血液濾白時機(jī)對制備去白細(xì)胞血液的影響

張月萍 盧小蓮 羅世彬 李 莉 周 燕 譚遠(yuǎn)彩

（梧州市中心血站，廣西 梧州 543002）

血液濾白時機(jī)對制備去白細(xì)胞血液的影響

張月萍 盧小蓮 羅世彬 李 莉 周 燕 譚遠(yuǎn)彩

（梧州市中心血站，廣西 梧州 543002）

目的 探討不同濾器其血液儲存溫度、儲存時間、過濾時機(jī)對制備去白細(xì)胞血液的影響。方法 根據(jù)血液成分制備需要和采血點的遠(yuǎn)近，采用不同濾器采血袋采集抗凝全血，分別將其分為：①常溫組、②2～6 h冷藏組、③8～48 h冷藏組，分別濾除白細(xì)胞。測定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、血細(xì)胞比容和過濾時間，計算白細(xì)胞殘留量，白細(xì)胞濾除率，血紅蛋白含量。結(jié)果 ①組和②③組相比，白細(xì)胞殘留量明顯偏高，過濾時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；白細(xì)胞去除率偏低，紅細(xì)胞回收率明顯升高。②組和③組相比，白細(xì)胞殘留量，過濾時間，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 常溫組制備的去白細(xì)胞血液白細(xì)胞殘留量部分超過國家標(biāo)準(zhǔn)，其他檢測項目達(dá)標(biāo)。②組和③組制備的去白細(xì)胞血液各項檢測結(jié)果均達(dá)標(biāo)。不同的濾器，要掌握其最佳濾白時機(jī)，確保白細(xì)胞的有效去除及血液的質(zhì)量。

濾除白細(xì)胞；儲存溫度；時間因素

去白細(xì)胞血液成分是現(xiàn)階段國內(nèi)外一致公認(rèn)的既安全又高效的血液成分之一，但其制備受儲存溫度、時間的限制。如何根據(jù)制備需要和采血點的遠(yuǎn)近，選擇合適的濾器掌握其最佳濾白時機(jī)，更有效去除血液中的白細(xì)胞，提高血液質(zhì)量，各地血站均在探討。本站于2012年科研立項開展血液去白細(xì)胞技術(shù)研究，為掌握各種型號濾器的血液最佳過濾時機(jī)，我們對三種去白細(xì)胞濾器采血袋采集的血液在不同儲存溫度和儲存時間的過濾性能和濾除白細(xì)胞效果進(jìn)行了評價。

1　材料與方法

1.1材料：一次性使用去白細(xì)胞多聯(lián)采血袋（帶軟芯濾器型、即采即濾型、隔夜過濾型）；超大容量低溫離心機(jī)（索福12BP、賀利氏6000i 美國Thermo）；SE250熱合機(jī)（韓國森通）；低溫濾白柜（上海諾驪）；Nageotte白細(xì)胞計數(shù)盤（assistent）；血細(xì)胞計數(shù)儀（希森美康）。

1.2去白細(xì)胞紅細(xì)胞制備：隨機(jī)選取本站2012年采集的無償獻(xiàn)血者全血（400 mL）各40袋：①常溫組：采用帶軟芯濾器型多聯(lián)采血袋采集全血，在（22±2） ℃血小板保存箱內(nèi)不振蕩保存。在6 h內(nèi)連同軟芯濾器一起離心，制備濃縮血小板、新鮮冰凍血漿、懸浮紅細(xì)胞。懸浮紅細(xì)胞在制備后連同軟芯濾器一起靜置于2～8 ℃低溫操作臺，30 min～2 h內(nèi)在低溫濾白柜內(nèi)濾除白細(xì)胞，②2～6 h冷藏組：采用即采即濾型（硬芯濾器）一次性去白細(xì)胞多聯(lián)采血袋采集全血，采集后的全血放置于（4±2） ℃冰箱3 h以上，在采血后6 h內(nèi)同上法過濾（控制滴速不超250滴/分鐘）。過濾后的全血制備新鮮冰凍血漿、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞。③8～48 h冷藏組：采用隔夜過濾型（硬芯濾器）一次性去白細(xì)胞多聯(lián)采血袋采集全血，采集后的全血放置于（4±2） ℃冰箱，在采血后8 h以上至48 h內(nèi)同上法過濾（毋需控制滴速）。過濾后的全血制備冰凍血漿、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞。

1.3血樣留取及檢測：每袋分別留取過濾前的全血和過濾后的紅細(xì)胞標(biāo)本，分別稱量過濾前的全血和過濾后的紅細(xì)胞重量。采用血細(xì)胞計數(shù)儀或白細(xì)胞計數(shù)盤對標(biāo)本進(jìn)行紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、血細(xì)胞比容檢測，同時計算去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的白細(xì)胞殘留量，白細(xì)胞濾除率，血紅蛋白含量。

表1　三組濾白血液質(zhì)量及過濾時間的比較

1.4統(tǒng)計學(xué)處理：采用軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。采用方差分析分別計算三種方法中的白細(xì)胞殘留量、白細(xì)胞濾除率、血紅蛋白含量、血細(xì)胞比容、過濾時間，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié) 果

白細(xì)胞殘留量三組之間比較：F=10.58＞3.18，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；兩組之間比較：①組與②組對比：q=5.40＞2.86，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；①組與③組對比：q=5.84，＞3.44，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；②組與③組對比：q=0.44，＜ 2.86，P＞0.05無統(tǒng)計學(xué)意義。過濾時間三組之間比較：F=19.71＞3.18，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；兩組之間比較：①組與②組對比：q=8.40＞2.86，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；①組與③組對比：q=6.68＞3.44，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；②組與③組對比：q=1.72＜2.86，P＞0.05無統(tǒng)計學(xué)意義。血紅蛋白含量三組之間比較：F=0.54＜3.18，P＞0.05無統(tǒng)計學(xué)意義。

3　討 論

本研究擬通過檢測不同型號濾器在采血后不同儲存溫度、儲存時間濾除血液中白細(xì)胞的性能，選擇適合采血點、適合制備需要的濾器。

通過研究發(fā)現(xiàn)，②組和③組制備的去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞質(zhì)量符合國家標(biāo)準(zhǔn)，即白細(xì)胞殘留量≤5.0×106個/400mL，血紅蛋白含量≥36 g，血細(xì)胞比容：0.45～0.60[1]。②組可在采集后 6 h內(nèi)過濾，可以制備新鮮冰凍血漿，滿足臨床新鮮冰凍血漿需求和制備冷沉淀用漿要求。適合用于市區(qū)采血點和車程在2 h內(nèi)的鄉(xiāng)鎮(zhèn)采血點采血活動結(jié)束前3 h使用，但不適合用于路程較遠(yuǎn)的鄉(xiāng)鎮(zhèn)或縣城采血，我們觀察到采血后隔夜或隔天才把血液接回來過濾，會增加濾器堵塞比例。③組適合用于路程較遠(yuǎn)的縣城或鄉(xiāng)鎮(zhèn)采血，但不能制備新鮮冰凍血漿。從過濾時間看，①組所需的時間明顯多于全血直接過濾法，可能是因為懸浮紅細(xì)胞較全血黏度高，過濾時不夠通暢所致。從紅細(xì)胞回收率看①組高于②組和③組，與報道的室溫保存的血液紅細(xì)胞回收率高于2～6 ℃保存一致[2]。

目前，血站使用的白細(xì)胞濾器大多是硬芯濾器，硬芯濾器因為容易破裂不宜放進(jìn)離心機(jī)一起離心，不能制備手工血小板。隨著血小板的臨床用量不斷增大，為了滿足血站制備需求，近幾年來已有廠家研發(fā)出可制備手工血小板的帶軟芯濾器的一次性去白細(xì)胞多聯(lián)采血袋。我站進(jìn)行了試用（見①組），檢測結(jié)果顯示白細(xì)胞濾除率達(dá)不到99.9%，比其他兩組高，白細(xì)胞殘留量部分超過國家標(biāo)準(zhǔn)，可見濾白效果不如②組和③組，與報道的硬芯濾器與軟芯濾器在白細(xì)胞濾除效果方面無統(tǒng)計學(xué)意義，軟芯濾器濾除白細(xì)胞可達(dá)到同樣的效果[3]不一致。是否與血液冷藏時間不夠有關(guān)還需要進(jìn)一步試驗。因為血液放置在4 ℃冰箱一段時間后白細(xì)胞、血小板和纖維蛋白凝聚形成微聚體從而容易被去除[4]。而且白細(xì)胞在4～6 ℃中變形能力差，容易被白細(xì)胞濾器攔截。在制備去白細(xì)胞血液過程中，去白細(xì)胞血液質(zhì)量與濾器的材質(zhì)也有很大關(guān)系。血液的貯存時間、貯存溫度、血漿的量、過濾前白細(xì)胞的量 、過濾時間的長短 、濾過時血液的流速等都會影響白細(xì)胞的去除效果[5]。在以后的工作中找出各種型號濾器血液濾白效果好、操作簡單的制備方法，掌握血液的最佳濾白時機(jī)是我們努力的方向。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部.中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB18469-2012.全血及成分血質(zhì)量要求[M].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2012.

[2] 潘越飛.血液過濾去除白細(xì)胞的質(zhì)量控制[J].內(nèi)科,2012,7(1):64.

[3] 朱琳,明文娟,丁國良.應(yīng)用軟芯濾器進(jìn)行血液過濾的效果分析[J].臨床輸血與檢驗,2010,12(2):157.

[4] 楊成民,李家增,季陽.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,200l:444-446.

[5] 劉加軍,伍新堯,潘祥林,等.去白細(xì)胞輸血治療對惡性血液病化療患者細(xì)胞免疫功能的影響[J].實用診斷與治療雜志,2004,18 (1):6-7.

R446.11

B

1671-8194（2015）30-0038-02

2012年梧州市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目立項科研課題（編號：201202121）