異氟烷麻醉后老年大鼠學(xué)習(xí)/記憶功能改變與腦海馬CA1區(qū)谷氨酸水平變化的關(guān)系

異氟烷麻醉后老年大鼠學(xué)習(xí)/記憶功能改變與腦海馬CA1區(qū)谷氨酸水平變化的關(guān)系

徐誠實(shí)曲向東吳安石1岳云1王庚

(北京積水潭醫(yī)院麻醉科，北京100035)

摘要〔〕目的觀察異氟烷麻醉后老年大鼠學(xué)習(xí)/記憶功能障礙模型中海馬CA1區(qū)谷氨酸濃度的動(dòng)態(tài)變化，探討術(shù)后認(rèn)知功能障礙(POCD)的可能機(jī)制。方法將38只老年大鼠(≥18月齡)隨機(jī)分為3組：對照組(n=6；不接受迷宮訓(xùn)練和麻醉)、空氣吸入組(n=7，接受迷宮訓(xùn)練但不接受麻醉)、異氟烷麻醉組(n=25，接受迷宮訓(xùn)練和麻醉)。應(yīng)用Morris水迷宮對大鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)/記憶功能測試，根據(jù)迷宮測試成績將異氟烷麻醉組大鼠進(jìn)一步分為學(xué)習(xí)/記憶功能明顯受損亞組(MIS組)和學(xué)習(xí)/記憶功能無明顯受損亞組(NMIS組)。應(yīng)用活體腦微透析系統(tǒng)收集不同時(shí)間點(diǎn)大鼠腦海馬CA1區(qū)的腦脊液并應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)測定腦脊液樣本中的谷氨酸濃度。結(jié)果接受異氟烷麻醉的大鼠學(xué)習(xí)/記憶功能明顯受損的發(fā)生率為12.0%(3/25)。異氟烷麻醉組大鼠麻醉過程中的谷氨酸濃度均明顯低于對照組和空氣吸入組(P<0.05)。異氟烷麻醉組大鼠麻醉結(jié)束后1 h時(shí)腦脊液谷氨酸濃度明顯低于空氣吸入組(P<0.01)，但與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。對照組和空氣吸入組大鼠在各時(shí)間點(diǎn)腦脊液谷氨酸濃度均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 異氟烷麻醉過程中，對照組和空氣吸入組腦脊液谷氨酸濃度均明顯高于NMIS 亞組(P<0.05)和MIS亞組(P<0.05)。麻醉1 h后，空氣吸入組谷氨酸水平明顯高于NMIS和MIS兩亞組(P<0.01)，而MIS亞組谷氨酸水平明顯低于對照組(P<0.05)。麻醉后24 h時(shí)，MIS亞組谷氨酸水平明顯高于對照組和NMIS亞組(P<0.05和<0.01)。麻醉后首次水迷宮訓(xùn)練時(shí)，MIS組谷氨酸濃度明顯高于NMIS組(P<0.05)。麻醉48 h以后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，MIS亞組谷氨酸水平均明顯高于其余3組。 結(jié)論異氟烷麻醉學(xué)習(xí)/記憶功能障礙大鼠模型中海馬CA1區(qū)谷氨酸水平呈持久性升高，提示麻醉后腦內(nèi)高谷氨酸水平可能與麻醉藥引發(fā)的學(xué)習(xí)/記憶功能障礙的病理生理過程有關(guān)。

關(guān)鍵詞〔〕谷氨酸；異氟烷；學(xué)習(xí)/記憶功能受損；Morris水迷宮

中圖分類號〔〕R749〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(No.30872435)

通訊作者：王庚(1970-)，男，主任醫(yī)師，副教授，主要從事神經(jīng)阻滯、腦功能、血液保護(hù)研究。

1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院麻醉科

第一作者：徐誠實(shí)(1981-)，男，住院醫(yī)師，主要從事神經(jīng)阻滯、腦功能、血液保護(hù)研究。

作為腦內(nèi)最豐富且最重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，谷氨酸參與了腦內(nèi)大部分功能。然而，谷氨酸濃度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞腫脹或神經(jīng)細(xì)胞壞死等細(xì)胞結(jié)構(gòu)或功能的損傷〔1～4〕，即興奮毒性效應(yīng)。有學(xué)者認(rèn)為興奮毒性效應(yīng)是神經(jīng)細(xì)胞死亡以及認(rèn)知功能障礙的最終共同通路，是多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的基礎(chǔ)〔5～9〕。雖然在多種原因?qū)е碌恼J(rèn)知功能障礙中都伴有腦內(nèi)或血液谷氨酸水平的變化〔10，11〕，但是否在術(shù)后認(rèn)知功能障礙(POCD)發(fā)病過程中也伴有谷氨酸濃度水平的變化及其變化趨勢至今仍不清楚。本文擬分析異氟烷引發(fā)的認(rèn)知功能受損與谷氨酸濃度變化之間的關(guān)系。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在得到醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，從四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心訂購老年大鼠50只(年齡>18月，體重400～550 g)。將大鼠在標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)箱中喂養(yǎng)，飼養(yǎng)室和實(shí)驗(yàn)室溫度(22±2)℃，濕度(55±5)%；安靜環(huán)境，避免強(qiáng)光、噪音等刺激；12∶12 h的生活節(jié)律下自由進(jìn)食進(jìn)飲。所有大鼠均常規(guī)熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員2 w。

1.2海馬微透析模型的建立及分組經(jīng)大鼠尾靜脈按照15 mg/kg的速度注入異丙酚，待大鼠體動(dòng)反應(yīng)消失后按照10 mg·kg-1·h-1的速度持續(xù)泵注異丙酚維持麻醉。用16G套管針對大鼠進(jìn)行氣管插管，插管成功后將大鼠固定在小動(dòng)物立體定位儀(ASI公司，美國)上并調(diào)整螺絲使大鼠顱頂呈水平位。應(yīng)用小動(dòng)物呼吸機(jī)進(jìn)行機(jī)控呼吸(潮氣量7～9 ml/min，呼吸頻率65～70次/min，吸呼比1∶2)，將兒童脈搏氧飽和度探頭固定于大鼠腳趾，監(jiān)測SpO2；根據(jù)SpO2調(diào)節(jié)呼吸參數(shù)，使SpO2≥95%。將小動(dòng)物體溫自動(dòng)控制器溫度探頭置入大鼠直腸并將溫度設(shè)為38℃以維持大鼠正常體溫。切皮前備皮并用強(qiáng)力碘將備皮區(qū)域消毒后酒精脫碘，常規(guī)鋪高壓滅菌消毒洞巾，操作過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。在小動(dòng)物立體定位儀引導(dǎo)下將微透析探針(CMA/12 14/02，CMA/Microdialysis)準(zhǔn)確置入大鼠海馬CA1區(qū)(前囟向后4.5 mm，旁開2 mm，深度為顱骨下2 mm)，然后用消毒過的銅絲和牙粉將導(dǎo)管固定在大鼠顱骨上。所有大鼠均常規(guī)喂養(yǎng)1 w，如傷口愈合良好、無滲血滲液、活動(dòng)狀態(tài)佳、無神經(jīng)損害癥狀等即進(jìn)行水迷宮測試和微透析實(shí)驗(yàn)。

最終有38只大鼠納入實(shí)驗(yàn)，隨機(jī)分為3組：對照組(n=6；不接受迷宮訓(xùn)練和麻醉)、空氣吸入組(n=7，接受迷宮訓(xùn)練但不接受麻醉)和異氟烷麻醉組(n=25，接受迷宮訓(xùn)練和麻醉)。在特定的時(shí)間點(diǎn)收集微透析組大鼠海馬CA1區(qū)腦脊液。

1.3行為學(xué)測試應(yīng)用Morris水迷宮對大鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)/記憶能力測試，分為定向航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)兩個(gè)部分。

定位航行試驗(yàn)用于測量大鼠獲取空間學(xué)習(xí)記憶的能力。將水迷宮分為4個(gè)象限，試驗(yàn)開始前至少2 h將大鼠放入池中自由游泳90 s，不放置平臺(tái)，讓其熟悉迷宮環(huán)境。正式進(jìn)行水迷宮測試時(shí)，將平臺(tái)置于某一象限中部，將大鼠分別從4個(gè)象限不同入水點(diǎn)面向池壁放入水池，直至找到隱藏在水面下的平臺(tái)為止。找到平臺(tái)后允許動(dòng)物在平臺(tái)上滯留60 s；如果動(dòng)物在90 s內(nèi)沒有找到平臺(tái)，則實(shí)驗(yàn)者幫助動(dòng)物找到平臺(tái)(潛伏期記為120 s)，在平臺(tái)上休息60 s，再進(jìn)行下次實(shí)驗(yàn)。通過自動(dòng)錄像系統(tǒng)記錄大鼠找到平臺(tái)的時(shí)間(逃避潛伏期，ELP)、路線圖、游泳速度等。吸入空氣或異氟烷麻醉前后的行為學(xué)測試分別歷時(shí)5 d，每天上、下午各進(jìn)行1次。

空間探索試驗(yàn)用于評測大鼠保持對平臺(tái)空間位置記憶的能力。在第5天的最后一次定位巡航試驗(yàn)后去除平臺(tái)，然后任選一個(gè)入水點(diǎn)將大鼠放入水池中，記錄大鼠在90 s內(nèi)搜索平臺(tái)的路線圖和在目標(biāo)區(qū)域的滯留時(shí)間。

Morris水迷宮檢測結(jié)束后，水池內(nèi)換成清水，使水面略低于平臺(tái)進(jìn)行大鼠視力測試，以檢測大鼠視力是否正常。

1.4異氟烷麻醉將大鼠置入特制的麻醉箱內(nèi)進(jìn)行異氟烷麻醉，異氟烷濃度為1.2%，歷時(shí)2 h。麻醉過程中將小動(dòng)物體溫自動(dòng)控制器體溫探頭置入大鼠直腸，并將溫度設(shè)定為38℃。麻醉過程中常規(guī)監(jiān)測血氧飽和度并應(yīng)用無創(chuàng)小動(dòng)物血壓計(jì)(ZH-HX-Z，安徽省)測量尾靜脈血壓。

1.5海馬腦脊液微透析樣本的獲取除異氟烷麻醉過程外，所有活體微透析實(shí)驗(yàn)均在大鼠清醒、自由活動(dòng)條件下完成。將大鼠移至自由活動(dòng)大鼠微透析系統(tǒng)內(nèi)，在大鼠合作的情況下將探針置入導(dǎo)管抵達(dá)大鼠海馬，連接自由活動(dòng)系統(tǒng)。微透析系統(tǒng)內(nèi)應(yīng)用人工腦脊液(內(nèi)含NaCl 147 mmol/L，KCl 2.7 mmol/L，CaCl21.2 mmol/L，MgCl20.85 mmol/L)灌注，微量泵(CMA/102 microdialysis pump，CMA/Microdialysis AB，Stockholm，Sweden)泵速為2.5 μl/min并預(yù)充1 h以確保微透析系統(tǒng)內(nèi)人工腦脊液灌注完全。未進(jìn)行行為學(xué)測試前進(jìn)行一次微透析，此后分別在麻醉前行為學(xué)測試結(jié)束后、麻醉過程中、麻醉后1、12、24和48 h以及麻醉后每次行為學(xué)測試后均進(jìn)行微透析操作。微透析樣本均在0℃條件下收集且收集時(shí)間設(shè)定為15 min，收集完畢后將微透析樣本立即轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱保存?zhèn)錅y。

1.6質(zhì)量控制接受異氟烷麻醉的大鼠在麻醉過程中均進(jìn)行動(dòng)脈血?dú)夥治?見表1)，麻醉過程中發(fā)生低氧血癥的大鼠均不納入研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用水合氯醛麻醉大鼠并用磷酸鹽緩沖液(PBS)+10%甲醛溶液進(jìn)行灌注，待組織固定后取腦并將腦組織沿冠狀面切成40 μm厚的薄片進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色以確定微透析探針位置，位置不當(dāng)者予以排除。

表1　異氟烷麻醉中生理指標(biāo)和動(dòng)脈血?dú)夥治鼋Y(jié)果 ± s)

1.7谷氨酸濃度的測定應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC，Agilent 1200)測定微透析樣本中的谷氨酸濃度。HPLC系統(tǒng)由四元泵(Agilent G 1311A)、熒光探測儀(G 1321 A)、柱溫箱(Agilent G 1316A)以及安捷倫化學(xué)工作站組成。(1)柱前自動(dòng)衍生化：取5 mg鄰苯二甲醛(OPA)溶于120 μl甲醇中，充分溶解后加入10 μl β-巰基乙醇和1 ml 0.2 mol硼酸緩沖液(pH 9.2) 搖勻避光4℃冷藏備用。(2)色譜條件：色譜柱ZORBAX Eclipse AAA(4.6×150 mm,5 μm)；流動(dòng)相，A為緩沖液，甲醇：四氫呋喃=400∶95∶5；B為緩沖液，甲醇=120∶380,緩沖液為20 mmol/L乙酸鈉溶液(pH 7.2)。梯度洗脫程序:0～10 min，B%為0%～65%；10～12 min，B%為63%～63%；12.00～12.01 min，B%為63%～100%；12.01～17.00 min，B%為100% ～100%；17.00～18.00 min，B%為100%～0%；18.00～22.00 min，B%為0%～0%。流速:0.8 ml/min；檢測波長:激發(fā)光波長λex=340 nm,發(fā)射光波長λem = 450 nm。柱溫40℃,進(jìn)樣量15 μl。(3)自動(dòng)程序進(jìn)樣：25 μl氨基酸樣品溶液，加入7.5 μl衍生化試劑，自動(dòng)混勻6次，反應(yīng)0.5 min后立即進(jìn)樣。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS11.5軟件行方差分析和雙變量相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1水迷宮測試成績?nèi)舢惙槁樽斫M麻醉后水迷宮訓(xùn)練的逃避潛伏期較同一時(shí)間點(diǎn)空氣吸入組的平均逃避潛伏期延長超過1.96倍SD則認(rèn)為該大鼠學(xué)習(xí)/記憶功能明顯受損。依此標(biāo)準(zhǔn)，將異氟烷麻醉組大鼠分為學(xué)習(xí)/記憶功能明顯受損亞組(MIS組)和學(xué)習(xí)/記憶功能無明顯受損亞組(NMIS組)〔12〕。依此標(biāo)準(zhǔn)，接受異氟烷麻醉的大鼠學(xué)習(xí)/記憶明顯受損的發(fā)生率為12%(3/25)。

2.1.1定位航行實(shí)驗(yàn)(學(xué)習(xí)能力)見圖1。

2.1.2空間探索試驗(yàn)(記憶能力)麻醉前后定位航行實(shí)驗(yàn)測試完畢2 d后均進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)以測試大鼠對平臺(tái)空間位置的記憶能力。撤去平臺(tái)后觀察90 s內(nèi)大鼠在目標(biāo)區(qū)域的滯留時(shí)間，結(jié)果見圖2。

2.1.3行為學(xué)測試(游泳速度)接受行為學(xué)測試的各組大鼠在麻醉前后游泳速度均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明微透析探針置入和異氟烷麻醉均未對大鼠的運(yùn)動(dòng)能力造成明顯損害，見圖3。

2.2谷氨酸濃度

2.2.1對照組、空氣吸入組和異氟烷麻醉組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)谷氨酸濃度變化見圖4Ⅰ，麻醉過程中接受異氟烷麻醉的大鼠谷氨酸濃度明顯低于對照組和空氣吸入組(P=0.015，0.011)；在麻醉后1 h時(shí)間點(diǎn)上接受異氟烷麻醉的大鼠谷氨酸濃度明顯低于空氣吸入組(P<0.01)，而與對照組相比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.79)。而在其他時(shí)間點(diǎn)上接受異氟烷麻醉的大鼠谷氨酸濃度與對照組和空氣吸入組相比較均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

與空氣吸入組比較：1)P<0.01;與MIS亞組比較：2)P<0.01 圖1　麻醉前后行為學(xué)測試成績

2.2.2對照組、空氣吸入組、NMIS組和MIS組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)谷氨酸濃度變化見圖4Ⅱ?qū)φ战M和空氣吸入組大鼠谷氨酸濃度在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。麻醉過程中NMIS組和MIS組大鼠谷氨酸濃度均明顯低于對照組和空氣吸入組(P<0.05)。麻醉后1 h時(shí)間點(diǎn)上空氣吸入組大鼠谷氨酸濃度明顯高于NMIS組和MIS組 (P<0.01)，MIS組的谷氨酸濃度明顯低于對照組(P=0.03),而與空氣吸入組相比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在麻醉后24 h時(shí)間點(diǎn)上MIS組谷氨酸濃度較對照組和NMIS組明顯升高(P=0.029)，而與空氣吸入組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MIS組谷氨酸濃度在麻醉后84 h時(shí)間點(diǎn)上明顯高于其余三組(P=0.03，0.019和0.01)。麻醉后第一次行為學(xué)測試后MIS組的谷氨酸濃度明顯高于NMIS組(P=0.032)，而在麻醉后行為學(xué)測試的其他時(shí)間點(diǎn)上MIS組的谷氨酸濃度均明顯高于其余3組(P<0.01)。

與空氣吸入組比較：1)P<0.05；與MIS比較：2)P<0.05 圖2　大鼠定位航行試驗(yàn)在目標(biāo)區(qū)域滯留時(shí)間

圖3　麻醉前后平均游泳速度

與空氣吸入組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與對照組比較:3)P<0.05；與MIS組比較：4)P<0.05；bl= 基礎(chǔ)狀態(tài); pt=麻醉前行為學(xué)測試后濃度; ma=麻醉中濃度; pa-1=麻醉后1 h濃度; pa-12=麻醉后12 h濃度; pa-24=麻醉后24 h濃度; pa-48=麻醉后48 h濃度;pat-1～pat-10分別為麻醉后第一～十次行為學(xué)測試濃度 圖4　麻醉前行為學(xué)測試、麻醉中和麻醉后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組谷氨酸濃度變化趨勢圖

2.3麻醉后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)測試成績與谷氨酸相關(guān)性除麻醉后NMIS組第5次和第10次行為學(xué)測試外，各組海馬內(nèi)谷氨酸濃度的水平與大鼠的行為學(xué)測試成績之間均有明顯相關(guān)性(P<0.05)(表2)。

表2　麻醉后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)測試成績與谷氨酸濃度相關(guān)性

3討論

由于POCD的患者臨床表現(xiàn)與早期阿爾茨海默病(AD)類似而且POCD可能進(jìn)一步發(fā)展為AD，因此有人認(rèn)為POCD是AD的一種前期病變〔1〕，且POCD與AD的病理機(jī)制類似〔1，10，11〕。近年來麻醉也被認(rèn)為是除了年齡之外的另一個(gè)潛在的危險(xiǎn)因素〔13～17〕。到目前為止雖然有許多有關(guān)麻醉藥引發(fā)認(rèn)知功能障礙的臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)道，但是確切機(jī)制仍不清楚〔18～21〕。谷氨酸被視為哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最重要的興奮性經(jīng)遞質(zhì)〔22〕，正常情況下谷氨酸在長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)有重要作用，而LTP被認(rèn)為是學(xué)習(xí)和記憶過程的基礎(chǔ)，大腦海馬LTP是記憶形成和鞏固過程中神經(jīng)元活動(dòng)的客觀指標(biāo)〔23〕。然而，谷氨酸是一把雙刃劍，在特定情況下可以從一種正常的神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N神經(jīng)毒性物質(zhì)〔24〕，對腦產(chǎn)生興奮性毒性作用〔2～4〕。有學(xué)者認(rèn)為興奮毒性效應(yīng)是神經(jīng)細(xì)胞死亡以及認(rèn)知功能障礙的最終共同通路，是多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的基礎(chǔ)〔5～9〕，與腦缺血缺氧性疾病、創(chuàng)傷性腦損傷、AD、帕金森病和亨廷頓病等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病中神經(jīng)細(xì)胞死亡有關(guān)〔25〕。雖然關(guān)于谷氨酸興奮毒性效應(yīng)在認(rèn)知功能受損中的始因性作用已有諸多報(bào)道，但是有關(guān)異氟烷導(dǎo)致的認(rèn)知功能受損與谷氨酸系統(tǒng)之間相關(guān)性的直觀動(dòng)態(tài)性的證據(jù)極少。

蔡桂蘭等〔26〕發(fā)現(xiàn)遺忘型輕度認(rèn)知障礙(aMCI)及AD的患者血清谷氨酸濃度較正常對照者明顯升高。疏樹華等〔27〕也發(fā)現(xiàn)患有POCD的老年患者顱內(nèi)靜脈血內(nèi)谷氨酸濃度明顯高于未患有POCD的老年患者。雖然他們的研究成果顯示谷氨酸濃度升高與認(rèn)知功能減退有關(guān)，且靜脈血中谷氨酸濃度與腦內(nèi)谷氨酸濃度有良好相關(guān)性，但是靜脈內(nèi)谷氨酸濃度升高只是腦內(nèi)谷氨酸濃度的一個(gè)反映而并非腦脊液中谷氨酸的真實(shí)濃度。而且這些研究都是位相性而非連續(xù)性的，因此不能反映在POCD發(fā)生發(fā)展過程中腦脊液谷氨酸濃度的真實(shí)水平和變化趨勢。本研究結(jié)果與以上研究不同。更為重要的是，麻醉后谷氨酸濃度升高與異氟烷麻醉后大鼠的迷宮成績之間有明顯相關(guān)。也就是說，谷氨酸濃度越高，學(xué)習(xí)記憶能力越差，這與Temple等〔28〕的研究結(jié)果相符合。且Lipton等〔29〕也認(rèn)為，谷氨酸的興奮性毒性作用是以持續(xù)、輕度、慢性、緊張性的方式而非位相性的方式起作用的。

雖然有文獻(xiàn)報(bào)道稱學(xué)習(xí)過程也會(huì)導(dǎo)致谷氨酸濃度輕微升高〔30〕，但是筆者認(rèn)為麻醉后發(fā)生認(rèn)知功能受損大鼠腦脊液中谷氨酸濃度升高并非由迷宮學(xué)習(xí)過程引起，因?yàn)槁樽砬敖邮苄袨閷W(xué)測試后大鼠腦脊液谷氨酸濃度并未表現(xiàn)出明顯升高而且在認(rèn)知功能無明顯受損大鼠的腦脊液中也無谷氨酸濃度明顯升高。同樣，雖然有眾多文獻(xiàn)報(bào)道腦損傷也會(huì)導(dǎo)致谷氨酸濃度升高〔31，32〕，但是筆者認(rèn)為此持續(xù)性谷氨酸濃度升高并非與海馬區(qū)微透析導(dǎo)管植入引起的腦損傷有關(guān)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道〔31〕，如果此谷氨酸濃度升高來源于腦組織損傷，那么谷氨酸濃度會(huì)比該實(shí)驗(yàn)中的谷氨酸濃度高很多，因此，筆者將此谷氨酸濃度升高歸因于眾多文獻(xiàn)報(bào)道過的異氟烷麻醉誘發(fā)的神經(jīng)元受損〔33～36〕。正因?yàn)樯窠?jīng)元受損，因此細(xì)胞內(nèi)的谷氨酸外流至細(xì)胞外間隙進(jìn)而引發(fā)腦脊液中谷氨酸濃度升高。而此持續(xù)緩慢的谷氨酸濃度輕度升高可能是異氟烷引發(fā)的認(rèn)知功能受損的早期表現(xiàn)。

綜上，異氟烷引起的認(rèn)知功能受損伴有腦海馬CA1區(qū)谷氨酸濃度的持續(xù)性升高，提示其可能參與異氟烷引發(fā)的認(rèn)知功能受損的病理生理過程。

4參考文獻(xiàn)

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〔2015-09-03修回〕

(編輯曲莉)