IL-17在自身免疫性肝炎中的作用

段樹鵬 朱利紅453100新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院

IL-17在自身免疫性肝炎中的作用

段樹鵬 朱利紅
453100新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院

目的：研究IL-17在自身免疫性肝炎肝組織中的表達及意義。方法：選取自身免疫性肝炎患者45例，經(jīng)肝穿收集其肝組織，對照組選取正常肝組織10例，采用免疫組化的方法檢測肝組織中的IL-17的表達情況，并探討IL-17與自身免疫性肝炎纖維化分期相關(guān)性。結(jié)果：自身免疫性肝炎患者肝組織IL-17陽性的表達量高于對照組（P＜0.01），IL-17和自身免疫性肝炎肝纖維化程度相關(guān)。結(jié)論：IL-17可能參與了自身免疫性肝病的發(fā)病過程，降低IL-17活性程度，可能會減輕自身免疫性肝炎發(fā)病和纖維化程度。

IL-17；自身免疫性肝炎；肝纖維化

我國為肝炎大國，其中包括自身免疫性肝炎（Autoimmune hepatitis，AIH），其發(fā)病機制不明，目前研究以免疫方面居多。以往診斷較少，隨著診療技術(shù)的不斷發(fā)展，近年來自身免疫性肝炎發(fā)病率呈上升趨勢，其發(fā)病以女性多見，可發(fā)展為肝硬化，我國人群中AIH的發(fā)病率尚無相關(guān)確切的數(shù)字[1]。目前，關(guān)于白介素-17（Interleukin 17，IL-17）與自身免疫性疾病國內(nèi)外已有不少報道，但與自身免疫性肝炎相關(guān)性的報道較少，本研究旨在探討IL-17在自身免疫性肝炎中的作用。

資料與方法

2012年1月-2014年8月收治AIH患者45例，AIH診斷標準參考美國肝病學(xué)會（American association for the Study of liver disease，AASLD）2010年的AIH診療指南[2]，其中男7例，女38例，平均年齡（43.83±6.18）歲。所選病例均經(jīng)肝臟穿刺活檢確診，并排除乙、丙等病毒性及酒精性、藥物誘導(dǎo)、代謝性、遺傳性因素等。對照組為10例正常肝組織（外傷手術(shù)切除），排除病毒性及酒精性、自身免疫性肝病等。兔抗人IL-17多克隆抗體來自美國Santa cruz公司。

實驗方法：根據(jù)Metavir合作研究小組提出的慢性肝病纖維化評分標準對AIH患者進行纖維化評分。纖維化評分：①F0：無纖維化細胞增生；②F1：匯管區(qū)成纖維細胞增生并向小葉內(nèi)延伸；③F2：匯管區(qū)周圍或匯管區(qū)成纖維細胞大量增生并向小葉內(nèi)大量延伸；④F3：分隔性纖維化期，表現(xiàn)為纖維間隔伴結(jié)構(gòu)破壞，無明顯硬化；⑤F4：即硬化期，纖維間隔形成伴有小葉結(jié)構(gòu)紊亂。根據(jù)評分確定F0期l1例、F1期9例、F2期8例、F3期10例、F4期7例。采用免疫組化的方法檢測肝組織中的IL-17的表達情況，同時檢測不同病理分期肝組織中的IL-17的表達情況，探討IL-17意義及相關(guān)性。

免疫組化染色結(jié)果判定：用高數(shù)碼顯微圖像分析系統(tǒng)測定IL-17的陽性細胞數(shù)，每張切片分別取5個鏡下（10×10）倍視野，讀取陽性細胞數(shù)，取其平均值，進行統(tǒng)計學(xué)分析。

結(jié)果

光鏡下正常肝組織的HE染色可見肝細胞索排列正常有序，肝板呈放射狀整齊排列，肝竇與匯管區(qū)未見纖維組織增生，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，AIH患者的病理損害多表現(xiàn)為匯管區(qū)漿細胞和淋巴細胞浸潤，典型特征為界面性肝炎和肝細胞玫瑰花樣改變，IL-17主要表達于炎性細胞浸潤明顯的匯管區(qū)，肝細胞中無表達，主要在單核細胞和淋巴細胞的胞漿中，均質(zhì)狀，呈棕色。病理結(jié)果顯示，AIH患者的IL-17陽性表達細胞數(shù)明顯增加，10例對照組正常肝臟組織中可見IL-17陽性少量細胞表達，見圖1。而且AIH患者肝臟組織中IL-17的表達強度與肝臟組織學(xué)纖維化程度相關(guān)，病理圖片顯示，肝組織纖維化分期早期時可見少量肝小葉中央靜脈周圍的肝細胞漿有陽性表達，隨肝纖維化分期的增加，棕褐色物質(zhì)較前增多，著色程度亦較前加深，到最后呈強陽性分布于纖維化區(qū)、肝竇區(qū)、血管壁及膽管細胞，顯示AIH患者肝臟組織中IL-17的表達強度與肝臟組織學(xué)纖維化程度相關(guān)，纖維化程度越重則表達越多，見圖2。比較各組陽性細胞數(shù)，AIH患者肝臟組織表達IL-17均明顯高于對照組（P＜0.01），見表1。

圖1 肝纖維化組織不同病理分期IL-17表達（DAB staining，×200）

表1 IL-17在AIH組與對照組肝組織平均陽性細胞數(shù)比較（±s）

表1 IL-17在AIH組與對照組肝組織平均陽性細胞數(shù)比較（±s）

注：AIH與對照組，P＜0.01。

組別 AIH 對照組 t P IL-17 38.33±2.31 5.89±2.92 4.855 ＜0.01

討論

作為CD4+T族群的一種新型Th細胞，Th17細胞可以抵抗多種細胞外細菌和真菌感染，在機體防御方面發(fā)揮重要的作用，同時還參與和介導(dǎo)許多自身免疫性疾病的發(fā)病，已被證實Th17細胞分泌重要的炎性因子，其能增強炎性細胞因子如IL-1、IL-6、IL-23的表達，使單核細胞及中性粒細胞迅速增長，引起機體組織的損害。研究已經(jīng)證明應(yīng)用IL-17基因的小鼠，自身免疫性疾病進程得以延緩，嚴重程度下降[3]。研究發(fā)現(xiàn)在AIH動物實驗中，肝臟門管區(qū)IL-17陽性淋巴細胞浸潤明顯增多，這提示IL-17細胞可能參與了自身免疫性肝病的發(fā)病過程，并在其發(fā)生發(fā)展中起調(diào)節(jié)作用。有研究顯示IL-17主要通過刺激多種類型的肝臟非實質(zhì)細胞產(chǎn)生前炎性介質(zhì)及趨化因子，從而對肝臟造成了損傷。在本研究中，AIH患者肝臟組織中IL-17表達明顯高于正常對照組，說明AIH患者肝臟炎性浸潤細胞中，細胞因子IL-17明顯增多，而且隨著AIH纖維化程度的加重，IL-17的表達亦增加，顯示在AIH的發(fā)病過程中，IL-17可能介導(dǎo)了肝臟的炎癥及纖維化。

圖2 肝纖維化組織不同病理分期的IL-17平均細胞值

目前醫(yī)學(xué)界仍未能完全攻克AIH，其發(fā)病機制尚不完全清楚，既往AIH的藥物治療主要著重于抑制肝臟的免疫反應(yīng)，主要有皮質(zhì)類固醇激素，作用于免疫系統(tǒng)，抑制T淋巴細胞活性，硫唑嘌呤則能阻止淋巴細胞前體的成熟。研究顯示合理的免疫抑制治療患者的緩解率可達60％～80％，10年患者生存率達90％[4]。但自身免疫性肝炎一旦發(fā)展為肝硬化，或?qū)に刂委煵荒苣褪艿幕颊?，或已?jīng)發(fā)展到終末期肝病的患者，預(yù)示著不僅治療效果會很差，而且需要花費巨大的治療費用。大量的實驗研究已證明，早期的肝纖維化是唯一可以逆轉(zhuǎn)的階段，本研究顯示IL-17與各AIH患者肝臟組織纖維化分期均呈正相關(guān)（圖2），顯然如果通過早期藥物干預(yù)以降低L-17活性程度，可能會減輕自身免疫性肝病發(fā)病和纖維化程度，同時為我們今后臨床上自身免疫性肝炎的防治提供了新的思路。

[1] Wang SB，Wang JH，Zheng RH，et al.Deep cholestatic jaundice asthe predominant manifes-tation in autoimnlune hepatitis[J].Hepatogastroenterology，2010，57（98）：326-329.

[2] Manns MP，Czaja AJ，Gorham JD，et al.Diagnosis and management of autoimmune hepatitis[J].Hepatoiogy，2010，51（6）：2193-2213.

[3] Komiyama Y，Nakae S，Matsuki T，et al.IL-17 plays an important role in the development of experimental autoimmune encephalomlyelitis[J].J Immunol，2006，177（1）：566-573.

[4] Krawitt EL.Autoimmune HepatiIis[J].N Engl J Med，2006，354（1）：54-66.

The role of IL-17 in autoimmune hepatitis

Duan Shupeng，Zhu Lihong
The First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical College 453100

Objective：To study the expression and significance of IL-17 in autoimmune hepatitis liver tissue.Methods：45 patients with autoimmune hepatitis were selected.The liver tissue was selected through liver biopsy.The control group selected 10 cases of normal liver tissues.The IL-17 expression in the liver tissue was detected by immunohistochemical method，and the relevance between IL-17 and autoimmune hepatitis fibrosis staging was explored.Results：The IL-17 positive expression in the liver tissue of patients with autoimmune hepatitis was higher than that of the control group（P＜0.01）.IL-17 had relevance with autoimmune hepatitis fibrosis degree.Conclusion：IL-17 may be involved in the pathogenesis process of autoimmune liver disease.Reducing the activity degree of IL-17 may reduce the incidence of autoimmune hepatitis and fibrosis degree.

IL-17；Autoimmune hepatitis；Hepatic fibrosis

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.19.67