遷延性黃疸與UGT1A1基因突變的研究分析

占彩霞，李貴南（通信作者），周　勇，胡月圓，李　軍

（湖南省兒童醫(yī)院 新生兒科，湖南長沙410006）

遷延性黃疸與UGT1A1基因突變的研究分析

占彩霞，李貴南（通信作者），周勇，胡月圓，李軍

（湖南省兒童醫(yī)院 新生兒科，湖南長沙410006）

目的：了解遷延性黃疸與膽紅素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT1A1）基因的關(guān)系。方法：以2015年4月～8月入院黃疸原因不明且遷延不退患兒納入研究對象，收集臨床資料，采用PCR擴(kuò)增檢測UGT1A1基因。結(jié)果：共有8例患兒接受UTG1A1基因檢測，有6例存在基因突變，分別為Gly71Arg突變2例，Pro364Leu突變3例，1例同時(shí)存在TATA啟動(dòng)盒的TA插入與Pro229Gln突變，陽性率為75%。結(jié)論：遷延性黃疸患兒UGT1A1基因突變率高，建議盡可能完善UGT1A1基因檢測。

遷延性黃疸；新生兒；UGT1A1

黃疸是新生兒最常見的臨床癥狀，高膽紅素血癥是新生兒住院的主要疾病，其病因十分復(fù)雜。經(jīng)臨床常規(guī)檢查后，仍有50%左右的患兒無法明確病因，大部分患兒經(jīng)藍(lán)光治療、白蛋白等治療黃疸逐漸消退，但仍有少部分患者經(jīng)多次藍(lán)光治療黃疸遷延不退。已有研究證實(shí)，膽紅素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UTG1A1）基因突變與新生兒高膽紅素血癥密切相關(guān)［1］，而該基因的突變位點(diǎn)有明顯的地區(qū)和人種差異［2-3］。為了解遷延性黃疸與UGT1A1基因突變的關(guān)系，對2015年4月～2015年8月黃疸遷延不退患兒的血標(biāo)本，進(jìn)行UGT1A1基因測序，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：以2015年4月～8月新生兒黃疸收治入院，排除敗血癥及其他全身感染、新生兒溶血病、G6PD酶缺乏癥、甲狀腺功能低下、頭皮血腫、肝膽疾病及先天性遺傳代謝疾病等診斷，黃疸原因不明且遷延不退患兒納入研究對象，共有22例患兒符合條件，其中8例患兒接受UTG1A1基因檢測，其他14例患兒因各種原因未完成該項(xiàng)檢查被排除。

1.2方法

1.2.1資料收集：收集患兒的一般情況、臨床表現(xiàn)、治療情況、BAEP及頭部MRI、隨訪情況，具體見表1。

1.2.2實(shí)驗(yàn)方法：采取患兒外周靜脈血，提取DNA后，用ABI 9700 PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增，再用ABI 3500xL基因分析儀測序，結(jié)果用Mutation Surveyor軟件進(jìn)行測序結(jié)果比對分析后出具基因分析報(bào)告（由武漢康圣達(dá)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心完成）。

1.2.3治療及隨訪：根據(jù)患兒臨床癥狀及實(shí)際病情，予以藍(lán)光光療、白蛋白結(jié)合游離膽紅素，苯巴比妥酶誘導(dǎo)治療，出院后定期隨訪黃疸消退情況。

2　結(jié)果

2.1一般情況：共有8例患兒納入研究，女5例，男3例，均系單胎，出生胎齡37～40周，出生體質(zhì)量2900～3950g，5例經(jīng)陰道分娩，3例剖宮產(chǎn)。

2.2基因結(jié)果：8名患兒均在日齡14d后行UTG1A1基因檢測，結(jié)果顯示有6例存在基因突變，分別為Gly71Arg（211G→ A）純合突變2例，Pro364Leu（1091C→T）突變3例，其中2例純合突變，1例雜合突變，1例同時(shí)存在TATA啟動(dòng)盒的TA插入與Pro229Gln（686C→A），陽性率為75%，2例基因結(jié)果正常。

2.3治療及隨訪情況：8例患兒膽紅素均達(dá)到高膽紅素血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，重度高膽紅素血癥3例，其中1例換血治療且頭部MRI提示蒼白球異常信號(hào)，8例BAEP均無異常。8例患兒均苯巴比妥酶誘導(dǎo)治療，黃疸逐漸消退，隨訪2～4個(gè)月，黃疸均消退且無反復(fù)。

3　討論

正常情況下，未結(jié)合的膽紅素進(jìn)入新生兒肝細(xì)胞后會(huì)受到UGT1A1作用，與葡萄糖醛酸相結(jié)合成為水溶性膽紅素葡萄糖醛酸，但當(dāng)UGT1A1基因發(fā)生突變后，尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT）的結(jié)構(gòu)變化導(dǎo)致活性降低甚至功能缺失，致使膽紅素結(jié)合不夠，含量異常增多，從而導(dǎo)致膽紅素代謝障礙而發(fā)生先天性非溶血性高膽紅素血癥，包括Crigler-Najjar綜合征Ⅰ型和Ⅱ型（CN-Ⅰ，CN-Ⅱ）、Gilbert綜合征（GS）。研究表明，亞洲人多為編碼區(qū)突變，其中最常見為Gly71Arg突變，而白種人多發(fā)生TA插入型突變。

中日韓亞洲黃種人以編碼區(qū)核苷酸的211位G→A點(diǎn)突變最為多見，由于該位點(diǎn)的突變，導(dǎo)致相應(yīng)編碼的Gly變成了Arg，使UGT1A1活性下降，與新生兒高膽紅素血癥密切相關(guān)［4］。本研究顯示，有2例Gly71Arg純合突變，突變率為25%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。本研究8例患兒中即存在1例TA插入型突變，但昆明地區(qū)高膽紅素血癥患兒與TA插入變異無關(guān)［5］，提示人類基因變異可能與地區(qū)、環(huán)境及人種密切相關(guān)，具體機(jī)制有待深入研究.3例患兒存在Pro364Leu突變，達(dá)37.5%，其中2例雜合突變，1例純合突變，該突變位點(diǎn)國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道均較少，提示Pro364Leu突變可能為與新生兒高膽紅素血癥相關(guān)的熱突變位點(diǎn)，有待進(jìn)一步大樣本研究且與正常新生兒對照研究證實(shí)。

2例患兒UTG1A1基因無異常予以苯巴比妥治療后黃疸消退，不排除其他基因如UGT1A3存在突變可能，因經(jīng)濟(jì)因素等暫未開展其他基因型檢測。

目前本研究進(jìn)行時(shí)間較短，雖然隨訪患兒黃疸均消退，未存在黃疸反復(fù)，建議需密切觀察黃疸情況，定期隨訪。

表1　遷延性黃疸患兒臨床資料

［1］Zibi Y，Kaichang Zh，Li W，et al.Association of Neonatal Hyperbilirubinemia with UGT1A1 Gene Polymorphisms：A Meta-Analysis［J］. Med Sci Monit，2015，21：3104-3114.

［2］Rabaoglu MO，Yigit S，Aynacioglu AS，et al.Neonatal jaundice and bilirubin UDP-glucuronosyltransferase 1A1 gene polymorphism in Turkish patient［J］.Basoc Clin Pharmucol Toxicol，2006，98（4）：377-380.

［3］Farheen S，Sengupta S，Santra A，et al.Gilbert's syndrome：High frequency of the（TA）7TAA allele in india and its ineraction with a novel CAT insertion in promoter of the gene for bilirubin UDP-glucuronosyltransferase 1 gene［J］.World J Gastroenterol，2006，12（14）：2269-2275.

［4］鐘丹妮，劉悠南.廣西新生兒膽紅素·尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶基因Gly7l Arg突變的研究［J］.中華兒科雜志，2002，40（10）：579-581.

［5］劉玲，芮丹云，蔣榆輝，等.UGT1A1基因多態(tài)性與昆明地區(qū)重癥新生兒黃疸的遺傳關(guān)聯(lián)性研究［J］.昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，33（12）：52-54.

R722.17

A

1002-2376（2015）12-0026-02

湖南省衛(wèi)計(jì)委：C2014-26

2015-11-08