胡艷
紫外可見分光光度法測量菊苣藥材中菊苣多糖含量分析
胡艷
目的 探討紫外可見分光光度法測量菊苣藥材中菊苣多糖含量。方法 采用紫外可見分光光度法測量定菊苣總糖、菊苣還原糖含量,而后分析、計(jì)算菊苣多糖含量。結(jié)果 經(jīng)過測定,發(fā)現(xiàn)菊苣總糖、菊苣還原糖含量范圍分別為:0.006-0.016mg/mL、0.06-0.11mg/mL,均能夠城鄉(xiāng)良好的線性關(guān)系。結(jié)論 紫外可見分光光度法能夠比較準(zhǔn)確、簡便的測量菊苣多糖含量,從而進(jìn)一步完善菊苣藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
紫外可見分光光度法;菊苣藥材;菊苣多糖含量
菊苣藥材屬菊科植物,主要藥用價(jià)值為:清肝利膽、健胃消脾、降血糖、抗過敏等功效,具有很好的生物活性和藥用價(jià)值[1,2]。很多學(xué)者對(duì)其進(jìn)行藥物鑒定研究,分析菊苣中的化學(xué)成分,但是對(duì)于菊苣中的多糖成分含量測定方法的報(bào)道比較少,其成分含量與藥物療效和穩(wěn)定性有密切的關(guān)系,本次研究主要分析利用紫外可見分光光度法測定多其糖含量,從而為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供可靠的依據(jù)。
1.1 儀器選擇 分光光度計(jì)采用BECKMAN DU800紫外可見分光光度計(jì),超聲波清洗機(jī)選擇北京天海雙龍公司生產(chǎn)的CX-250型號(hào)器械;天平采用德國梅特勒公司生產(chǎn)的AE160型分析天平。果糖選擇由中國藥品生物制品所提供的批號(hào)為100231-200303;苯酚、硫酸分別采用批號(hào)為:20081120、20081002;菊苣藥材選用北京化學(xué)試劑公司提供。
1.2 菊苣多糖含量測定方法 菊苣中菊苣多糖的含量=菊苣總糖含量-菊苣還原糖含量,所以這里我們首先測量菊苣總糖的含量,然后測量菊苣還原糖的含量,隨后計(jì)算出菊苣總糖含量。
1.2.1 總糖含量測定 首先取果糖對(duì)照品0.1g,加水溶解,然后將其放在100mL量瓶中,搖勻;而后稱取菊苣藥材粗粉1g,利用脫脂棉過濾,將濾汁和濾液分離,濾渣進(jìn)行重復(fù)提取1此,合并濾液后進(jìn)行濃縮,將溶液移入500ml量瓶中,加水搖勻,再將溶液減壓干燥成粉末狀。分別選取江蘇東臺(tái)、山東壽光、山東淄博3個(gè)產(chǎn)地的菊苣藥材,樣品n=3,采樣量=1kg,供試品溶液=9,顯色分析后利用回歸方程計(jì)算藥材總糖含量。
1.2.2 菊苣糖含量測定 首先測定樣品吸收峰的波長為510mm,再利用顯色液用量測量法,將此容易加熱5min,冷卻室溫后在510nm處測定吸光度值。然后進(jìn)行線性關(guān)系考核,將不同含量的果糖分別置于試管中進(jìn)行加熱測量,以果糖的用量為橫坐標(biāo)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,其回歸方程為為Y=1.152X-58.9(r=0.992)。進(jìn)行不同溶液密度和穩(wěn)定性分析,進(jìn)行還原糖含量的測定,利用不同的溶液的供試品進(jìn)行顯色后,于510nm處測定吸光度值,利用回歸方程計(jì)算還原糖含量。
1.2.3 菊苣多糖含量測定 菊苣多糖含量的測定建立在菊苣總糖和菊苣還原糖含量基礎(chǔ)之上,根據(jù)(糖的含量=菊苣總糖含量-菊苣還原糖含量)公式計(jì)算菊苣多糖含量。
2.1 菊苣總糖含量 菊苣藥材含量測定結(jié)果,如表1所示。
表1 菊苣總糖含量測定表
2.2 菊苣藥材還原糖含量分析 菊苣藥材還原糖含量測定結(jié)果,如表2所示。
表2 菊苣藥材還原糖含量測定表
2.3 菊苣多糖含量計(jì)算 菊苣多糖含量是菊苣總糖含量和菊苣還原糖含量之間的差值,根據(jù)以上計(jì)算可以推算出,本次實(shí)驗(yàn)菊苣多糖含量為53.82%。
作者單位:550025貴州省貴陽市貴州醫(yī)科大學(xué)
菊苣藥材中對(duì)菊苣糖含量的測定能夠?yàn)榕R床治療各種疾病提供有效的參考依據(jù),提高菊苣藥材藥物應(yīng)用價(jià)值。過去臨床上對(duì)菊苣糖類研究比較少,本次研究主要liy9ong紫外可見分光光度法測量菊苣多糖含量[3,4]。
首先測量菊苣總糖含量,多糖成分在硫酸作用下會(huì)被水分解成單糖,然后在苯酚的作用下合成有色化合物,然后利用分光光度計(jì)測定吸光度,再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線計(jì)算菊苣多糖含量。這種測定方法操作簡便,穩(wěn)定性好、靈敏度高,而且具有很好的重復(fù)性。在還原糖豆額測定中將生成的氨基化合物在沸水中處理,實(shí)驗(yàn)過程中要注意把握好顯色時(shí)間、波長的選擇等,這些對(duì)測定結(jié)果均有一定的影響[5]。本次實(shí)驗(yàn)采用的測定方法快速、簡便、準(zhǔn)確、高效。最后利用不同地區(qū)的菊苣藥材進(jìn)行結(jié)果測定,以便提高測定準(zhǔn)確率。
本次試驗(yàn)中利用江蘇東臺(tái)、山東壽光、山東淄博3地的菊苣藥材進(jìn)行計(jì)算、分析,發(fā)現(xiàn)菊苣藥材總糖行亮不低于50.552%,菊苣還原糖含量不低于7.496%,經(jīng)計(jì)算發(fā)現(xiàn)菊苣多糖含量不低于43.056%。這個(gè)結(jié)果表明多糖在菊苣藥材中含量較高,能夠應(yīng)用于藥材的評(píng)價(jià)和質(zhì)量控制。
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