C3、C4及聯(lián)合多項指標檢測在腹腔積液良惡性鑒別中的診斷價值

C3、C4及聯(lián)合多項指標檢測在腹腔積液良惡性鑒別中的診斷價值

郭正武孫靜芳胡高峰續(xù)薇

(吉林大學第一醫(yī)院檢驗科，吉林長春130021)

摘要〔〕目的探討補體C3、C4及多項指標聯(lián)合檢測在腹腔積液良惡性鑒別診斷中的應(yīng)用價值。方法收集2014年3～8月該院的85例良性和43例惡性腹腔積液，采用免疫散射比濁法測定C3、C4、高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)及鐵蛋白(FERR)，電化學發(fā)光法測定甲胎蛋白(AFP)、CA125、CA199、癌胚抗原(CEA)，酶速率法測定膽固醇(CHO)，采用受試者工作曲線(ROC)及Logistic回歸分析各指標及聯(lián)合多項指標檢測對腹腔積液鑒別診斷的價值。結(jié)果與良性腹水組相比，惡性腹腔積液組CA125、CA199、CEA、C3、C4、CHO、hs-CRP及FERR均增高(P均<0.05)，其檢測靈敏度分別為55.8%，44.2%，60.5%，86.0%，90.7%，60.5%，79.1%，51.2%；特異性分別為85.9%，96.5%，92.9%，90.6%，84.7%，89.4%，74.1%，76.5%；準確度為75.8%，78.9%，82.0%，89.1%、88.3%，79.7%，75.8%，68.0%。采用CA199、CEA、C4、FERR聯(lián)合檢測后，其靈敏度、特異性、準確度分別為93.0%，92.9%，93.8%。結(jié)論惡性腹腔積液中補體C3、C4升高，且在單項指標中，C3及C4對于惡性腹腔積液的診斷價值最高，聯(lián)合多項指標檢測后可為惡性腹腔積液提供較高的診斷價值。

關(guān)鍵詞〔〕腹腔積液；補體；標志物

中圖分類號〔〕R446.19〔文獻標識碼〕A〔

通訊作者：續(xù)薇(1956-)，女，博士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，主要從事血液病與腫瘤分子生物學研究。

第一作者：郭正武(1989-)，男，碩士，主要從事血液病與腫瘤的分子診斷研究。

腹腔積液是常見的臨床表現(xiàn)之一，病因較多。惡性腹腔積液的出現(xiàn)往往預(yù)示著腫瘤已發(fā)生轉(zhuǎn)移。腹腔積液脫落細胞學檢查是診斷惡性腹腔積液的金標準，但敏感性低，診斷的陽性率只有40%～60%。隨著對于惡性腹腔積液研究的增多，乳酸脫氫酶(LDH)、腺苷脫氨酶(ADA)、膽固醇(CHO)、基質(zhì)金屬蛋白酶、鐵蛋白(FERR)，腫瘤標志物等一系列檢測指標應(yīng)用于腹腔積液良惡性的鑒別中。這些檢測提高了惡性腹腔積液的診斷正確率，但目前這些檢測的靈敏度和特異性尚不能滿足臨床需求。已有研究證實，腫瘤組織中補體升高〔1,2〕，本研究通過檢測腹腔積液中補體C3、C4水平及聯(lián)合檢測多項腫瘤標志物、生化指標，以期更好地鑒別診斷惡性腹腔積液。

1對象與方法

1.1對象選取我院2014年3～8月收集到的住院并且已確診良惡性的腹腔積液128例，其中惡性腹腔積液43例，良性85例。惡性腹腔積液組43例患者中，胃癌14例，卵巢癌10例，宮頸癌2例，結(jié)腸癌3例，肺癌2例，膽囊癌3例，胰腺癌3例，膀胱癌1例，未明原發(fā)部位者5例，其中男18例，女25例，平均年齡57.4歲，均經(jīng)過手術(shù)、影像、病理、脫落細胞學檢查等手段確診惡性腹腔積液。良性組腹腔積液包括肝硬化組74例，心衰患者6例，腎衰患者5例，男48例，女37例，平均年齡54.6歲，以上所有樣本均經(jīng)臨床確診，且未進行過相關(guān)治療。

1.2檢測儀器和方法采用我科日立7600-210ISE型全自動生化儀器測試FERR、CHO。鐵蛋白采用免疫散射比濁法測定，CHO采用酶法測定。瑞士羅氏CobasE601型電化學發(fā)光分析儀測定癌胚抗原(CEA)，甲胎蛋白(AFP)，糖類抗原(CA)125，CA199，測定方法為電化學發(fā)光；西門子BNⅡ型全自動特定蛋白分析儀測定C3、C4、高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，測定方法為免疫散射比濁法。所有測試均在6h內(nèi)完成。

1.3樣本收集方法所有樣本均在送到檢驗科12h內(nèi)用無菌20ml試管收集后3 000r/min離心10min，取2ml上清液體于無菌試管中-20℃保存，1個月內(nèi)進行測定。乳糜及血性腹腔積液經(jīng)離心后仍乳濁及血性者棄去。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS16.0軟件進行Mann-WhitneyU檢驗、繪制ROC并進行LogisticRegression運算。

2結(jié)果

2.1各項指標在良惡性腹腔積液中的檢測結(jié)果除惡性腹腔積液與良性腹腔積液AFP組間比較無統(tǒng)計學差異外(P=0.368)，其他各項指標均在惡性腹腔積液中增高(P<0.05)，見表1。

2.2各項指標對于良惡性腹腔積液診斷價值將各組數(shù)據(jù)經(jīng)過ROC曲線分析后，選取約登指數(shù)最大的點為cut-off值，大于cut-off值可認為其為惡性腹腔積液的可能性較大，用SPSS計算這些指標鑒別診斷良惡性腹腔積液的靈敏度、特異性和準確度及曲線下面積(AUC)。

由表2可知，CA125及FERR診斷價值較低，CA199、CEA、CHO、hs-CRP對于良惡性腹腔積液鑒別有一定準確度，而C3及C4的測定對于良惡性腹腔積液的鑒別來說具有較高的準確度。已知AUC在0.8以上時其診斷價值較好。

表1　9項指標在良惡性腹腔積液中的測定結(jié)果〔 P50( P25～ P75)〕

表2　各指標對于良惡性腹腔積液的診斷價值

對上述指標先進行單因素LogisticRegression回歸分析，將有意義的指標進行多因素分析，分別進行前向逐步分析與后向逐步分析，選取準確度較高的后向逐步分析結(jié)果納入方程，將符合條件的C3、C4，CA199，CEA，CA125，CHO，F(xiàn)ERR納入回歸方程，并對聯(lián)合指標產(chǎn)生的新變量PRE-1繪制的ROC進行分析后得出，C4、CEA、CA199及FERR聯(lián)合診斷時AUC最大(0.983)，95%CI為(0.939～0.997)，對應(yīng)的Logistic回歸方程為Y=1/ 〔 1+e-(-5.739 + 0.035CA199+ 0.08CEA+ 33.121C4+0.001FERR) 〕，最佳預(yù)測概率值為0.321，預(yù)測概率值≥0.321時，診斷為惡性腹腔積液。診斷靈敏度、特異性及準確度分別為93.0%，92.9%，93.8%，其檢測的靈敏度及特異性均較單一指標檢測提高。見表3。

表3　 Logistic回歸分析結(jié)果

3討論

在臨床工作中，很多良性疾病可導(dǎo)致腹腔積液的產(chǎn)生，其與惡性腫瘤引起的腹腔積液常需進行鑒別診斷。臨床上已應(yīng)用包括脫落細胞學、腫瘤標志物檢測、生化檢測等手段對腹腔積液進行鑒別診斷。近期以來，腫瘤細胞與周圍環(huán)境中炎癥分子間相互作用逐漸引起重視，已有研究表明腫瘤周圍微環(huán)境中白細胞介素(IL)-10、轉(zhuǎn)錄活化因子(STAT)3、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β等分子可抑制機體的免疫活動，使得腫瘤細胞更易發(fā)生免疫逃逸，且腫瘤在發(fā)生轉(zhuǎn)移后，可以改變新的轉(zhuǎn)移部位的一些免疫分子數(shù)量，這些分子可作為腫瘤轉(zhuǎn)移的標志物。

補體是機體的固有免疫系統(tǒng)中具有重要酶活性的蛋白質(zhì)分子，作為固有免疫重要的組成部分，廣泛參與機體抗感染的防御反應(yīng)、惡變細胞的清除以及免疫調(diào)節(jié)。在腫瘤細胞表面已發(fā)現(xiàn)一些抵抗補體發(fā)揮作用的分子，如補體調(diào)節(jié)蛋白CD46、CD55 及CD59，使得腫瘤細胞周圍微環(huán)境中補體沉積。這些細胞膜補體調(diào)節(jié)蛋白在腫瘤表面的過度表達，抑制了補體系統(tǒng)的正常作用，介導(dǎo)了腫瘤細胞的免疫耐受。一些研究已證實中和補體或清除補體可以更好地發(fā)揮藥物作用和增強自然殺傷(NK)細胞的殺傷腫瘤的作用〔3〕。腫瘤細胞表面補體調(diào)節(jié)蛋白的表達可使得腫瘤周圍微環(huán)境中的補體升高，同時一些研究也表明在腫瘤患者中可發(fā)現(xiàn)補體系統(tǒng)的表達增強，參與腫瘤細胞的免疫逃逸〔4〕，這些發(fā)現(xiàn)揭示了腫瘤免疫逃逸機制的多樣性和復(fù)雜性。研究表明，相對于良性腹腔積液而言，惡性腹腔積液中的補體C3和C4也會升高〔5〕，其可以作為輔助診斷惡性腹腔積液的良好指標。

AFP是臨床上用于篩查肝癌的特異性指標，在血液檢測中具有良好的診斷價值。CA125在包括良性腹腔積液在內(nèi)的患者腹腔積液均呈明顯升高。具體機制尚不明確，或許與腹腔積液的產(chǎn)生刺激間皮細胞CA125基因表達，產(chǎn)生大量CA125分泌入腹腔積液有關(guān)。CA199和CEA均可在胰腺癌、結(jié)直腸癌及胃癌等多種腫瘤中升高，對于腹腔積液良惡性鑒別來說，兩者診斷惡性腹腔積液準確度較高，具有較好的診斷價值，靈敏度及特異性與一些國內(nèi)外研究結(jié)論相似〔6，7〕。

CHO是脂類代謝物質(zhì)，有文獻報道其在惡性腹腔積液中含量常增高。本研究顯示CHO作為鑒別良惡性腹腔積液診斷價值較好，研究結(jié)果與國外報道一致〔8〕。hs-CRP及FERR均為急性時相蛋白，有報道認為他們在腹腔積液中的含量可在腫瘤存在的情況下增高〔9〕。本研究發(fā)現(xiàn)CRP及FERR在良惡性腹腔積液鑒別中雖有作用，但診斷價值較小。補體也可成為檢測腫瘤的良好標志物。

4參考文獻

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〔2015-03-26修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)