Copeptin在動脈瘤性蛛網膜下腔出血患者血漿中的水平測定

黃 銳 李越漢

湖北襄陽市中醫(yī)院神經外科 襄陽 441000

目前腦血管病已成為危害人類健康的重要因素，隨著生活水平的提高及檢查技術的進步，發(fā)病率逐年提高，疾病嚴重程度及預后的早期風險評估對于疾病的治療非常重要。Copeptin是目前認為是自發(fā)性腦出血、缺血性腦卒中、炎癥反應的機體損傷嚴重性和預后評估的一個血液標記物，其在血液中較為穩(wěn)定，而且易于檢測，已成為血管加壓素釋放以及應激反應出現(xiàn)的標志物。本文對Copeptin與蛛網膜下腔出血后血液中的濃度進行檢測，探討其與蛛網膜下腔出血的嚴重性和預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究收集2009-01-2013-05我科收治的37例動脈瘤性SAH患者的靜脈血標本為實驗組，20例體檢健康的靜脈血標本為對照組，2組一般資料見表1。

表1 2組一般資料比較

1.2 評估方法 入院后通過CT進行SAH診斷與Fisher分級，分為2級、4級和3級組，若合并腦內血腫，計算并記錄血腫的體積，通過CTA或DSA確診為動脈瘤。應用GCS昏迷評分對患者意識進行評估，采用Hunt-Hess分級評估患者的級別，均在入院后24h內進行，根據(jù)患者情況行經顱多普勒和頭顱MRI檢查，判斷是否存在腦血管痙攣及腦梗死。應用GOS評分對患者的預后進行評估。

1.3 實驗方法 血標本在入院后的24h內采集，收集后4 000r／min離心10min，在-70℃的環(huán)境下儲存，所有標本均采用夾心ELSISA的方法進行檢測。加有捕獲抗體的反應板置入0.1M碳酸氫鈉液中，在4℃下過夜，然后每孔加入300μL的封閉緩沖液（Startingblock T20-TBS），室溫下輕微震蕩30min，向反應板中每孔標本中加入標準抗原，室溫下放置2h，用TBST液沖洗，加入檢測抗體，室溫下放置1.5 h。沖洗后，加入biotinyl tyramide液，室溫下放置15min，沖洗后，加入含有辣根過氧化物酶標記物的PBS-吐溫20液和1%的牛血清白蛋白，沖洗后，加入Ultra-TMB ELISA，放置30min，在652nm的96孔分光光度計中讀出數(shù)值。

1.4 數(shù)據(jù)分析 所有數(shù)據(jù)分析均使用SAS 9.2，計量資料進行數(shù)據(jù)的分布描述，計量資料的比較Mann-Whitney檢驗，2組或者3組之間的比較采用Kruskal-Wallis檢驗。

2 結果

實驗組Copeptin平均值為（16.28±3.65）pmol／L，對照組為（4.03±1.12）pmol／L。實驗組Hunt-Hess分級0～Ⅱ級21例，Ⅲ～Ⅴ級16例；腦實質血腫12例，平均血腫體積（17.34±3.61）mL；其中34例確診為動脈瘤；前循環(huán)28例，后循環(huán)6例；出現(xiàn)腦血管痙攣10例，腦梗死7例；GOS分級Ⅰ～Ⅲ級26例，Ⅳ～Ⅴ級11例，Hunt-Hess分級Ⅲ～Ⅴ級、Fisher分級3級、合并ICH、GOS分級Ⅰ～Ⅲ級患者的Copeptin平均水平明顯增高，血管痙攣、腦梗死、動脈瘤的位置、性別對Copeptin的濃度無明顯影響。見表2。

表2 實驗組不同項目Copeptin平均值比較 （±s）

表2 實驗組不同項目Copeptin平均值比較 （±s）

項目 分類 n 平均值（pmol／L） P值Hunt-Hess分級0～2／3～5 21／16 6.81±3.12／25.46±7.34 0.006 Fisher分級 2、4級／3級26／11 4.39±1.68／19.13±3.58 0.02腦內血腫 是／否 12／25 31.71±9.72／6.39±1.21 0.02血管痙攣 是／否 10／26 26.73±6.71／7.14±2.05 0.15腦缺血 是／否 7／30 24.19±5.21／16.51±7.02 1.0性別 女／男 12／25 21.31±6.31／7.16±1.22 0.52位置 前／后循環(huán) 28／9 17.42±3.26／5.09±2.04 0.38 GOS分級 4～5／1～3 26／11 7.19±2.98／26.09±6.82 0.03

3 討論

目前，對動脈瘤性蛛網膜下腔出血的腦損害嚴重性進行評估，臨床常用的是臨床分級標準，如GCS評分和Hunt-Hess分級，但這些分級易受到癲癇、腦積水、鎮(zhèn)靜藥物等因素的影響，對預后的判斷仍不很準確，Copeptin由39個氨基酸組成，分子量為5 000D是目前認為是自發(fā)性腦出血、缺血性腦卒中、炎癥反應的機體損傷嚴重性和預后評估的一個血液標記物，其與血管加壓素來自同一個前體蛋白，并以等比率釋放，與AVP的關系類似于C肽與胰島素之間的關系。血管加壓素是在不同的應激因子的刺激下由下丘腦釋放的一類激素，其可以激活促腎上腺皮質激素，后者直接導致ACTH的釋放，從而促進皮質醇的產生［1］。因為其在血液中較為穩(wěn)定，而且易于檢測，Copeptin成為血管加壓素釋放以及應激反應出現(xiàn)的標志物。有很多關于對出血性腦卒中早期對患者預后進行評估，一些以確認的影響因素，如出血量、血腫的形成、持續(xù)的高血壓，而生物標志物作為一種有潛在價值的預測因子，近年來開始受到人們的關注。當前的一些研究認為［2］，Copeptin能夠早期反映動脈瘤性蛛網膜下腔出血的嚴重性，其對1a后病死率及神經功能的不良結局的判斷價值同改良Fisher分級評分相似，目前的文獻報道［3］的出血性腦卒中的平均值為16.3pmol／L，缺血性腦卒中的平均水平為11.6pmol／L，正常人的Copeptin血液濃度為3.7～4.2pmol／L。許多研究認為，伴ICH的SAH患者的Copeptin濃度明顯增高。Zweifer［4］認為，Copeptin的增加與ICH的體積和不良預后有關，這與我們在SAH患者中的研究結果相似，Copeptin的水平增加與蛛網膜下腔出血的量明顯相關，但由于預后不佳的SAH患者一般都伴有ICH，因此我們的結果需要進一步的研究，以減少偏倚因素，一般來說，ICH的出現(xiàn)能夠影響SAH患者的預后，我們的結果顯示Copeptin的濃度與血管痙攣、動脈瘤的位置與遲發(fā)型缺血無明顯相關，但與影響神經功能不良結局的預后有一定關系。

遲發(fā)性的血管痙攣是不良預后的影響因素，往往導致嚴重的缺血性癥狀，以及神經功能的損害，但迄今為止，仍未發(fā)現(xiàn)可靠的標志物能夠在發(fā)病早期對遲發(fā)型腦血管事件進行預測，我們的結果表明Copeptin雖然未能在早期對腦血管痙攣進行預測，但一系列的實驗表明，其與預后存在一定的關聯(lián)，Zhu等［5］研究表明，Copeptin與血管痙攣之間存在重要的聯(lián)系，與我們的研究結果一致，雖然數(shù)據(jù)提示兩者之間有關，當仍不能成為腦血管痙攣預測的標記物，而且相比之下，臨床分級更加有準確性。Copeptin的釋放是蛛網膜下腔出血的特異性表現(xiàn)還是一般的應激反應，目前仍不是很清楚，Copeptin有下丘腦產生伴隨血管加壓素一起釋放，在蛛網膜下腔出血的患者中，Copeptin的增加可能是在應激情況下由于下丘腦-垂體-腎上腺素-的反應軸的激活，不僅缺血性腦卒中能夠引起，而且呼吸道感染、心衰、休克等均可引起，但這并不能排除Copeptin是蛛網膜下腔出血預后評估的潛在標志物的可能性［6］。

Copeptin在發(fā)病早期血液濃度和蛛網膜下腔出血的嚴重性有關，而且在預后差的患者中表達更高，其很有可能成為一個對蛛網膜下腔出血有診斷價值的的標記物。

［1］Morgenthaler NQ，Struck J，Alonso C，et al.Assay for the measurement of copeptin，a stable peptide derived from the precursor of vasopressin［J］.Clin Chem，2006，52（1）：112-119.

［2］Molyneux A，Kerr R，Stratton I，et al.International Subarachnoid Aneurysm Trial（ISAT）of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143patients with ruptured intracranial aneurysms：a randomised trial［J］.Lancet 2002，360（9342）：1 267-1 274.

［3］Katan M，F(xiàn)luri F，Morgenthaler NG，et al.Copeptin：a novel，independent prognostic marker in patients with ischemic stroke［J］.Ann Neurol，2009，66（6）：799-808.

［4］Zweifel C，Katan M，Schuetz P，et al.Copeptin is associated with mortality and outcome in patients with acute intracerebral hemorrhage［J］.BMC Neurol，2010，10：34.

［5］Zhu XD，Chen JS，Zhou F，et al.Detection of copeptin in peripheral blood of patients with aneurysmal subarachnoid hemorrhage［J］.Crit Care，2011，15（6）：288.

［6］Muller B，Morgenthaler N，Stolz D，et al.Circulating levels of copeptin，a novel biomarker，in lower respiratory tract infections［J］.Eur J Clin Invest，2007，37（2）：145-152.