表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域7（EGFL7）在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)及臨床意義

鄭 杰宋來君于 方

(1 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院神經(jīng)外一科，河南 新鄉(xiāng) 453000；2 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 鄭州 450052；3 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000)

表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域7（EGFL7）在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)及臨床意義

鄭 杰1宋來君2于 方3

(1 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院神經(jīng)外一科，河南 新鄉(xiāng) 453000；2 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 鄭州 450052；3 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000)

目的探討表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)7(EGFL7)蛋白在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)及與侵襲性關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化（S-P）方法檢測32例侵襲性垂體腺瘤和10例正常腦組織中EGFL7蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果EGFL7蛋白在侵襲性垂體腺瘤組織和正常腦組織中的陽性表達(dá)率差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論EGFL7蛋白在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)率明顯高于正常腦組織，表明其可能直接參與了侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生及侵襲過程；在腫瘤的生長、侵襲過程中表現(xiàn)了較強(qiáng)的作用，針對腫瘤EGFL7蛋白的表達(dá)可以有效進(jìn)行阻斷，從而針對腫瘤的生長與侵襲能夠有效起到抑制作用，為腫瘤患者的臨床治療鋪開了新的道路。

表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)7基因；侵襲性垂體腫瘤；免疫組化

垂體腺瘤是常見的顱內(nèi)腫瘤，大多數(shù)垂體腺瘤是良性腫瘤，但是侵襲性垂體瘤在病理上雖屬于良性腫瘤，但具有向周圍正常結(jié)構(gòu)顱骨、硬腦膜、海綿竇、蝶竇、鞍上、鞍旁等侵襲性生長的特點(diǎn)，單純手術(shù)難以達(dá)到全切除，術(shù)后需要放療或(和)化療，而且總體治療效果不佳，腫瘤復(fù)發(fā)率高。研究與侵襲性垂體腺瘤的相關(guān)因素對判斷垂體腺瘤治療、復(fù)發(fā)及愈后十分重要。當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，最重要的特征就是血管內(nèi)皮細(xì)胞的持續(xù)增殖。諸多研究表明EGFL7，針對形成血管官腔（生理性以及病理性）具有十分重要的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：所有標(biāo)本均取自新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院神經(jīng)外一科2010年1月至2013年11月垂體腺瘤手術(shù)切除標(biāo)本，男17例，女15例，年齡14～74歲，全部滿足病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)。針對鞍膈或者鞍底硬腦膜實(shí)施病理學(xué)檢查，明確有無出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞浸潤的情況。垂體瘤是否侵襲性判定符合下列情況之一者可確定為侵襲性垂體腺瘤[1-3]。①在手術(shù)過程中對腫瘤組織進(jìn)行詳細(xì)觀察，是否出現(xiàn)了對患者硬腦膜造成侵犯、對視神經(jīng)造成侵犯以及對骨質(zhì)等系列結(jié)構(gòu)造成侵犯；②在進(jìn)行手術(shù)的過程中，選擇鞍底鞍隔硬腦膜，對其實(shí)施病理學(xué)檢查，是否出現(xiàn)瘤細(xì)胞侵犯的情況；③根據(jù)影像學(xué)檢查的最終結(jié)果，是否出現(xiàn)腫瘤將骨質(zhì)破壞，對海綿竇以及蝶竇等造成侵犯的情況。對術(shù)中切除的硬膜經(jīng)病理證實(shí)腫瘤細(xì)胞浸潤。所選32例標(biāo)本均為侵襲性垂體腺瘤（符合上述標(biāo)準(zhǔn)之一）。

1.2 方法：免疫組化染色方法嚴(yán)格按試劑盒操作步驟進(jìn)行。免疫組化檢測EGFL7垂體腺瘤蛋白的表達(dá)，一抗為鼠抗人EGFL7單克隆抗體，購自美國Novus公司。DAB檢測試劑盒均購自華美生物工程公司。將PBS替代一抗作為本次的對照研究，選擇當(dāng)前的陽性組織切片作為研究的陽性對照。對于EGFL7，其主要在胞質(zhì)位置進(jìn)行陽性表達(dá)，主要根據(jù)shimizu方法作為染色判斷標(biāo)準(zhǔn)。主要有以下幾步：①對染色強(qiáng)度進(jìn)行評分：細(xì)胞質(zhì)沒有出現(xiàn)顯色的情況，即為0分；細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)了云霧狀淡黃色的情況，記為1分；細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)了黃色顆粒狀，記為2分。細(xì)胞質(zhì)表現(xiàn)為深黃色（均勻），記為3分。②對陽性細(xì)胞所占比例進(jìn)行評分的標(biāo)準(zhǔn)：陽性細(xì)胞數(shù)不大于10%的患者，為0分；陽性細(xì)胞數(shù)在10%～40%的患者，記為1分，陽性細(xì)胞數(shù)在40%～70%，記為2分；陽性細(xì)胞數(shù)不小于70%的患者，記為3分。③染色強(qiáng)度對陽性細(xì)胞所占比例評總積分?？偡e分為0～1分則判定為陰性，在2分以上判定為陽性。在2分以下為（-），2～3分為（+），4～5分為（++），＞6分以上為（+++）。在本次的實(shí)驗(yàn)過程中，將總積分在4分以上的定為出現(xiàn)了表達(dá)陽性的情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

EGFL7蛋白在正常腦組織和垂體瘤組織中的表達(dá)：EGFL7蛋白在垂體瘤組織主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)中，呈黃色或棕黃色顆粒，呈陽性表達(dá)；在正常腦組織中陰性表達(dá)。32例垂體瘤組織中陽性表達(dá)率為87.5%(28/32)，EGFL7蛋白在垂體瘤組織中的陽性表達(dá)率高于正常腦組織極其明顯，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)（表1）。

3 討 論

垂體腺瘤在顱內(nèi)腫瘤中僅低于腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤和腦膜瘤，居第3位，但部分侵襲性生長的垂體腺瘤一般表現(xiàn)為破壞腫瘤周圍骨質(zhì)，侵及腫瘤周圍顱底硬腦膜、神經(jīng)及血管等。上述表現(xiàn)是導(dǎo)致治愈率下降及腫瘤復(fù)發(fā)的主要原因之一。1940年Jeffersons首先提出侵襲性垂體腺瘤這一概念[4]。該腫瘤雖沒有轉(zhuǎn)移，但其表現(xiàn)某些惡性腫瘤的生物學(xué)行為，一般對患者的頸內(nèi)動脈以及患者的腦神經(jīng)造成了刺激，并且臨床癥狀發(fā)展極為迅速，一經(jīng)檢查到腫瘤，已經(jīng)出現(xiàn)了壞死以及卒中的情況，最終造成對患者的手術(shù)造成了非常大的危險(xiǎn)，并且患者手術(shù)存在較大的風(fēng)險(xiǎn)，而且手術(shù)的全切率非常低，具有較高的復(fù)發(fā)率，對患者的臨床療效造成了非常嚴(yán)重的影響，因此治療方法不能單純依賴手術(shù)治療，需要綜合治療。用判斷腫瘤良惡性的形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)很難區(qū)分侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤及評估顱內(nèi)垂體腺瘤是否復(fù)發(fā)。但是，目前大多學(xué)者都認(rèn)為垂體腺瘤稱為侵襲性垂體[5]?；颊吣[瘤的生長臨床癥狀主要表現(xiàn)在以下幾方面：出現(xiàn)了突破腫瘤包膜的情況，并且對患者鄰近的硬腦膜、患者的視神經(jīng)以及患者的骨折等部位造成了一定程度的侵害。侵襲性垂體瘤的診斷主要是依據(jù)影像學(xué)及術(shù)中所見[6]。垂體腺瘤基因水平的改變導(dǎo)致其具有侵襲性改變，其中就是血管細(xì)胞出現(xiàn)了增殖以及患者的血管生長調(diào)控等系列的基因；臨床主要選擇侵襲性對相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，而不是將表型改變作為有關(guān)的判定標(biāo)準(zhǔn)，仍然根據(jù)外表發(fā)生的異常作為相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。大多學(xué)者以為實(shí)體腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移與新生管形成密切有關(guān)，我們能有效地阻斷腫瘤的血供和抑制腫瘤新血管形成才能抑制腫瘤生長。因此本課題的研究目的是希望從垂體腺瘤血管生成方面尋找判定侵襲性的標(biāo)準(zhǔn)和抑制垂體腺瘤侵襲生長的途徑。

表1 EGFL7蛋白在正常腦組織和垂體瘤組織中的表達(dá)

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[3]于德蓉,易靜,陳玉英,等.垂體腺瘤 p53抑癌基因免疫組化和原位雜交的檢測及與PCNA共表達(dá)的研究[J].腫瘤,1999,19(4):202-205.

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[5]張作洪,朱炎昌.雷霆神經(jīng)生長因子在垂體腺瘤中的表達(dá)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2000,16(1):28-30.

[6]龔俊揚(yáng),史繼新.侵襲性垂體腺瘤及其研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊,2000,27(1):27-28.

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