再生基因蛋白Ⅳ、骨橋蛋白、表皮生長因子受體蛋白在胃腺癌中的表達(dá)及臨床意義

再生基因蛋白Ⅳ、骨橋蛋白、表皮生長因子受體蛋白在胃腺癌中的表達(dá)及臨床意義

楊德生康玉華李福春1孫珠蕾2胡軍紅3陳宏超4索智敏

(河南大學(xué)淮河醫(yī)院消化內(nèi)科，河南開封475000)

摘要〔〕目的研究再生基因蛋白(Reg)Ⅳ、骨橋蛋白(OPN)及表皮生長因子受體(EGFR)在胃腺癌中的表達(dá)及與其臨床意義。方法應(yīng)用S-P免疫組化技術(shù)檢測65例胃腺癌及其相應(yīng)的癌旁正常組織中RegⅣ、OPN、EGFR蛋白的表達(dá)。結(jié)果65例胃腺癌組織中RegⅣ、OPN、EGFR蛋白的陽性表達(dá)率53.8%(35/65)， 63.1%(41/65)， 56.9%(37/65)均高于癌旁正常組織12.3%(8/65)、4.6%(3/65)、18.5%(12/65)(P<0.05)。RegⅣ蛋白的表達(dá)與胃癌分化程度相關(guān)有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，OPN蛋白的表達(dá)與浸潤深度、腫瘤分化程度、臨床分期相關(guān)有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，EGFR蛋白的表達(dá)與胃腺癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。RegⅣ、OPN與EGFR蛋白在胃腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，RegⅣ與OPN蛋白在胃腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論RegⅣ、OPN、EGFR蛋白均在胃癌組織中表達(dá)呈正相關(guān)，并在胃癌的發(fā)生發(fā)展發(fā)揮重要作用。

關(guān)鍵詞〔〕再生基因蛋白Ⅳ；骨橋蛋白；表皮生長因子受體；胃腺癌；免疫組織化學(xué)

中圖分類號〔〕R735.2〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

1河南大學(xué)淮河醫(yī)院超聲科2河南大學(xué)淮河醫(yī)院病理科

3河南大學(xué)淮河醫(yī)院普通外科4鄭州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科

第一作者：楊德生(1981-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化道腫瘤研究。

胃癌是病死率僅次于肺癌，在中國的發(fā)病率正在逐年上升的趨勢〔1~3〕，其中絕大多數(shù)為胃腺癌。盡管已有治療研究取得重大進(jìn)展，但仍不能令人滿意，胃腺癌的5年生產(chǎn)率仍然很低。胃癌治療方面研究的突破取決于胃癌的復(fù)雜的分子機制等基礎(chǔ)研究的進(jìn)展〔4〕。研究發(fā)現(xiàn)多種基因和表觀遺傳學(xué)的改變在胃癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，比如粒酶活性，遺傳不穩(wěn)定性、原癌基因、抑癌基因、生長因子、基質(zhì)降解酶、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白、細(xì)胞黏附分子等〔5~7〕。再生基因蛋白(Reg)基因家族是鈣依賴性凝集素超家族〔1,2〕，在一些胃腸道腫瘤中表達(dá)上調(diào)，參與細(xì)胞增殖和分化，RegⅣ是其中一個新成員〔3,8〕。骨橋蛋白(OPN)是在最初骨基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的，具有多種功能的一種胞外基質(zhì)蛋白，參與細(xì)胞黏附和細(xì)胞遷移，影響腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移進(jìn)程〔9〕。表皮生長因子受體(EGFR)為酪氨酸激酶受體，在體內(nèi)通過多種信號途徑在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用〔10〕。在胃腺癌中EZH2與EGFR、Akt的蛋白水平的表達(dá)之間的關(guān)系國內(nèi)外未見報道。因此，本研究采用免疫組織化學(xué)染色法檢測RegⅣ、OPN、EGFR蛋白在胃癌及癌旁正常組織中的表達(dá)，為闡明其與胃癌的關(guān)系，探討RegⅣ、OPN、EGFR蛋白在胃癌中的作用及潛在的作用機制。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來自河南大學(xué)淮河醫(yī)院普通外科2010年1月至2011年6月手術(shù)切除新鮮胃腺癌標(biāo)本 65例，均經(jīng)HE切片病理證實，所有病例術(shù)前均未接受任何放療或化療，并排除其他臟器的惡性腫瘤。選取同一病例的癌旁切緣正常組織65例作為對照組。65例胃腺癌中，男34例，女31例；年齡27~79〔平均(46.3±4.5)〕歲；高、中、低分化腺癌分別為16例、22例和27例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移44例，無轉(zhuǎn)移21例；按TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期9例，Ⅱ期15例，Ⅲ期19例及Ⅳ期22例；按浸潤深度分，T110例，T215例，T317例， T423例。

1.2試劑及方法濃縮型鼠抗人單克隆抗體RegⅣ、OPN、EGFR及免疫組化試劑盒、DAB試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。用免疫組化(S-P 法)法：取厚4 μm石蠟切片，常規(guī)脫蠟、水化后，采用電爐加熱煮沸修復(fù)抗原；RegⅣ、OPN、EGFR蛋白單克隆抗體均按1∶100稀釋，操作參照產(chǎn)品說明書，以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照。用已證實的RegⅣ、OPN、EGFR染色陽性胃腺癌切片作陽性對照。

1.3結(jié)果判斷RegⅣ、OPN、EGFR蛋白均按照以下標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)染色程度及陽性細(xì)胞數(shù)來計算評分，a 染色程度:0陰性，1弱陽性，2中等陽性，3強陽性；b 陽性細(xì)胞數(shù):無陽性細(xì)胞0，陽性細(xì)胞1%~25% 1分，陽性細(xì)胞26%~50% 2分，陽性細(xì)胞>50% 3分；a+b之和為3~6分者評為免疫組織染色陽性；計數(shù)方法，結(jié)果判定在雙盲法下進(jìn)行，每張切片由兩名病理醫(yī)師分別判斷。兩者不一致時重新計數(shù)。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行χ2檢驗、非參數(shù)檢驗的秩和檢驗，雙變量相關(guān)關(guān)系分析采用Spearman相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1RegⅣ、OPN、EGFR蛋白的表達(dá) 65例胃腺癌組織中，RegⅣ蛋白陽性表達(dá)率53.8%(35/65)，其陽性表達(dá)部位為細(xì)胞核；OPN的陽性表達(dá)率63.1%(41/65)，陽性表達(dá)部位為主要在細(xì)胞質(zhì)；EGFR的陽性表達(dá)率56.9%(37/65)，陽性表達(dá)部位為細(xì)胞膜，均呈強陽性過度表達(dá)現(xiàn)象。癌旁正常組織中，RegⅣ、OPN、EGFR蛋白均為弱陽性低表達(dá)，陽性表達(dá)率分別為12.3%(8/65)、4.6%(3/65)、18.5%(12/65)。兩組間表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=25.333、49.609、20.471，P=0.00)。見圖1。

2.2Reg Ⅳ、OPN、EGFR蛋白的表達(dá)與胃腺癌的臨床病理特征的關(guān)系Reg Ⅳ蛋白的表達(dá)與胃癌分化程度相關(guān)有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度、臨床分期及浸潤深度無關(guān)(P>0.05);OPN與EGFR蛋白的表達(dá)與胃腺癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與腫瘤分化程度無關(guān)(P>0.05)。見表1。

表1　RegⅣ、OPN、EGFR蛋白陽性表達(dá)與

2.3RegⅣ、OPN、EGFR蛋白在胃腺癌中表達(dá)之間的相互關(guān)系RegⅣ、OPN與EGFR蛋白在胃腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.254,P=0.041;r=0.300,P=0.015)，RegⅣ與OPN蛋白在胃腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.251,P<0.05)。

RegⅣ

OPN

EGFR

3討論

Reg代表一組小的細(xì)胞再生和增殖所必需的分泌蛋白，形成一種免疫系統(tǒng)〔11,12〕。人的Reg家族中，人RegⅣ基因位于1號染色體上，不像其他Reg家族基因均位于2p12〔13〕。RegⅣ可在各種正常組織表達(dá)，如胃、大腸、小腸和胰腺〔14,15〕，但其表達(dá)水平較癌組織中要低得多〔16〕。Violette等〔17〕的研究表明，Reg Ⅳ在大腸腫瘤(特別是在黏液癌)相對于正常大腸組織。一些研究已經(jīng)證明，在胃癌組織中高表達(dá)RegⅣ蛋白。Bishnupuri等〔18〕報道，用定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定，胃癌中RegⅣ基因的表達(dá)顯著高于正常組織。RegⅣ的抗凋亡特性與大腸癌的進(jìn)展和胃癌化療耐藥性密切相關(guān)〔18,19〕，RegⅣ的表達(dá)有望成為一個標(biāo)記高度惡性潛力的生物學(xué)標(biāo)志物〔15，20，21〕。Oue等〔14〕用免疫組織化學(xué)法檢測發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸腺癌RegⅣ蛋白36%高表達(dá)，且與腫瘤分期密切相關(guān)，而在29%的胃腺癌中高表達(dá)，并伴有腸黏蛋白表型和神經(jīng)內(nèi)分泌分化，但與腫瘤分期和預(yù)后無相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，RegⅣ在胃腺癌中高表達(dá)，顯著高于癌旁正常組織中的表達(dá)，且腫瘤分化程度相關(guān)，而與臨床分期、淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度無關(guān)，與文獻(xiàn)報道相符，進(jìn)一步證實了RegⅣ在胃腺癌中的作用。

EGFR是一種跨膜蛋白，屬于ErbB家族受體酪氨酸激酶(RTK)。它被激活后與EGF家族的肽生長因子結(jié)合，其中包括表皮生長因子(EGF)，轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-α等〔22,23〕，通過與配體結(jié)合誘導(dǎo)ErbB受體聚合物和異二聚體，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)的激酶結(jié)構(gòu)域的酪氨酸激酶自身磷酸化和激活。激活EGFR結(jié)果同時激活多個下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)制的多效性細(xì)胞的反應(yīng)，包括細(xì)胞增殖，遷移，侵襲，抑制細(xì)胞凋亡〔24〕。本研究發(fā)現(xiàn)，EGFR在胃腺癌中高表達(dá)，顯著高于癌旁正常組織中的表達(dá)，且與臨床分期、淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度相關(guān)，而與腫瘤分化程度無關(guān)，與文獻(xiàn)報道相符〔25〕，進(jìn)一步證實了EGFR在胃腺癌中的作用。

OPN首先被確定為一個非膠原骨基質(zhì)蛋白，它隨后被證明是一種細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的移動〔26〕。此外，OPN作為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的一個關(guān)鍵的信號調(diào)節(jié)通路在乳腺癌，肺癌，前列腺癌，卵巢癌和結(jié)腸癌中被證實〔27,28〕的。OPN可綁定到不同的細(xì)胞表面受體，包括整合素等，誘導(dǎo)并影響腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)，增強的移動性和黏附，加速生長和分裂，以及延長細(xì)胞的存活，從而腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮重要作用〔29,30〕。OPN最近被認(rèn)為是腫瘤進(jìn)展〔31〕的一個新的標(biāo)志物。OPN的高表達(dá)水平與腫瘤分期，轉(zhuǎn)移及患者生存期密切相關(guān)〔32〕。在本研究中骨橋蛋白表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)，在胃腺癌中的陽性率顯著高于癌旁正常組織，且其表達(dá)與腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度、臨床分期相關(guān)，這與目前文獻(xiàn)報道相符〔33,34〕。

RegⅣ激活的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路知之甚少。EGFR在MKN28和TMK1細(xì)胞中形成自分泌和旁分泌環(huán)路〔35〕。據(jù)報道，高磷酸化水平的表皮生長因子受體和RegⅣ在MKN28和TMK1細(xì)胞系中，RegⅣ與EGFR的高磷酸化水平與EGFR的磷酸化有關(guān)〔36〕。Kuniyasu等〔37〕研究發(fā)現(xiàn)在RegⅣ轉(zhuǎn)染MKN28和TMK1胃癌細(xì)胞系中可增加的EGFR磷酸化水平。在RegⅣ轉(zhuǎn)染的MKN28和TMK1細(xì)胞系中，RegⅣ可增加EGFR的磷酸化。在敲除RegⅣ的MKN45細(xì)胞中，反比抑制表皮生長因子受體磷酸化表達(dá)。Bishnupuri等〔36〕通過觀察結(jié)腸腺癌細(xì)胞純化rhR4對的信號傳導(dǎo)通路響應(yīng)Reg Ⅳ的影響，得出rhR4治療導(dǎo)致EGFR酪氨酸992和Tyr 1068和Akt蛋白在蘇氨酸308和絲氨酸473的快速磷酸化，推測在人結(jié)腸癌細(xì)胞系RegⅣ蛋白是一種強效的EGFR/磷酸肌醇3-kinase/Akt/AP-1的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活劑。激活EGFR信號傳導(dǎo)通路在結(jié)腸癌細(xì)胞的有絲分裂信號，增加細(xì)胞增殖，血管生成，轉(zhuǎn)移和抗細(xì)胞凋亡〔38〕。Nanakin等〔39〕發(fā)現(xiàn)，在SW403細(xì)胞系中EGF和TGF-α可增強RegⅣ基因表達(dá)的ERK信號通路。兩者合計，這些研究表明，陽性表達(dá)EGF和RegⅣ之 間存在反饋回路中的信號通路。因此，阻斷RegⅣ/EGFR信號傳導(dǎo)可作為人胃腸腺癌的潛在的治療干預(yù)措施。本研究發(fā)現(xiàn)，RegⅣ和EGFR在胃腺癌中的表達(dá)呈正相關(guān)，進(jìn)一步從蛋白水平證實了上述觀點。

EGFR和OPN之間的相互作用，在體外的一些實驗性腫瘤系統(tǒng)已被證明，但是，也有沒有報告其在對人的活檢組織體內(nèi)實驗中報道較少。研究發(fā)現(xiàn)，由EGF通過與受體結(jié)合可以在乳腺癌細(xì)胞，大鼠腎上皮細(xì)胞〔40〕，HepG2細(xì)胞〔41〕，和HL60細(xì)胞〔42〕中誘導(dǎo)骨橋蛋白基因的表達(dá)〔43〕。在另一方面，在對乳腺癌細(xì)胞的體外研究表明，腫瘤細(xì)胞中的下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活導(dǎo)致了與整合結(jié)合的OPN誘發(fā)的c-Src的依賴性的EGFR的轉(zhuǎn)錄〔29〕。EGFR酪氨酸激酶信號途徑可被內(nèi)在受體終止。整合素和生長因子受體各種激活和抑制信號的平衡被認(rèn)為可以確定細(xì)胞的命運。然而，整合素和生長因子受體之間的相互作用比簡單的獨立激活相同的信號通路更復(fù)雜〔44〕。在缺乏配體如EGFR的情況，整合素所誘導(dǎo)多種受體酪氨酸激酶激活都將被中斷。在細(xì)胞的生長和延長細(xì)胞的存活，蛋白質(zhì)水解等生物學(xué)效應(yīng)方面，骨橋蛋白和表皮生長因子受體配體結(jié)合和Akt的活化的信號途徑是重疊的〔45〕。

癌癥的發(fā)生發(fā)展是多個基因的相互作用的結(jié)果。更好地了解發(fā)生癌變過程中基因表達(dá)的變化，可用于腫瘤的診斷，治療和預(yù)防。新的生物標(biāo)志物對癌癥診斷和治療的新靶點鑒定的一個主要目標(biāo)〔46〕。本研究顯示，RegⅣ、OPN、EGFR在胃腺癌組織中高表達(dá)，且其表達(dá)呈正相關(guān)，提示三者在胃癌的發(fā)生發(fā)展中呈潛在的相互協(xié)調(diào)作用，聯(lián)合監(jiān)測3個指標(biāo)有望對胃腺癌的早期診斷、靶向治療和預(yù)后評估提供參考，Reg Ⅳ、OPN、EGFR在胃腺癌中的具體作用機制還有待進(jìn)一步實驗證明。

4參考文獻(xiàn)

1Alberts SR,Cervantes A,Velde CJ.Gastric cancer:epidemiology,pathology and treatment〔J〕.Ann Oncol,2003；14(9002):31-6.

2Yang L.Incidence and mortality of gastric cancer in China〔J〕.World J Gastroenterol,2006；12(1):17-20.

3Lu JB,Sun XB,Dai DX,etal.Epidemiology of gastroenterologic cancer in Henan Province,China〔J〕.World J Gastroenterol,2003；9(11):2400-3.

4Yasui W,Sentani K,Sakamoto N,etal.Molecular pathology of gastric cancer:research and practice〔J〕.Pathol Res Pract,2011；207(10):608-12.

5Yasui W,Oue N,Aung PP,etal.Molecular-pathological prognostic factors of gastric cancer:a review〔J〕.Gastric Cancer,2005；8(2):86-94.

6Yasui W,Oue N,Sentani K,etal.Transcriptome dissection of gastric cancer:identification of novel diagnostic and therapeutic targets from pathology specimens(review article)〔J〕.Pathol Int,2009;59(3):121-36.

7Yasui W,Sentani K,Motoshita J.Molecular pathobiology of gastric cancer〔J〕.H Scand J Surg,2006;95(4):225-31.

8Chakraborty C,Katsumata N,Myal Y,etal.Age-related changes in peptide-23/pancreatitis-associated protein and pancreatic stone protein/reg gene expression in the rat and regulation by growth hormone-releasing hormone 〔J〕.Endocrinology,1995;136(5):1843-9.

9Sodek J,Ganss B,McKee MD.Osteopontin〔J〕.Crit Rev Oral Biol Med,2000;11(3):279-303.

10Heuckmann JM,Rauh D,Thomas RK.Epidermal growth factor receptor(EGFR) signaling and covalent EGFR inhibition in lung cancer〔J〕.Clin Oncol,2012;30(27):3417-20.

11Dusetti NJ,Frigerio JM,Fox MF,etal.Molecular cloning,genomic organization,and chromosomal localization of the human pancreatitis-associated protein(PAP) gene〔J〕.Genomics,1994;19(1):108-14.

12Broekaert D,Eyckerman S,Lavens D,etal.Comparison of leptin-and interleukin-6-regulated expression of the rPAP gene family:evidence for differential co-regulatory signals〔J〕.Eur Cytokine Netw,2002;13(1):78-85.

13Nata K,Liu Y,Xu L,etal.Molecular cloning,expression and chromosomal localization of a novel human REG family gene,REGⅣ〔J〕.Gene,2004;340(1):161-70.

14Oue N,Mitani Y,Aung PP,etal.Expression and localization of Reg Ⅳ in human neoplastic and non-neoplastic tissues:Reg Ⅳ expression is associated with intestinal and neuroendocrine differentiation in gastric adenocarcinoma〔J〕.J Pathol,2005;207(2):185-98.

15Gu Z,Rubin MA,Yang Y,etal.Reg Ⅳ:a promising marker of hormone refractory metastatic prostate cancer〔J〕.Clin Cancer Res,2005;11(6):2237-43.

16Oue N,Hamai Y,Mitani Y,etal.Gene expression profile of gastric carcinoma:identification of genes and tags potentially involved in invasion,metastasis,and carcinogenesis by serial analysis of gene expression〔J〕.Cancer Res,2004;64(7):2397-405.

17Violette S,Festor E,Pandrea-Vasile I,etal.Reg Ⅳ,a new member of the regenerating gene family,is overexpressed in colorectal carcinomas〔J〕.Int J Cancer,2003;103(2):185-93.

18Bishnupuri KS,Luo Q,Korzenik JR,etal.Dysregulation of Reg gene expression occurs early in gastrointestinal tumorigenesis and regulates anti-apoptotic genes〔J〕.Cancer Biol Ther,2006;5(12):1714-20.

19Mitani Y,Oue N,Matsumura S,etal.RegⅣ is a serum biomarker for gastric cancer patients and predicts response to 5-fluorouracil-based chemotherapy〔J〕.Oncogene,2007;26(30):4383-93.

20Heiskala K,Giles-Komar J,Heiskala M,etal.High expression of RELP(Reg Ⅳ)in neoplastic goblet cells of appendiceal mucinous cystadenoma and pseudomyxoma peritonei〔J〕.Virchows Arch,2006;33(448):295-300.

21Pankova-Kholmyansky I,Arber N.Reg Ⅳ can serve for early diagnosis and therapy〔J〕.Cancer Biol Ther,2007;6(1):123-4.

22Wells A.EGF receptor〔J〕.Int J Biochem Cell Biol,1999;31:637-43.

23Prenzel N,Fischer OM,Streit S,etal.The epidermal growth factor receptor family as a central element for cellular signal transduction and diversification〔J〕.Endocr Relat Cancer,2001;8(1):11-31.

24Lu Z,Jiang G,Blume-Jensen P,etal.Epidermal growth factor-induced tumor cell invasion and metastasis initiated by dephosphorylation and downregulation of focal adhesion kinase〔J〕.Mol Cell Biol,2001;21(12):4016-31.

25張紅雨，陶紅梅，陳紅濤.表皮生長因子受體和蛋白激酶B在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中華胃腸外科雜志,2011;14(2):140-2.

26Guarino V,Faviana P,Salvatore G,etal.Osteopontin is overexpressed in human papillary thyroid carcinomas and enhances thyroid carcinoma cell invasiveness〔J〕.J Clin Endocrinol Metab,2005;90(9):5270-8.

27Cook AC,Tuck AB,McCarthy S,etal.Osteopontin induces multiple changes in gene expression that reflect the six ‘hallmarks of cancer’ in a model of breast cancer progression〔J〕.Mol Carcinog,2005;43(4):225-36.

28Irby RB,McCarthy SM,Yeatman TJ.Osteopontin regulates multiple functions contributing to human colon cancer development and progression〔J〕.Clin Exp Metastasis,2004;21(6):515-23.

29Tuck AB,Hota C,Wilson SM,etal.Osteopontin-induced migration of human mammary epithelial cells involves activation of EGF receptor and multiple signal transduction pathways〔J〕.Oncogene,2003;22(8):1198-205.

30Wai PY,Kuo PC.Osteopontin:regulation in tumor metastasis〔J〕.Cancer Metastasis Rev,2008;27(1):103-18.

31Weber GF.The metastasis gene osteopontin:a candidate target for cancer therapy〔J〕.Biochem Biophys Acta,2001;1552(2):61-85.

32Eschrich S,Yang I,Bloom G,etal.Molecular staging for survival prediction of gastric cancer patients〔J〕.J Clin Oncol,2005;23:3526-35.

33Kim JY,Bae BN,Kim KS,etal.Osteopontin,CD44,and NFkappaB expression in gastric adenocarcinoma〔J〕.Cancer Res Treat,2009;41(1):29-35.

34張東濤,袁靜,楊力,等.骨橋蛋白在胃癌中的表達(dá)及與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕.中華腫瘤雜志,2005;27(3):167-9.

35Takekura N,Yasui W,Kyo E,etal.Effects of tyrosine kinase inhibitor,erbstatin,on cell growth and growth-factor/receptor gene expression in human gastric carcinoma cells〔J〕.Int J Cancer,2001;47(6):938-42.

36Bishnupuri KS,Luo Q,Murmu N,etal.RegⅣ activates the epidermal growth factor receptor/Akt/AP-1 signaling pathway in colon adenocarcinomas〔J〕.Gastroenterology,2006;130(1):137-49.

37Kuniyasu H,Oue N,Sasahira T,etal.Reg Ⅳ enhances peritoneal metastasis in gastric carcinomas〔J〕.Cell Proliferation,2009;42(1):110-21.

38Baselga J.Epidermal growth factor receptor pathway inhibitors.Update〔J〕.Onco Cancer Therapeutics,2006;1(3):299-310.

39Nanakin A,Fukui H,Fujii S,etal.Expression of the REG Ⅳ gene in ulcerative colitis〔J〕.Lab Invest,2007;87(3):304-14.

40Malyankar UM,Almeida M,Johnson RJ,etal.Osteopontin regulation in cultured rat renal epithelial cells〔J〕.Kidney Int,1997;51(6):1766-73.

41Zhang G,Zhao ZQ,Wang HD,etal.Enhancement of osteopontin expression in HepG2 cells by epidermal growth factor via phosphatidylinositol 3-kinase signaling pathway〔J〕.World J Gastroenterol,2004;10(2):205-8.

42Chakalaparampil I,Peri A,Nemir M,etal.Cells in vivo and in vitro from osteopetrotic mice homozygous for c-src disruption show suppression of synthesis of osteopontin,a multifunctional extracellular matrix protein〔J〕.Oncogene,1996;12(7):1457-67.

43Zhang G,He B,Weber GF.Growth factor signaling induces metastasis genes in transformed cells:molecular connection between Akt kinase and osteopontin in breast cancer〔J〕.Mol Cell Biol,2003;23(18):6507-19.

44Ivaska J,Heino J.Interplay between cell adhesion and growth factor receptors:from the plasma membrane to the endosomes〔J〕.Cell Tissue Res,2010;339(1):111-20.

45Matusan-Ilijas K,Damante G,Fabbro D,etal.EGFR expression is linked to osteopontin and NF-κB signaling in clear cell renal cell carcinoma〔J〕.Clin Transl Oncol,2012;10(1):12089-94.

46Yasui W,Oue N,Ito R,etal.Search for new biomarkers of gastric cancer through serial analysis of gene expression and its clinical implications〔J〕.Cancer Sci,2004;95(5):385-92.

〔2013-09-17修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)