喉鱗癌中過氧化物增殖激活受體γ、Survivin和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因的表達及意義

喉鱗癌中過氧化物增殖激活受體γ、Survivin和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因的表達及意義

孫旭云陳建國江祺川康健

(遼寧醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科，遼寧錦州121001)

摘要〔〕目的分析喉鱗癌中過氧化物酶增殖激活受體(PPAR)γ、生存素(Survivin)和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)的表達及其臨床價值。方法87例喉鱗癌術(shù)后患者作為觀察組，留取腫瘤的蠟塊組織。72例喉鱗狀上皮不典型增生組織作為對照組。72例癌旁正常黏膜組織作為正常對照組。應用免疫組化SP法檢測組織PPARγ、Survivin和PTEN的表達。結(jié)果觀察組Survivin表達明顯高于對照組和正常對照組，觀察組PPARγ和PTEN表達明顯低于對照組和正常對照組。觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達陽性率在不同分化程度和不同Ki67表達增殖指數(shù)中差別顯著，Survivin和PTEN表達陽性率與腫瘤最大徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。PPARγ、Survivin和PTEN未見明顯相關(guān)性。結(jié)論喉鱗癌術(shù)后組織中Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達可以促進腫瘤發(fā)生和進展。PPARγ、Survivin和PTEN在不同臨床特征中的表達具有一定差異性。PPARγ、Survivin和PTEN之間未見明顯的協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞〔〕喉鱗癌；過氧化物增殖激活受體(PPAR)γ；Survivin；10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)

中圖分類號〔〕R76〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：孫旭云(1964-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事耳鼻咽喉頭頸疾病研究。

喉鱗癌病變發(fā)展過程中常伴有前期不典型增生等病變。病變發(fā)展過程中多種基因和蛋白具有顯著調(diào)節(jié)作用〔1，2〕。過氧化物酶增殖激活受體(PPAR)γ是核受體超家族成員，廣泛表達在脂肪、小腸上皮細胞等組織中〔3，4〕。早期人們認為其功能主要是調(diào)節(jié)脂肪細胞分化及糖、脂代謝，但是越來越多的證據(jù)表明PPAR-γ能夠調(diào)節(jié)多種生物學功能〔5，6〕，并且具有抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用。生存素(Survivin)是一種凋亡抑制蛋白，是抑制細胞凋亡的關(guān)鍵分子〔7〕。10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)是較為經(jīng)典的抑癌基因，其基因產(chǎn)物表達磷酸酶的活性，具有明顯的腫瘤抑制作用〔8〕。本文將重點關(guān)注PPARγ、Survivin和PTEN在喉鱗癌中的表達特征及相關(guān)性。

1材料與方法

1.1一般資料觀察組選自我院2011年1月至2014年6月行手術(shù)治療的87例喉鱗癌患者。術(shù)后留取腫瘤組織，并經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO診斷標準。男47例，女40例；年齡52～83歲，平均(64.8±5.7)歲。其中高分化30例，中分化26例，低分化31例。選擇72例喉鱗狀上皮不典型增生組織作為對照組，男37例，女35例；年齡50～78歲，平均(62.1±5.8)歲。選擇觀察組中的72例癌旁距腫瘤邊緣>3 cm的正常黏膜組織為正常對照組，男女各36例；年齡53～80歲，平均(60.9±5.0)歲。

1.2PPARγ、Survivin和PTEN檢測PPARγ、Survivin和PTEN蛋白檢測均應用免疫組化SP法、DAB顯色。操作嚴格按說明書進行，嚴格質(zhì)控。

1.3PPARγ、Survivin和PTEN結(jié)果判讀PPARγ、Survivin和PTEN均以細胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色為陽性細胞，隨機選擇10個上皮細胞密集且染色較為集中的區(qū)域(熱點區(qū))，計算陽性率，取平均值。以<25%為陰性，以≥25%為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行χ2分析和線性相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1三組PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達比較觀察組Survivin陽性表達明顯高于對照組和正常對照組，觀察組PPARγ和PTEN陽性表達明顯低于對照組和正常對照組。即正常對照組、對照組和觀察組中Survivin陽性表達有明顯升高趨勢。正常對照組、對照組和觀察組中PPARγ和PTEN陽性表達有明顯下降趨勢。見表1。

表1　三組中PPARγ、Survivin和PTEN

2.2PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達在不同臨床特征中的表達觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達陽性率在不同分化程度和不同Ki67表達增殖指數(shù)中差別顯著，Survivin和PTEN表達陽性率與腫瘤最大徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。見表2。

表2　PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達在觀察組

2.3觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達相關(guān)性PPARγ、Survivin和PTEN之間均未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3討論

喉鱗癌發(fā)生與多種因素有關(guān)，如煙草、酒精濫用等，其與個體的生活方式也有較大關(guān)系。腫瘤發(fā)展過程中有明顯的前驅(qū)病變，如鱗狀上皮的增生、單純性增生和不典型增生等。其在腫瘤性促進蛋白的作用下，使上皮細胞癌變并呈浸潤性生長。臨床特征中最重要的是聲音嘶啞，其他表達還有吞咽困難，異物感、咯血等。腫瘤常表現(xiàn)為邊界較清楚的扁平斑塊，有時表面呈潰瘍性。顯微鏡下顯示鱗狀細胞的分化，可見不同形態(tài)的核分裂象，常侵襲并穿透基底膜，周圍可見明顯的間質(zhì)反應。組織學分級對判斷腫瘤的生長和預后的作用可能有限。突變型P53和細胞增殖指數(shù)是重要的蛋白指標，不僅可以判斷腫瘤預后，還可以在一定程度上指導手術(shù)的方式〔9〕。PPAR-γ具有一定的抗腫瘤作用，主要作用途徑有：①阻滯細胞周期、抑制腫瘤細胞的增殖，其途徑有P21和P27等；②誘導細胞分化〔10〕。③誘導腫瘤細胞凋亡：通過激活凋亡基因Proline Oxidase等促進凋亡進程〔11〕；④抑制血管生成和降低腫瘤的侵襲能力〔12，13〕。研究認為PPAR-γ可以促進腫瘤進展。張萌等〔14〕通過對肝細胞癌中PPAR-γ的表達進行檢測，發(fā)現(xiàn)PPAR-γ在肝細胞癌中的陽性率為51.3%，顯著高于正常肝組織中陽性率19.0%，認為PPAR-γ的表達可能具有組織特異性，且其表達可能有多向潛能。Survivin基因定位于17q25，編碼含有142個氨基酸，分子量16.5 kD〔15〕。其發(fā)揮作用是通過效應細胞蛋白酶受體1來調(diào)節(jié)凋亡進程的。近年來顯示Survivin的作用可能更多，如對腫瘤細胞增殖的調(diào)控作用，對血管生成的誘導作用等〔16〕。PTEN具有磷酸酯酶活性，其對腫瘤的作用主要是抑制腫瘤形成和進展〔17〕。研究認為PTEN可以引起細胞內(nèi)第二信使磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PIP3)去磷酸化后形成PIP2，使PI3K-AKT的信號下調(diào)，抑制非貼壁依賴性細胞增殖，同時抑制腫瘤生長〔18，19〕。

本實驗結(jié)果提示Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達是促進腫瘤形成的重要蛋白指標。PPARγ和PTEN具有明顯的腫瘤抑制作用。提示Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達時使腫瘤分化更低，或者三者在調(diào)節(jié)腫瘤進展過程中通過調(diào)節(jié)分化而影響腫瘤的進展進程。Survivin和PTEN異常表達可以促進腫瘤的生長和腫瘤的淋巴道播散，此結(jié)果也提示Survivin和PTEN高表達可以有效促進腫瘤進展。徐萬宇等〔20〕在直腸癌的研究認為Survivin和PTEN呈負相關(guān)，具有負向作用，認為腺癌中由于PTEN失活，對PIP3去磷酸化的功能改變，使PI3K信號活化，引起核轉(zhuǎn)錄因子κB激活，上調(diào)Survivin表達后，有效抑制腫瘤細胞和血管內(nèi)皮細胞凋亡，使進腫瘤細胞增殖和血管形成，加速腫瘤進展。而在本實驗中并未觀察到二者的協(xié)同作用，其可能是鱗癌與腺癌的蛋白表達特點不同所致，也可能是喉癌本身的特殊性所致，但是Survivin和PTEN，甚至其與PPARγ到底是否存在關(guān)聯(lián)性，有待在不同類型腫瘤中進行更多實驗來證實。綜上，PPARγ、Survivin和PTEN異常表達參與喉鱗癌形成和進展，三者發(fā)揮作用通路可能不相同。

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〔2014-01-19修回〕

(編輯苑云杰)