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    建瓴湯聯(lián)合卡托普利對大鼠高血壓及腎臟的影響

    2015-11-27 03:38:50田惠中徐佳男簡心璐顧文政龔細妹何迎春
    湖南中醫(yī)藥大學學報 2015年3期
    關(guān)鍵詞:聯(lián)組卡托普利噻嗪

    田惠中,徐佳男,簡心璐,張 薇,顧文政,龔細妹,何迎春*

    (湖南中醫(yī)藥大學,湖南 長沙410208)

    高血壓是指以血壓升高為主要臨床表現(xiàn)伴有或不伴有多種心血管危險因素的綜合征[1],血管緊張素I 轉(zhuǎn)化酶抑制藥(ACEI)、利尿藥是臨床上常用的聯(lián)合用于拮抗高血壓的藥物類別,其中常用藥物分別有卡托普利、氫氯噻嗪等,但臨床研究表明長期運用卡托普利及利尿藥可能導致尿蛋白升高等腎損害作用[2]。 建瓴湯出自《醫(yī)學衷中參西錄》,今有諸多醫(yī)家將其運用于臨床治療高血壓病,且療效可觀[3-4]。 本實驗通過觀察建瓴湯對高鹽飼料復制的高血壓大鼠的血壓、 尿微量白蛋白(microalbuminuria,mALB)、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(N-acetylbeta-D-glycosidase enzyme,NAG enzyme)、 光鏡下腎病理改變的影響,探討建瓴湯的降血壓及護腎作用。 現(xiàn)將實驗方法與結(jié)果報道如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 動物 SPF 級雄性SD 大鼠60 只, 體質(zhì)量(235±15)g, 購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司,實驗動物許可證號:SCXK(湘)2011-0003。

    1.1.2 試藥 (1)中藥:建瓴湯(懷山藥30 g,懷牛膝30 g,代赭石24 g,龍骨18 g,牡蠣18 g,生地黃18 g,白芍12 g,柏子仁12 g)由湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院中藥房煎制并真空包裝, 每袋200 mL(含生藥0.81 g/mL)。 (2)西藥:卡托普利片由華中藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn) (規(guī)格25 mg/片, 批號:20130302), 氫氯噻嗪片由山西云鵬制藥有限公司生產(chǎn)(規(guī)格25 mg/片,批號:A130104)。

    1.1.3 飼料 普通飼料和8%高鹽飼料由湖南省中醫(yī)藥大學動物實驗中心負責加工制成。

    1.1.4 主要儀器 Softron BP-2010A 大鼠無創(chuàng)血壓測量儀(北京軟隆科技有限責任公司);大鼠尿NAG酶檢測試劑盒(批號:201310)及大鼠尿mALB 檢測試劑盒(批號:201310)購于武漢貝茵萊生物科技有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 造模 60 只大鼠適應性喂養(yǎng)4 d 后,按隨機數(shù)字表法從60 只大鼠中隨機抽選10 只標記為正常對照組,飼喂正常飼料及飲水。 另外50 只大鼠為造模組,用于復制高血壓大鼠模型[5],飼喂高鹽飼料(含8.0%氯化鈉)和飲用0.85%氯化鈉液,復制期10 周,期間每周測定1 次大鼠尾動脈壓,當大鼠血壓比處理前高20 mmHg(大于正常血壓3個標準差值) 以上且高于115 mmHg 者確定為高血壓模型[6]。

    1.2.2 分組 造模過程中死亡13 只大鼠(其中正常組3 只、造模組10 只),模型復制成功后,將喂養(yǎng)高鹽飼料的40 只大鼠再按隨機數(shù)字表法隨機分為5 組,即模型組8 只、中藥(予建瓴湯)組8只、西藥(予卡托普利)組8 只、西聯(lián)(予卡托普利加氫氯噻嗪) 組6 只、 中西 (予建瓴湯加卡托普利)組10 只。

    1.3 給藥

    中藥組按照人與動物體表面積折算的等效劑量比值,灌胃含生藥16.8 g/(kg·d)建瓴湯;西藥組灌胃卡托普利15.6 mg/(kg·d); 西聯(lián)組灌胃卡托普利15.6 mg/(kg·d)和氫氯噻嗪7.8 mg/(kg·d);中西組灌胃卡托普利15.6 mg/(kg·d) 和建瓴湯16.8 g/(kg·d); 正常對照組及模型對照組均灌胃生理鹽水52.0 mL/(kg·d),持續(xù)12 周,6 組大鼠均飼喂正常飼料及飲水。

    1.4 觀察指標及檢測方法

    1.4.1 標本采集及制作 (1)24 h 尿液采集:末次給藥后即收集各組大鼠24 h 尿液, 尿液指標使用試劑盒檢測。(2)腎組織切片制作:末次給藥后24 h處死大鼠,立即剝離雙腎,用生理鹽水沖洗,濾紙擦干。 每只大鼠的左右兩腎縱切分成兩個部分,各取其中一半用10%甲醛固定。 將甲醛固定的標本經(jīng)梯度乙醇脫水,二甲苯透明、浸蠟、包埋、石蠟切片后蘇木精-伊紅(HE)染色。

    1.4.2 檢測指標 (1)血壓:造模及用藥期間每周測量大鼠尾動脈壓1 次,于造模后、用藥1月、用藥3月后,分別測定各組大鼠血壓值;(2)尿mALB;(3)尿NAG 酶濃度;(4)光鏡下觀察腎組織切片,每張切片隨機選取5個不重疊的視野(×400)采集圖片。

    1.5 統(tǒng)計學分析

    2 結(jié)果

    2.1 各組大鼠血壓不同時段比較

    造模前,各組大鼠血壓差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 造模完成后,各造模組大鼠血壓都高于正常組(P<0.05 或P<0.01),說明造模成功;給藥1個月后,與正常組比較,西藥組、中西組、西聯(lián)組血壓無統(tǒng)計學意義(P>0.05),中藥組、模型組血壓均顯著高于正常組(P<0.01);與模型組比較,西藥組、中西組、西聯(lián)組血壓均顯著下降(P<0.01),而中藥組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),說明中西組、西藥組及西聯(lián)組降壓效應相似,且西藥降壓效果較中藥快。 治療3個月后,與正常組比較,各用藥組大鼠血壓均恢復至正常水平,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而模型組血壓仍顯著高于正常組(P<0.01),說明各藥物均可有效治療高血壓。 結(jié)果見表1。

    表1 各組大鼠不同時間段血壓比較(±s,mmHg)

    表1 各組大鼠不同時間段血壓比較(±s,mmHg)

    注1: 藥物劑量:a=卡托普利15.6 mg/(kg·d);b=建瓴湯16.8 g/(kg·d);c=a+b;d=a+氫氯噻嗪7.8 mg/(kg·d)。 下表同。注2:與正常組比較*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較##P<0.01;與西藥組比較☆☆P<0.01。 下表同。

    組 別正常組模型組西藥組中藥組中西組西聯(lián)組n 7 8 8 8 1 0 6藥物劑量——abcd造模前119±3 120±7 116±6 117±5 118±5 119±5造模后119±5 139±3**127±6*143±6**135±7**140±5**治療1月120±4 137±6**118±6##136±1**126±8##126±5##治療3月117±3 141±6**112±6##116±5##118±6##118±3##

    2.2 治療期3月后各組大鼠24 h 尿NAG 酶和mALB 濃度比較

    治療期3月后, 各組大鼠NAG 酶和mALB 均顯著高于正常組(P<0.01);西藥組NAG 酶和mALB均顯著高于模型組(P<0.01);與西藥組比較,中藥組、中西組NAG 酶和mALB 均顯著降低(P<0.01);西聯(lián)組與西藥組之間NAG 酶和mALB 均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 說明模型組和各藥物治療組都有不同程度的腎功能損害,而中藥可顯著減輕西藥對腎功能的損害。 結(jié)果見表2。

    表2 治療3個月后各組大鼠24 h 尿NAG 酶和mALB 比較

    2.3 各組大鼠腎組織病理學變化

    正常組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)無明顯病理改變;模型組大鼠腎組織可見入球小動脈管壁增厚、 管腔狹窄、細動脈玻璃樣變性、腎小球硬化及萎縮等病理改變,說明高血壓本身對腎臟有損害;西藥組與西聯(lián)組大鼠, 除表現(xiàn)模型組大鼠腎臟病理改變外,另有細胞廣泛性空泡變性、 腎小管上皮細胞脫落、腎小球肥大或萎縮、基底膜增厚,西藥組可見炎性細胞浸潤及細動脈充血,總體來看,西聯(lián)組大鼠腎臟損害程度輕于西藥組,說明卡托普利對腎臟具有損害作用,而氫氯噻嗪與卡托普利聯(lián)用能緩解其腎臟損害作用; 中藥組大鼠腎臟細胞偶見空泡變性,其余病理改變程度較模型組輕,說明建瓴湯對腎臟有保護作用;中西組大鼠腎臟總體病理改變程度較模型組、西藥組、西聯(lián)組少,說明建瓴湯與卡托普利聯(lián)用時能減輕卡托普利的腎損害作用,并且其效果優(yōu)于氫氯噻嗪與卡托普利聯(lián)用。結(jié)果見封三彩圖圖1。

    3 討論

    高血壓是引起腎功能損傷等疾病的重要危險因素,由于其復雜性,大多數(shù)患者需要聯(lián)合治療和終生用藥,ACEI(如卡托普利)為高血壓治療的一線藥物[7],單用本品能使大多數(shù)高血壓患者血壓控制在理想水平[1],聯(lián)用利尿劑氫氯噻嗪能增強降血壓作用,但臨床研究表明長期運用卡托普利及利尿藥可能導致尿蛋白升高等腎損害現(xiàn)象[2],而多項臨床研究表明建瓴湯具有良好的降壓效果[3-4],故本實驗通過探究建瓴湯聯(lián)合卡托普利對高血壓大鼠的降壓效應及減輕腎的損害,為中西醫(yī)結(jié)合治療高血壓提供一個安全有效的實驗數(shù)據(jù)。

    腎臟既是血壓調(diào)節(jié)的重要器官,又是高血壓損害的主要靶器官之一。 高血壓的腎損害機制為動脈內(nèi)高壓造成的血管病變,以局灶階段性腎小球硬化和缺血性腎小球萎縮為常見的病理改變,同時伴腎小管的萎縮和腎間質(zhì)纖維化等改變[8]。 腎小球濾過膜具有濾過血液功能,尿mALB 的排泄增加提示腎小球濾過膜損害,是腎損害的早期表現(xiàn)[9],NAG 酶是一種位于溶酶體內(nèi)的酸性水解酶,當腎近曲小管上皮細胞受損時,尿NAG 酶活性顯著升高,且早于其他尿酶。 因此尿NAG 酶是反映腎小管敏感且特異的指標[10]。 兩者聯(lián)合測定可作為療效判斷的依據(jù)。

    高血壓屬于中醫(yī)學中 “眩暈”、“頭痛”、“肝風”等病癥范疇,血脈瘀阻、肝風內(nèi)動是本病的基本病機[11],應用中醫(yī)學辨證治療高血壓病能夠起到顯著的降壓效果[12]。 建瓴湯原方出自清末民初名醫(yī)張錫純所著《醫(yī)學衷中參西錄》,用于治療肝陽上亢或肝火上炎之頭痛、震顫等癥狀。 懷牛膝能活血通經(jīng)、引血下行、 兼補肝腎, 代赭石平肝潛陽、重鎮(zhèn)降逆,二藥合用,平肝同時兼顧補益肝腎,共為君藥;龍骨、牡蠣助君藥潛陽降逆,還兼有安神功效,共為臣藥;加用生地黃、懷山藥滋陰降火,白芍平肝木之火,三者共為佐藥;柏子仁甘平可養(yǎng)心安神而為佐使藥。 以上八味藥,配伍使用,共奏平肝潛陽、補益肝腎、養(yǎng)心安神之功,從而調(diào)和陰陽、和暢氣血,可以達到降壓同時顧護肝腎的療效。 何婷等[3]及佟文浩[4]發(fā)現(xiàn)建瓴湯對于陰虛陽亢型原發(fā)性高血壓有良好的降壓及改善臨床癥狀的作用。

    本研究結(jié)果表明: 單用建瓴湯達3月時對高血壓大鼠具有顯著降壓效應; 建瓴湯與卡托普利聯(lián)用無協(xié)同降壓作用, 但能拮抗卡托普利對高血壓大鼠的腎臟損害作用, 其具體作用機制有待進一步研究。

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