(dòng)物。據(jù)胎次、產(chǎn)犢日期、產(chǎn)奶量相似的原則，采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)分為3組：對照組（不加蛋基酸）、蛋氨酸組［添加DL－蛋氨酸13．50 g／（頭·d），有效含量是99%，上海禾豐飼料有限公司］、過瘤胃蛋氨酸組［添加過瘤胃蛋氨酸30．00 g／（頭·d），有效含量是45%，上海美農(nóng)生物科技股份有限公司］。試驗(yàn)?；A(chǔ)飼糧與體外試驗(yàn)瘤胃液供體牛相同（表1），由試驗(yàn)所在奶牛場提供。預(yù)試期7 d，正試期42 d。

1．3．2 樣品采集

1．3．3．1 牛奶樣品采集

在第1、28、42天采奶樣，每天分別在（08：00、14：30、22：30）3次取奶樣，3次奶樣按照4∶3∶3的比例混合，混合樣用于乳脂率、乳蛋白率和乳尿素氮含量的檢測。同時(shí)每天記錄產(chǎn)奶量，計(jì)算日均產(chǎn)奶量。

1．3．3．2 血樣采集

在第1、28、42天，晨飼前尾靜脈采血2．5 mL，放于促凝管中分離血清。用于檢測血清尿素氮和總蛋白含量。

1．3．3．3 飼糧粗蛋白質(zhì)消化率樣品采集

在第40、41、42天連續(xù)3 d收糞樣，混合均勻3 d的樣品，檢測其中粗蛋白質(zhì)和鹽酸不溶灰分含量。同樣收集與處理飼糧樣。

1．3．4 樣品檢測與分析

1．3．4．1 乳品質(zhì)分析

在揚(yáng)大康源乳業(yè)有限公司采用丹麥福斯120乳品檢測儀（紅外線）檢測乳脂率、乳蛋白率。采用南京建成生物工程研究所尿素氮試劑盒（脲酶法），利用連續(xù)波長酶標(biāo)儀檢測尿素氮含量。

1．3．4．2 血樣分析

血清中的生化指標(biāo)在揚(yáng)州市疾病預(yù)防控制中心用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測。

1．3．4．3 飼糧粗蛋白質(zhì)消化率的檢測

鹽酸不溶灰分法檢測粗蛋白質(zhì)消化率。凱氏定氮法測定飼糧和糞樣中粗蛋白質(zhì)含量。飼糧粗蛋白質(zhì)消化率（%）＝［1－（飼糧鹽酸不溶灰分含量／糞鹽酸不溶灰分含量）×（糞粗蛋白質(zhì)含量／飼糧粗蛋白質(zhì)含量）］×100。

1．4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel初步整理后，采用SPSS 17．0軟件中的ANOVE進(jìn)行方差分析，Turkey’s法進(jìn)行多重比較。

2　結(jié) 果

2．1 過瘤胃蛋氨酸對瘤胃體外發(fā)酵的影響

由表2可見，蛋氨酸組和過瘤胃蛋氨酸組對培養(yǎng)液pH的影響不顯著（P＞0．05）。體外試驗(yàn)，隨著時(shí)間的延長培養(yǎng)液pH降低。培養(yǎng)液NH3?N含量從0 h開始降低，4 h最低，然后上升至24 h結(jié)束；3組不同時(shí)間點(diǎn)的NH3?N含量差異不顯著（P＞0．05）。

表2　過瘤胃蛋氨酸對瘤胃體外發(fā)酵培養(yǎng)液pH和NH3?N含量的影響Table 2　Effects of rumen protected methionine on pH and NH3?N content in culture medium after in vitro ruminal fermentation

由表3可見，各組培養(yǎng)液原蟲蛋白含量均呈先降低后升高再降低再升高的變化趨勢，在24 h，過瘤胃蛋氨酸組和蛋氨酸組的原蟲蛋白含量皆顯著高于對照組（P＜0．05），但過瘤胃蛋氨酸組和蛋氨酸組間的差異不顯著（P＞0．05）。各組的培養(yǎng)液細(xì)菌蛋白含量隨培養(yǎng)時(shí)間延長，均呈現(xiàn)先降低后升高再降低再升高的變化趨勢，但組間沒有顯著差異（P＞0．05）。

表3　過瘤胃蛋氨酸對瘤胃體外發(fā)酵培養(yǎng)液原蟲蛋白和細(xì)菌蛋白含量的影響Table 3　Effects of rumen protected methionine on protozoal protein and bacterial protein contents in culture medium after in vitro ruminal fermentation　mg／mL

2．2 過瘤胃蛋氨酸對奶牛產(chǎn)奶量、乳脂率和乳蛋白率的影響

由表4可見，過瘤胃蛋氨酸組的產(chǎn)奶量在數(shù)值上比對照組高1．22 kg，比蛋氨酸組高2．09 kg。從整個(gè)試驗(yàn)期看，過瘤胃蛋氨酸組和蛋氨酸組的乳脂率是不斷升高的。試驗(yàn)的第1天，3組的乳脂率沒有顯著差異（P＞0．05）；試驗(yàn)的第28天，過瘤胃蛋氨酸組的乳脂率在數(shù)值上比對照組的提高4．07%，比蛋氨酸組的提高2．87%；試驗(yàn)的第42天，過瘤胃蛋氨酸組的乳脂率比對照組的提高6．65%（P＜0．05）、比蛋氨酸組的提高3．94%（P＜0．05）。蛋氨酸組和對照組的乳蛋白率在整個(gè)試驗(yàn)期變化不大，而過瘤胃蛋氨酸組的乳蛋白率不斷提高。試驗(yàn)的第1天，3組的乳蛋白率均在3．04%左右；試驗(yàn)的第28天，過瘤胃蛋氨酸組的乳蛋白率在數(shù)值上高于其他2組；試驗(yàn)的第42天，過瘤胃蛋氨酸組的乳蛋白率顯著高于對照組4．23% （P＜0．05），顯著高于蛋氨酸組3．89%（P＜0．05）。

表4　過瘤胃蛋氨酸對奶牛產(chǎn)奶量、乳脂率和乳蛋白率的影響Table 4　Effects of rumen protected methionine on milk yield，and percentages of milk fat and milk protein of dairy cows

2．3 過瘤胃蛋氨酸對奶牛氮代謝和飼糧粗蛋白質(zhì)消化率的影響

由表5可見，過瘤胃蛋氨酸組的乳尿素氮含量比蛋氨酸組低24．27%（P＜0．05），比對照組低15．97%（P＜0．05），而蛋氨酸組和對照組間沒有顯著差異（P＞0．05）。血清尿素氮含量在對照組持續(xù)在17．50 mg／dL左右變化；在蛋氨酸組有所降低；而在過瘤胃蛋氨酸組則由開始的17．43 mg／dL降低到了第42天時(shí)的14．98 mg／dL。試驗(yàn)的第1天，3組的血清尿素氮含量無顯著差異（P＞0．05）；試驗(yàn)第28天，過瘤胃蛋氨酸組比對照組低14．80% （P＜0．05）、比蛋氨酸組低6．06%（P＞0．05）；試驗(yàn)第42天，過瘤胃蛋氨酸組比對照組低15．08%（P＜0．05）、比蛋氨酸組低7．81%（P＜0．05），而蛋氨酸組和對照組沒有顯著差異（P＞0．05）。血清總蛋白含量在3組間沒有顯著差異（P＞0．05）。

表5　過瘤胃蛋氨酸對奶牛乳、血清尿素氮和血清總蛋白含量的影響Table 5　Effects of rumen protected methionine on milk and serum urea nitrogen and serum total protein contents of dairy cows

由表6可見，飼糧鹽酸不溶灰分含量在0．93%左右，粗蛋白質(zhì)含量在17．80%左右。過瘤胃蛋氨酸組的糞鹽酸不溶灰分含量高于蛋氨酸組和對照組，差異不顯著（P＞0．05）；該組的糞粗蛋白質(zhì)含量顯著低于蛋氨酸組和對照組（P＜0．05）。因而，過瘤胃蛋氨酸組的飼糧粗蛋白質(zhì)消化率比對照組的顯著提高8．50%（P＜0．05），比蛋氨酸組的顯著提高9．38%（P＜0．05）。

表6　過瘤胃蛋氨酸對奶牛飼糧粗蛋白質(zhì)消化率的影響Table 6　Effects of rumen protected methionine on the digestibility of dietary crude protein of dairy cows　%

3　討 論

3．1 過瘤胃蛋氨酸對瘤胃體外發(fā)酵的影響

瘤胃發(fā)酵的正常是保證宿主動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能的前提。瘤胃內(nèi)pH、NH3?N含量可以部分反映瘤胃內(nèi)環(huán)境狀況，是目前研究瘤胃發(fā)酵的主要發(fā)酵指標(biāo)［13］。瘤胃液pH的一般變化范圍為5．5～7．5，引起其波動(dòng)的根本原因是飼糧組成和飼糧的營養(yǎng)含量［13］。本研究模擬瘤胃發(fā)酵內(nèi)環(huán)境，發(fā)酵裝置中有瘤胃液及人工唾液鹽溶液，pH在5．93～7．00之間變化，屬于微生物發(fā)酵正常范圍。NH3?N含量是反映瘤胃內(nèi)氮降解和微生物利用氨的動(dòng)態(tài)指標(biāo)。氨是瘤胃中主要微生物體系生長的氮源［14］。體外發(fā)酵試驗(yàn)與動(dòng)物試驗(yàn)相比，消除了瘤胃壁對NH3?N的吸收、唾液尿素循環(huán)的影響，因此NH3?N含量變化主要是被微生物降解和利用的結(jié)果。本研究中，在培養(yǎng)后2～8 h期間，3組的NH3?N含量在較低范圍波動(dòng)，這可能是因?yàn)樵谂囵B(yǎng)開始階段瘤胃微生物的快速增殖利用了NH3?N。培養(yǎng)8 h后，NH3?N含量開始逐步上升。這主要是由于降解產(chǎn)生的NH3?N不能及時(shí)被微生物利用，以及體外發(fā)酵裝置不能移除多余的NH3?N而導(dǎo)致的蓄積，但組間的NH3?N含量差異不顯著。影響微生物增殖的關(guān)鍵營養(yǎng)素是碳水化合物和蛋白質(zhì)［15］。在本研究中，相對于對照組，2個(gè)蛋氨酸組對細(xì)菌蛋白含量都沒有顯著影響。這可能是由于氨是瘤胃細(xì)菌生長的主要氮源［14］。這與上述NH3?N含量在組間沒有顯著變化的結(jié)果有一定的一致性。但2個(gè)蛋氨酸組在一定程度上都提高了培養(yǎng)原蟲蛋白的含量，這則可能是由于原蟲以氨基酸為主要生長氮源，對氨的利用很少，蛋氨酸的添加在一定程度上促進(jìn)了其增殖。這也與本研究所測定的過瘤胃蛋氨酸的瘤胃保護(hù)率為80．63%，在瘤胃有一定程度蛋氨酸的釋放相一致。但原蟲蛋白含量在2個(gè)蛋氨酸組間沒有顯著差異。以上體外試驗(yàn)結(jié)果說明過瘤胃蛋氨酸對瘤胃微生物體外發(fā)酵的pH、NH3?N含量以及原蟲和細(xì)菌的生物量沒有顯著的影響。

3．2 過瘤胃蛋氨酸對奶牛泌乳性能和乳蛋白的影響

蛋氨酸是奶牛的第一或第二限制氨基酸［1］，通過氨基酸木桶原理可知，增加到達(dá)小腸的蛋氨酸的量可平衡氨基酸，提高飼糧粗蛋白質(zhì)消化率和宿主的生產(chǎn)性能［16］。本研究中，過瘤胃蛋氨酸組的產(chǎn)奶量比對照組高1．22 kg；過瘤胃蛋氨酸組比蛋氨酸組高2．09 kg。與Guinard等［17］補(bǔ)充過瘤胃蛋氨酸后提高奶牛產(chǎn)奶量研究的結(jié)果一致。前人研究報(bào)道，給泌乳荷斯坦奶牛補(bǔ)飼過瘤胃蛋氨酸，乳蛋白含量有明顯提高［18－19］。本研究泌乳前中期奶牛的研究表明，過瘤胃蛋氨酸可以顯著提高泌乳奶牛的乳蛋白率4．23%，同時(shí)也顯著高于蛋氨酸組3．89%。與Misciattlli等［20］給乳前中期奶牛補(bǔ)飼12 g／（頭·d）過瘤胃蛋氨酸提高乳蛋白率的結(jié)果相一致。以上表明，本研究中過瘤胃蛋氨酸可到達(dá)小腸以平衡氨基酸模式，進(jìn)而滿足乳蛋白合成的需求。另外，王紀(jì)亭等［21］報(bào)道，給泌乳荷斯坦奶牛補(bǔ)飼過瘤胃蛋氨酸55 g／（頭·d），乳脂率提高12．06%。本研究也獲得相近的結(jié)果，過瘤胃蛋氨酸組乳脂率比對照組的提高6．65%，比蛋氨酸組的提高3．94%。補(bǔ)喂過瘤胃蛋氨酸提高乳脂率，可能與蛋氨酸影響乳腺中短鏈和中鏈脂肪酸合成有關(guān)［22］。也有研究認(rèn)為，蛋氨酸是合成膽堿的甲基供體，而膽堿是合成乳脂的限制性營養(yǎng)物質(zhì)。具體的機(jī)理還需要進(jìn)一步的研究予以闡明。

3．3 過瘤胃蛋氨酸對飼糧粗蛋白質(zhì)飼糧消化率、乳尿素氮和血清尿素氮含量的影響

到達(dá)小腸氨基酸的平衡性可在一定程度上影響飼糧粗蛋白質(zhì)消化率。血清尿素氮的含量是反映機(jī)體氮代謝的重要指標(biāo)，同時(shí)也能夠反映飼糧含氮物質(zhì)在瘤胃的降解情況［23］。血清尿素氮的主要來源是瘤胃中微生物對飼糧中的瘤胃可降解蛋白質(zhì)（DIP）降解所產(chǎn)生的氨。這些氨主要被用來合成瘤胃微生物自身的氨基酸，如果DIP含量過高，瘤胃中被微生物利用多余的氨則被吸收進(jìn)入血液，并在肝臟中轉(zhuǎn)化為尿素，進(jìn)而引起血清尿素氮含量的升高。王洪榮等［24］采用十二指腸梯度灌注氨基酸法＋回撤法證明反芻動(dòng)物氨基酸不平衡提高了血清尿素氮的含量。本研究中，過瘤胃蛋氨酸組的血清尿素氮含量比對照組降低了15．08%，比蛋氨酸組的降低了7．81%。另外，乳尿素氮和血清尿素氮含量存在高度的相關(guān)性［25］，過高都表明飼糧蛋白質(zhì)的浪費(fèi)。在本研究中同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，過瘤胃蛋氨酸組的乳尿素氮含量比對照組的降低了15．97%，比蛋氨酸組的降低了24．27%。與此同時(shí)，本研究中飼糧粗蛋白質(zhì)消化率的結(jié)果也表明，過瘤胃蛋氨酸組比對照組提高了8．50%，比蛋氨酸組提高了9．38%。以上相關(guān)指標(biāo)的結(jié)果一致表明了過瘤胃蛋氨酸更有利用氨基酸平衡，提高飼糧氮素的代謝利用狀況。

4　結(jié) 論

過瘤胃蛋氨酸對奶牛瘤胃體外發(fā)酵沒有顯著影響，但可在一定程度上提高奶牛乳蛋白率和乳脂率和飼糧粗蛋白質(zhì)的消化率。

參考文獻(xiàn)：

［1］ MERCHEN N R，TITGEMEYER E C．Manipulation of amino acid supply to the growing ruminant［J］．Journal of Animal Science，1992，70（10）：3238－3247．

［2］ NRC．National research council，nutrient requirements of dairy cattle［S］．7th ed．Washington，D．C．：National Academy of Sciences，2001．

［3］ JOUANY J P，PAPON Y，LASSALAS B，et al．Effects of Isotricha，Eudiplodinium，Epidinium＋Entodinium and a mixed population of rumen protozoa on the in vitro degradation of fish meal，soybean meal and case?in［J］．Canadian Journal of Animal Science，1992，72 （4）：871－880．

［4］ WALLACE R J，NEWBOLD C J，MCKAIN N．Inhibi?tion by 1，10?phenanthroline of the breakdown of pep?tides by rumen bacteria and protozoa［J］．Journal of Applied Bacteriology，1996，80（4）：425－430．

［5］ CHALUPA W．Degradation of amino acids by the mixed rumen microbial population［J］．Journal of Ani?mal Science，1976，43（4）：829－834．

［6］ ONODERA R．Methionine and lysine metabolism in the rumen and the possible effects of their metabolites on the nutrition and physiology of ruminants［J］．Ami?no Acids，1993，5（2）：217－232．

［7］ CHEN Z H，BRODERICK G A，LUCHINI N D，et al．Effect of feeding different sources of rumen?protected methionine on milk production and N?utilization in lactating dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，2011，94（4）：1978－1988．

［8］ PATTON R A．Effect of rumen?protected methionine on feed intake，milk production，true milk protein con?centration，and true milk protein yield，and the factors that influence these effects：a meta?analysis［J］．Jour?nal of Dairy Science，2010，93（5）：2105－2118．

［9］ ?RSKOV E R，MCDONALD I．The estimation of pro? tein degradability in the rumen from incubation meas?urements weighted according to rate of passage［J］．The Journal of Agricultural Science，1979，92（2）：499－503．

［10］ 馮仰廉．反芻動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)［M］．北京：科學(xué)出版社，2004：172－173．

［11］ MENKEA K H，RAABA L，SALEWSKI A，et al．The estimation of the digestibility and metabolizable ener?gy content of ruminant feedingstuffs from the gas pro?duction when they are incubated with rumen liquor in vitro［J］．The Journal of Agricultural Science（Cam?bridge），1979，93：217－222．

［12］ 王繼貴．臨床生化檢驗(yàn)［M］．2版．長沙：湖南科學(xué)技術(shù)出版社：1996．

［13］ REDDY P S，REDDY G V N，REDDY M R．Utiliza?tion of sunflower straw and subabul?meal in complete diets for crossbred bulls［J］．India Journal of Animal Sciences 1987，59（9）：980－985．

［14］ LENG R A，NOLAN J V．Nitrogen metabolism in the rumen［J］．Journal of Dairy Science，1984，67（5）：1072－1089．

［15］ STERN M D，VARGA G A，CLARK J H，et al．Eval?uation of chemical and physical properties of feeds that affect protein metabolism in the rumen［J］．Jour?nal of Dairy Science，1994，77（9）：2762－2786．

［16］ LEE C，HRISTOV A N，CASSIDY T W，et al．Ru?men?protected lysine，methionine，and histidine in?crease milk protein yield in dairy cows fed a metabo?lizable protein?deficient diet［J］．Journal of Dairy Sci?ence，2012，95（10）：6042－6056．

［17］ GUINARD J，RULQUIN H．Effects of graded amounts of duodenal infusions of methionine on the mammary uptake of major milk precursors in dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，1995，78（10）：2196－2207．

［18］ 鄒阿玲，孫國軍，李明強(qiáng)，等．過瘤胃蛋氨酸對泌乳早期奶牛生產(chǎn)性能的影響［J］．中國奶牛，2005（2）：27－29．

［19］ 王永康，胡緒華，李海濤，等．補(bǔ)飼過瘤胃蛋氨酸提高奶牛生產(chǎn)性能的試驗(yàn)［J］．乳業(yè)科學(xué)與技術(shù)，2005，27（1）：33－35．

［20］ MISCIATTELLI L，KRISTENSEN V F，VESTER?GAARD M，et al．Milk production，nutrient utilization，and endocrine responses to increased postruminal ly?sine and methionine supply in dairy cows［J］．Journal of Dairy Science，2003，86（1）：275－286．

［21］ 王紀(jì)亭，萬文菊，徐國青，等．保護(hù)性蛋氨酸對奶牛生產(chǎn)性能的影響［J］．中國奶牛，2003（1）：15－17．

［22］ PISULEWSK P M，RULQUIN H，PEYRAUD J L，et al．Lactational and systemic responses of dairy cows to postruminal infusions of increasing amounts of methi?onine［J］．Journal of Dairy Science，1996，79（10）：1781－1791．

［23］ HUNTINGTON G B．Uptake and transport of nonpro? tein nitrogen by the ruminant gut［J］．Federation Pro?ceedings，1986，45（8）：2272－2276．

［24］ 王洪榮，盧德勛．飼喂玉米型日糧的生長綿羊限制性氨基酸的研究［J］．動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，1999，11（4）：17－28．

［25］ 翟少偉．中國荷斯坦牛血液與乳液中尿素氮濃度的關(guān)系研究［J］．福建畜牧獸醫(yī)，2008，30（增刊）：53－55．

Effects of Rumen Protected Methionine on in Vitro Ruminal Fermentation and Performance of Lactating Dairy Cows

WANG Jianfei

1

WANG Mengzhi

2?

FENG Chunyan

1

ZHANG Xin

2

ZHANG Jun

3

HONG Wei

1

WANG Hongrong

2?

（責(zé)任編輯 王智航）

（1．Shanghai Menon Animal Nutrition Technology Co．，Ltd．，Shanghai 201807，China；2．College of Animal Science and Technology，Yangzhou University，Yangzhou 225009，China；3．Yangda Kang Yuan Dairy Co．，Ltd．，Yangzhou 225004，China）

Abstract：This experiment was conducted to study the effects of rumen protected methionine on in vitro rumi?nal fermentation and performance of lactating dairy cows．In vitro fermentation test，methionine and rumen pro?tected methionine was added in culture medium，and culture medium without addition was used as control．Af?ter cultured for 0，2，4，8，12，16 and 24 h，pH and the contents of ammonia nitrogen，bacterial protein and protozoal protein were determined．Animal test，thirty healthy Holstein lactating dairy cows were randomly di?vided into 3 groups，cows in control were fed a basal diet，and those in experimental groups were fed the basal diet supplemented with 13．50 g／（head·d）methionine and 30．00 g／（head·d）rumen protected methionine，respectively．The pretest lasted for 7 days，and the test lasted for 42 days．The results showed as follows：1）in vitro fermentation test，rumen protected methionine had no significant effects on pH，the contents of ammonia nitrogen and bacterial protein of culture medium（P＞0．05）．The protozoal protein content was significantly in?creased by the supplementation of methionine and rumen protected methionine compared with control group （P＜0．05），but there was no significant difference between the two methionine groups（P＞0．05）．2）Animal test，no significant differences were detected in the percentages of milk protein and milk fat among groups on the 28th day（P＞0．05）．However，on the 42nd day，rumen protected methionine group was significantly high?er than the other 2 groups in the percentages of milk protein and milk fat（P＜0．05），and was significantly low?er in serum urea nitrogen and milk urea nitrogen contents（P＜0．05）．Additionally，rumen protected methionine group significantly increased dietary crude protein digestibility compared with the other 2 groups（P＜0．05）．In conclusion，rumen protected methionine has no significant effect on in vitro ruminal fermentation，but can im?prove the percentages of milk protein and milk fat by improving the digestibility of dietary crude protein content of lactating dairy cows．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（7）：2248?2255］

Key words：rumen protected methionine；dairy cow；dietary crude protein digestibility；milk protein percent?age

Corresponding author?s：WANG Mengzhi，associate professor，E?mail：mengzhiwangyz＠126．com；WANG Hongrong，professor，E?mail：hrwang＠yzu．edu．cn

通信作者：?王夢芝，副教授，碩士生導(dǎo)師，E?mail：mengzhiwangyz＠126．com；王洪榮，教授，博士生導(dǎo)師，E?mail：hrwang＠yzu．edu．cn

作者簡介：王劍飛（1984—），男，山東榮成人，碩士，動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)專業(yè)。E?mail：wjf＿menon＿tech＠163．com

基金項(xiàng)目：國家十二五科技支撐項(xiàng)目（2012BAD12B02）

收稿日期：2015－01－15

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．07．032

文章編號：1006?267X（2015）07?2248?08

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：S816．7；S823