茉莉花葉水提物對小腸平滑肌的影響

茉莉花葉水提物對小腸平滑肌的影響

翟玉榮劉波莫鎮(zhèn)濤李意奇

(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，廣東珠海519041)

摘要〔〕目的觀察茉莉花葉水提物對小腸平滑肌的作用。方法采用常規(guī)離體灌注小腸平滑肌標(biāo)本方法，觀察給藥前后離體家兔小腸平滑肌平均張力、振幅及收縮頻率變化，并檢測其對在體小鼠小腸推進(jìn)功能的影響。結(jié)果與給藥前相比，茉莉花葉水提物槽內(nèi)終濃度(2.0～6.0)×10-2 g生藥/ml可使家兔離體十二指腸平滑肌平均張力及振幅顯著降低，并隨著給藥劑量增加，抑制作用增強，當(dāng)終濃度為4.0×10-2 g生藥/ml時抑制效應(yīng)達(dá)到最大,但各濃度組對收縮頻率均無明顯影響。40 g生藥/kg、20 g生藥/kg劑量組對小鼠小腸推進(jìn)運動亦有顯著抑制作用。結(jié)論茉莉花葉水提物對家兔離體小腸平滑肌活動及小鼠小腸的推進(jìn)運動有抑制作用，其作用機(jī)制可能與平滑肌細(xì)胞膜上的M受體有關(guān)，而與α,β受體無關(guān)。

關(guān)鍵詞〔〕茉莉花葉水提物；小腸平滑肌

中圖分類號〔〕R285.5〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

基金項目：貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)

通訊作者：劉波(1978-)，男，碩士，講師，主要從事腎臟及消化生理研究。

第一作者：翟玉榮(1976-)，女，副教授，碩士，主要從事心血管藥理學(xué)與新藥研發(fā)工作。

茉莉除了可用于香料物質(zhì)來源外，還具有一定的藥物價值，傳統(tǒng)中醫(yī)藥中，茉莉的花、根、葉均可入藥〔1〕。有關(guān)茉莉花的化學(xué)藥理研究較多,并取得了一定的成果〔2,3〕。為綜合利用資源，國內(nèi)外對茉莉花芳香性成分以外的化學(xué)成分和植物其他部位的成分也進(jìn)行了一些研究〔4～6〕，目前我國對茉莉花的研究主要停留在花朵上。本實驗擬觀察茉莉花葉水提物對離體家兔小腸平滑肌活動及小鼠小腸推進(jìn)運動的影響。

1材料與方法

1.1藥物與試劑茉莉花葉水提物(自制，2 g生藥/ml)的制備:稱取500 g新鮮茉莉花葉(珠海市農(nóng)科所農(nóng)業(yè)高新技術(shù)研究中心提供及鑒定)，加入蒸餾水浸泡30 min，加適量的蒸餾水煮沸后用文火煎煮3次，每次0.5 h，合并3次煎出濾液，靜止去渣，然后用旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮后定容至250 ml，即配成濃度為2 g生藥/ml備用。碳末混懸液(含碳末0.1 g/ml)。0.1%心得安(常州康普藥業(yè)有限公司，批號：1205002),0.1%酚妥拉明(江蘇康寶制藥有限公司，批號：120201)，0.1%氯化乙酰膽堿(北京天宇祥瑞科技有限公司，批號：120806)。

1.2動物新西蘭兔8只,雌雄不限,體重2.0～2.5 kg,昆明種小鼠30只,雌雄各半,體重18～22 g。以上動物均由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供〔合格證號：SCXK(粵)2012-0002〕。

1.3儀器BL-420E生物信號采集處理系統(tǒng)、張力換能器和恒溫平滑肌浴槽均由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)儀由上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)，型號RE-52。

1.4對家兔離體小腸平滑肌的影響①家兔離體小腸平滑肌標(biāo)本制備及收縮活動記錄方法：家兔在實驗前禁食24 h，自由飲水，實驗前1 h喂食。將家兔倒懸,用木棰猛擊兔頭枕部，使其昏迷，迅速沿腹部正中切開腹部，找出幽門與十二指腸交界處，以此處為起點，找出十二指腸，剪取腸管一段，置于充氧的室溫臺氏液的平皿中，洗凈腸管內(nèi)容物，當(dāng)腸管活動明顯時，將十二指腸剪成2～2.5 cm的腸段備用。連接張力換能器、BL-420E生物信號采集系統(tǒng)、計算機(jī)和恒溫水浴槽。浴槽內(nèi)溫度保持在(37.0±0.5)℃。取一段腸管將其對角的兩端用線結(jié)扎，一端系在通氣管的鉤上，另一端與張力換能器相連，使標(biāo)本垂直懸掛于恒溫浴槽內(nèi)的盛有20 ml臺氏液浴管中，持續(xù)慢慢通入空氣,其速度以持續(xù)單個氣泡出現(xiàn)而不沖動小腸為宜，調(diào)整適宜的肌張力，給予標(biāo)本2.0 g的基礎(chǔ)負(fù)荷，待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定20 min后開始給藥記錄。②不同劑量茉莉花葉水提液對小腸平滑肌收縮的影響：待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定后，記錄一段正常曲線，然后累計加入茉莉花葉水提液,使槽內(nèi)終濃度分別為(1.0～6.0)×10-2g生藥/ml，每次換藥后,用(37.0±0.5)℃臺氏液反復(fù)沖洗腸管3次，待舒縮恢復(fù)到用藥前水平再加入下組藥液，觀察給藥前3 min和給藥后3 min腸管收縮平均張力和收縮頻率變化，并計算抑制率〔抑制率=(給藥后-給藥前)/給藥前〕。③心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對茉莉花葉水提物效應(yīng)的影響：待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定后，記錄一段正常曲線，然后分別加入0.1%心得安0.1 ml、0.1%酚妥拉明0.1 ml和0.1%乙酰膽堿0.1 ml,分別觀察小腸平滑肌收縮活動變化，待各自加入上述藥3 min后再分別加入茉莉花葉水提物使其終濃度為4.0×10-2g生藥/ml，分別觀察上述藥對茉莉花葉水提物效應(yīng)的影響，每次換藥方法同②。

1.5對小鼠小腸推進(jìn)運動的影響昆明種小鼠30只(禁食24 h,不禁水)，隨機(jī)平均分為空白對照組(蒸餾水)、茉莉花葉水提液高劑量組(40 g生藥/kg)和低劑量組(20 g生藥/kg)，均采取灌胃給藥，每組10只。各組給藥后45 min，用碳末混懸液(含碳末0.1 g/ml)0.2 ml/10 g灌胃，20 min后脫頸椎處死小鼠，打開腹腔，分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上將小腸拉直，測量腸管長度作為小腸總長度，從幽門至碳末前沿的距離作為碳末推進(jìn)距離，計算碳末推進(jìn)百分率=碳末推進(jìn)距離(cm)/小腸總長度(cm)。

1.6統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS19.0軟件行t檢驗。

2結(jié)果

2.1茉莉花葉水提物對家兔離體十二指腸平滑肌活動的影響與給藥前相比，茉莉花葉水提物終濃度(2.0～6.0)×10-2g生藥/ml對家兔離體十二指腸平滑肌收縮活動均有抑制作用，表現(xiàn)為平均張力和振幅均明顯下降(P<0.05或P<0.01)；隨著給藥劑量增加，其抑制作用增強，在終濃度4.0×10-2g生藥/ml時其抑制效應(yīng)達(dá)到最大。但各劑量組對收縮頻率無明顯抑制作用(P<0.05)。見表1。

表1　茉莉花葉水提液對家兔離體十二指腸平滑肌收縮活動的影響( n=10， ± s)

與給藥前比較：1)P<0.05，2)P<0.01

2.2心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對茉莉花葉水提液效應(yīng)的影響分別加入心得安、酚妥拉明后，與給藥前相比，家兔離體十二指腸平均張力和振幅均增加(P<0.05)；加入乙酰膽堿后，與給藥前相比，十二指腸平滑肌平均張力顯著增加(P<0.05)，但收縮頻率無明顯變化(P>0.05)。3 min后再加入茉莉花葉水提液(終濃度4.0×10-2g生藥/ml)，與單獨加入心得安、酚妥拉明或乙酰膽堿相比，十二指腸平均張力和振幅均明顯下降(P<0.05)，但收縮頻率無明顯變化(P>0.05)。見表2。

表2　心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對茉莉花葉

與給藥前比較：1)P<0.05；與獨立加入心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿比較：2)P<0.05

2.3茉莉花葉水提液對在體小鼠小腸推進(jìn)運動的影響與對照組(0.60±0.02)比較，茉莉花葉水提物40、20 g生藥/kg均能明顯抑制小鼠小腸推進(jìn)功能(0.46±0.01、0.49±0.01)(P<0.01)。

3討論

茉莉花是具有廣泛藥用價值的植物，其根、葉、花均有藥用價值?；捎糜谥委煾姑浉篂a、結(jié)膜炎、皮炎、瘡毒等；根有麻醉、止痛之功效，可以用于治療失眠、頭痛、齲齒、跌打損傷；葉用于治療外感發(fā)熱、腹脹腹瀉等癥〔7〕。本實驗觀察了茉莉花葉水提物對小腸平滑肌收縮活動的影響。結(jié)果顯示,茉莉花葉水提物終濃度(2.0～6.0)×10-2g生藥/ml均可以使家兔離體十二指腸平滑肌平均張力降低，且茉莉花葉水提物40 g生藥/kg、20 g生藥/kg能明顯抑制小鼠小腸推進(jìn)功能，此結(jié)果與茉莉具有收斂、止痛、止瀉的功效基本吻合。

小腸的機(jī)械活動和電活動受到神經(jīng)和體液因素調(diào)節(jié),也受中藥中某些化學(xué)物質(zhì)的調(diào)節(jié)。消化道平滑肌主要有α,β，M受體分布，α,β受體激動可使小腸平滑肌舒張,M受體可使小腸平滑肌興奮收縮。本次實驗在使用α和β受體阻斷劑酚妥拉明和心得安干預(yù)后，沒有阻斷茉莉花葉水提物對小腸平滑肌的抑制效應(yīng)。在應(yīng)用M受體激動劑乙酰膽堿干預(yù)后，對平滑肌痙攣有一定的拮抗作用，表現(xiàn)為使乙酰膽堿所致的小腸強烈的收縮活動減弱。根據(jù)上述結(jié)果推測其抑制小腸平滑肌的作用可能與平滑肌細(xì)胞膜上的M受體有關(guān)，而與α,β受體無關(guān)。另外，茉莉花葉提取物減弱乙酰膽堿作用的同時，仍能使離體小腸保持著較好的收縮力并能恢復(fù)正常，這對維持小腸的正常活動極有意義。

4參考文獻(xiàn)

1黃桂麗.茉莉的化學(xué)成分與藥理作用的研究進(jìn)展〔J〕.中外醫(yī)療(藥物研究)，2010；4(33)：113-4.

2Phanukit K,Chuleratana B,Tanwarat K，etal.Chemical composition,toxicity and vasodilatation effect of the flowers extract of jasminum sambac (L.) Ait.“G.Duke of Tuscany” 〔J〕.Evid Based Compl Alternat Med,2012;2012:471312.

3Kalaiselvi M,Narmadha R,Ragavendran P,etal.Chemopreventive effect and HPTLC fingerprinting analysis of jasminum sambac (L.) ait.extract against DLA-induced lymphoma in experimental animals〔J〕.Appl Biochem Biotechnol,2013;169(4):1098-108.

4蔡柏玲，雷鈞濤，唐澤波，等.茉莉花根中化學(xué)成分的初步分析〔J〕.吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報，2007;28(1):31-3.

5周瓊花，嚴(yán)婷婷，吳艷鳳，等.茉莉花葉色素的體外抗氧化活性研究〔J〕.時珍國醫(yī)國藥，2013;24(10):2346-8.

6Ghogomutih R，Bodo B，Nyasse B，etal.Isolation and identification of (2)oliviland (+)cycloolivil from Stereospermum kunthianum 〔J〕.Planta Med，1985;51(5):464.

7溫昭君，何燕平，吳韋柳,等.茉莉花莖黃酮的體外抗氧化活性研究〔J〕.時珍國醫(yī)國藥，2012;23(8):1866-7.

〔2014-05-17修回〕

(編輯李相軍)