甘蔗花與葉抗氧化活性研究

楊新周

(德宏師范高等?？茖W(xué)校理工系，云南德宏678400)

甘蔗是一種廣泛種植于我國福建、廣東、海南、廣西、四川、云南等地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物，是全世界熱帶糖料生產(chǎn)國的主要經(jīng)濟(jì)作物［1］。甘蔗除了制糖、造紙、作飼料、釀酒之外，還可以作為藥材。經(jīng)過前人研究，甘蔗中含有大量的多酚及黃酮類物質(zhì)［2，3］。甘蔗的應(yīng)用部位主要為莖，而甘蔗花和甘蔗葉應(yīng)用較少。有時(shí)，甘蔗葉和甘蔗花就直接在地里焚燒為灰肥，或是作為家畜的飼料。為了尋求甘蔗葉和甘蔗花的綜合利用價(jià)值，本文以甲醇和乙醇為溶劑，采用超聲提取法對甘蔗花及甘蔗葉進(jìn)行提取，考察其對DPPH自由基活性的清除能力，以期為甘蔗花和甘蔗葉的綜合利用提供理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器和試劑

722型可見分光光度計(jì)(上海菁華科技儀器有限公司)，超聲波發(fā)生器(AS20500A)，電子天平(AR224CN)，電熱真空干燥箱(ZK 82J型)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(EYELA N一1100)。

DPPH(1，1－二苯基－2－三硝基苯肼)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞99.0%，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn);甘蔗葉、花(云南省德宏傣族景頗族自治州盈江縣，烘干，粉碎，過篩);槲皮素、山奈酚、咖啡酸、蘆丁，購自國藥集團(tuán)浙江華東醫(yī)藥有限公司，質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞98%;甲醇、乙醇等試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法

1.2.1 DPPH儲備液的制備

準(zhǔn)確稱取10 mg DPPH，用無水乙醇溶解定容至100 mL容量瓶中，得到質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL的儲備溶液。然后稀釋成質(zhì)量濃度為0.024 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2 甘蔗葉和花提取物的制備

準(zhǔn)確稱取2.000 0 g樣品于100 mL的錐形瓶中，加入20 mL的乙醇溶液，封口，超聲提取3次，每次45 min。合并3次濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮，轉(zhuǎn)移到25 mL的容量瓶中，乙醇定容，備用。利用此法制備甲醇提取物溶液。

1.2.3 清除DPPH自由基能力的測定

準(zhǔn)確移取4.5 mL DPPH標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次加入一定體積的提取物稀釋液于10 mL比色管中，定容至5 mL，置于暗處30 min。在波長517 nm下，測定空白DPPH的吸光度度值，記為A空白，加入提取物后DPPH的吸光度值為A樣品，按下式計(jì)算自由基清除率［6］。

配置一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品試液，以同樣的方法，測定標(biāo)準(zhǔn)品清除DPPH自由基的活性。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品清除DPPH自由基的活性

按照1.2.3的方法測定標(biāo)準(zhǔn)品清除DPPH自由基活性的能力，結(jié)果見圖1、圖2及表1。

圖1 蘆丁、沒食子酸、咖啡酸對DPPH自由基的清除率Fig.1 Rutin，gallic acid，caffeic acid on DPPH radical scavenging rate

圖2 香草酸、對香豆酸對DPPH自由基的清除率Fig.2 Vanilla acid，p－coumaric acid on DPPH radical scavenging rate

表1 幾種不同標(biāo)準(zhǔn)品清除DPPH自由基活性比較

從圖1、圖2中看出，幾種標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率成一定的線性關(guān)系。幾種標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率線性方程如表1。從表1及圖1、圖2中還得出，幾種標(biāo)準(zhǔn)品抗氧化能力順序?yàn)?沒食子酸＞咖啡酸＞蘆?。鞠悴菟幔緦ο愣顾?。

2.2 甘蔗花與甘蔗葉乙醇提取物清除DPPH自由基的能力

按照1.2.3的方法測定甘蔗葉與甘蔗花乙醇提取物清除DPPH自由基活性的能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3。

圖3 甘蔗花與甘蔗葉乙醇提取物對DPPH自由基的清除率Fig.3 The ethanol extract of flowers and leaves of cane sugar on DPPH radical scavenging rate

甘蔗花和甘蔗葉的乙醇提取物的質(zhì)量濃度與DPPH清除率線性方程分別為:Y=62.696X+12.751，R2=0.992 3，IC50=0.594 1;Y=24.717X+19.394，R2=0.990 1，IC50=1.238 2。從圖3 中看出，甘蔗花與甘蔗葉乙醇提取物在同等濃度下，甘蔗花提取物比甘蔗葉提取物清除率要強(qiáng)。結(jié)合兩者清除DPPH自由基IC50，甘蔗花乙醇提取物清除DPPH自由基的能力大于甘蔗葉乙醇提取物的清除能力。

2.3 甘蔗花與甘蔗葉甲醇提取物清除DPPH自由基的能力

按照1.2.3的方法測定甘蔗葉與甘蔗花甲醇提取物清除DPPH自由基活性的能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4。

甘蔗花和甘蔗葉的甲醇提取物的質(zhì)量濃度與DPPH清除率線性方程分別為:Y=114.4X+19.347，R2=0.992 8，IC50=0.267 9;Y=59.583X+21.074 ，R2=0.990 5，IC50=0.578 5。從圖4中看出，同等濃度的甘蔗花與甘蔗葉甲醇提取物清除DPPH自由基的能力存在明顯差異。根據(jù)甘蔗花和葉甲醇提取物的IC50及圖4可知，甘蔗花甲醇提取物清除DPPH自由基的能力大于甘蔗葉甲醇提取物的清除能力。

圖4 甘蔗花與甘蔗葉甲醇提取物對DPPH自由基的清除率Fig.4 The methanol extract of flowers and leaves of cane sugar on DPPH radical scavenging rate

3 結(jié)論

通過實(shí)驗(yàn)得出，甘蔗花與甘蔗葉的甲醇、乙醇提取物及標(biāo)準(zhǔn)品清除DPPH自由基的活性活性順序?yàn)?沒食子酸＞咖啡酸＞蘆?。靖收峄状继崛∥铮鞠悴菟幔靖收崛~甲醇提取物＞甘蔗花乙醇提取物＞甘蔗葉乙醇提取物＞對香豆酸。甘蔗花的甲醇提取物抗氧化能力強(qiáng)于香草酸及對香豆酸，可能是甘蔗花中存在黃酮類及多酚類物質(zhì)所致。因此，甘蔗花的甲醇提取物是一種值得開發(fā)的天然抗氧化劑。

［1］吳建中，歐仕益，汪勇.甘蔗葉中黃酮類物質(zhì)的提取及其抗氧化性研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2009，25(2):165－167.

［2］豐永紅，于淑娟，李國基.DPPH法測甘蔗提取物抗氧化活性研究［J］.甘蔗糖業(yè)，2003(1):31－33.

［3］區(qū)惠敏，郭娟，龔玉石，等.甘蔗渣多酚的純化及抗氧化活性研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2013，29(7):1596－1600.