血細胞分析儀測定不同放置時間的預(yù)稀標(biāo)本結(jié)果觀察

蔣素珍 唐令學(xué)

（廣西桂林市靈川縣計劃生育服務(wù)站（婦幼保健院）檢驗科，廣西 桂林 541299）

血細胞分析儀測定不同放置時間的預(yù)稀標(biāo)本結(jié)果觀察

蔣素珍 唐令學(xué)

（廣西桂林市靈川縣計劃生育服務(wù)站（婦幼保健院）檢驗科，廣西 桂林 541299）

目的 探討標(biāo)本預(yù)稀釋后放置不同時間測定結(jié)果的變化情況，以利于實驗室的質(zhì)量控制。方法 抽取靜脈血2 mL以EDTA-K2抗凝，充分混勻后吸取20 μL全血至180 μL的稀釋管中，每份標(biāo)本制備7份稀釋標(biāo)本，置室溫18～22 ℃，分別于3、10、20、30、60、120、180 min混勻后測定，每份預(yù)稀標(biāo)本測定兩次，取其平均值，各組均值與3 min均值比較，并進行兩樣本均數(shù)的配對t檢驗。結(jié)果 WBC、RBC、HGB、MCH、PLT、RDW-CV測定值受放置時間影響不大（P＞0.05），而MCV及單核細胞隨放置時間延長逐漸下降，MCHC隨放置時間延長逐漸升高，在放置30 min時MCV、MCHC已有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；在放置60 min時，MCV、MCHC及單核細胞已有特別顯著變化（P＜0.01），其他參數(shù)如HCT、RDW-SD、MPV、PCT隨放置時間延長出現(xiàn)不同程度的變化。結(jié)論 預(yù)稀標(biāo)本應(yīng)在20 min內(nèi)測定，如超過20 min后測定，只有WBC、RBC、HGB、MCH、PLT、RDW-CV可報告臨床，其他參數(shù)，特別是MCV、MCHC及白細胞分類不可發(fā)報告。

血細胞分析儀；放置時間；預(yù)稀標(biāo)本

血細胞分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床，其檢驗結(jié)果對疾病的診斷或鑒別診斷具有一定的臨床參考價值，故檢測值的準(zhǔn)確性對臨床疾病的診斷至關(guān)重要，現(xiàn)就血細胞分析儀測定不同放置時間的預(yù)稀標(biāo)本結(jié)果報道如下。

1　材料與方法

1.1對象：健康人20例，均經(jīng)體檢確認合格者，年齡20～38歲，男9例，女11例。

1.2儀器：深圳邁瑞B(yǎng)C-5380全自動血液細胞分析儀及配套試劑，一次性真空采血試管，機配離心管，一次性微量吸管。

1.3方法

1.3.1首先以儀器原配質(zhì)控液檢驗儀器性能，各項指標(biāo)重復(fù)性好，測定結(jié)果穩(wěn)定可靠。

1.3.2抽取靜脈血2 mL以EDTA-K2抗凝，充分混勻后吸取20 μL全血至180 μL的稀釋管中，立即混勻，每份標(biāo)本制備7份稀釋標(biāo)本，置室溫18～22 ℃，分別于3、10、20、30、60、120、180 min混勻后測定，每份預(yù)稀標(biāo)本測定兩次，取其平均值，各組均值與3 min均值比較，并進行兩樣本均數(shù)的配對t檢驗。

2　結(jié)果與討論

2.1結(jié)果見表1。預(yù)稀標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC、HGB、MCH、RDW-CV、PLT測定值受放置時間的影響不大（P＞0.05），而MCV及單核細胞隨放置時間延長逐漸下降，MCHC隨放置時間延長逐漸升高，在放置30 min時MCV、MCHC已有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；在放置60 min時，MCV、MCHC及單核細胞已有特別顯著變化（P＜0.01），其他參數(shù)如HCT、RDW-SD、MPV、PCT隨放置時間延長出現(xiàn)不同程度的變化，這可能是由于稀釋液略為高滲，細胞處在略高滲環(huán)境中逐漸發(fā)生皺縮，根據(jù)本機的工作原理：采用庫爾特原理檢測白細胞/嗜堿性粒細胞、紅細胞和血小板的數(shù)目以及體積分布；采用比色法測量血紅蛋白濃度；采用半導(dǎo)體激光流式細胞技術(shù)獲得白細胞的四分類統(tǒng)計計數(shù)；在此基礎(chǔ)之上，分析儀計算出其余參數(shù)的結(jié)果。雖然激光流式細胞技術(shù)是當(dāng)細胞（或顆粒）通過激光束被照射時，因其本身的特性（如體積、染色程度、細胞內(nèi)容物大小及含量、細胞核密度等），可阻擋或改變激光束的方向，產(chǎn)生與其特征相應(yīng)的各種角度的散射光而達到分類的，但單核細胞胞質(zhì)豐富，脫水皺縮后與大淋巴細胞相似，儀器誤把部分單核細胞歸為淋巴細胞是極有可能的，從表1中也可看出，淋巴細胞隨放置時間延長逐漸增多，只是無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表1　20例預(yù)稀標(biāo)本不同放置時間（min）的測定值（）

表1　20例預(yù)稀標(biāo)本不同放置時間（min）的測定值（）

注：*與對照組（3 min）比較P＜0.05，**P＜0.01

項目　3　10　20　30　60　120　180 WBC（×109）　6.71±1.84　6.83±1.89　7.19±2.02　6.74±1.96　6.74± 1.78　6.84± 1.87　6.74± 1.84 Neu（%）　60.31±6.36　60.28±5.97　60.31±6.61　59.60±6.36　61.08±6.34　61.07±6.16　61.13±6.77 Lym（%）　30.59±6.07　30.85±6.09　31.19±6.20　31.88±6.30　31.90±6.15　31.92±6.26　31.93±6.22 Mon（%）　5.80±1.87　5.49±2.03　5.13±2.01　4.99±2.08　3.79±2.15**　3.55± 2.18**　3.54 ±2.61** Eos（%）　2.80±1.23　2.91±1.30　2.85±1.56　3.05±1.36　2.76± 1.42　3.02± 1.28　2.88± 1.34 Bas（%）　0.48±0.16　0.48±0.22　0.53±0.20　0.48±0.19　0.45± 0.18　0.49± 0.25　0.53± 0.22 RBC（×1012）　4.67±0.33　4.69±0.32　4.63±0.32　4.65±0.33　4.54± 0.42　4.61± 0.40　4.58± 0.35 HGB（g/L）　145.85±12.42　147.00±12.33　145.90±11.47　144.7±11.9　142..00±14.92　144.10±14.93　143.00±13.23 MCV（fL）　88.63±3.2　87.34±3.12　86.49±2.89　86.1±2.44*　85.70±2.76**　84.88±2.76**　84.65±2.75** HCT（%）　41.18±3.10　41.05±2.88　40.38±2.62　40.07±2.99　38.88±3.86*　38.83±3.44*　38.75±2.94* MCH（pg）　31.20±1.25　31.29±1.20　31.50±1.19　31.12±1.09　31.29±1.40　31.25±1.30　31.22±1.33 MCHC（g/L）　354.10±10.54　357.90±10.31　359.30±10.86　361.00±9.48*　365.05±12.42**　368.05±11.22**　368.15±10.35** RDW-CV　12.07±0.41　11.99±0.42　12.03±0.45　12.03±0.37　12.03±0.41　12.00±0.43　12.05 ±0.4 RDW-SD　47.16±2.23　46.35±2.3　46.48±2.47　45.99±2.36　45.64±2.27*　45.16±2.20**　45.21±2.13** PLT（×109）　225.85±52.94　237.45±41.66　214.90±45.58　238.56±45.79　231.80±44.84　227.45±41.12　229.35±40.50 MPV（fl）　9.16±0.84　9.17±0.99　9.10±0.95　8.81±0.88　8.60±0.91*　8.32±0.95**　8.16±0.93** PDW　15.98±0.23　16.09±0.24　16.11±0.24　16.12±0.25　16.11±0.29　16.12±0.32　16.18±0.32* PCT（%）　0.21±0.04　0.22±0.04　0.21±0.04　0.21±0.04　0.20± 0.04　0.19±0.03*　0.19±0.03*

2.2預(yù)釋標(biāo)本制備后靜置3 min而不立即測定，是因為末梢血采集后血小板容易聚集，如果立即測定，血細胞分析儀會把聚集的血小板誤認為白細胞而使血小板計數(shù)結(jié)果偏低、白細胞計數(shù)結(jié)果偏高，靜置3 min后，聚集的血小板就會散開。

2.3有報道：預(yù)稀標(biāo)本超過20 min后測定，測定結(jié)果只有RBC、WBC和HGB幾項參數(shù)可報告臨床，而其他參數(shù)，尤其是白細胞分類和血小板計數(shù)結(jié)果不可發(fā)報告［1］；預(yù)稀標(biāo)本2 min后至4 h內(nèi)所測結(jié)果無明顯變化［2］；預(yù)稀后WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、PLT和RDW的結(jié)果可穩(wěn)定于6 h內(nèi)［3］；預(yù)稀末梢血后應(yīng)立即測定，放置時間不應(yīng)超過90 min，超過90 min之后的測定結(jié)果不可報告臨床，特別是WBC分類和PLT計數(shù)的值［4］。出現(xiàn)這種差異可能是由于不同廠家的儀器性能及試劑的成分和濃度有所不同而引起的，因此，各實驗室要對不同廠家不同型號的血細胞分析儀進行預(yù)稀標(biāo)本放置時間的設(shè)定，建立相應(yīng)的參考區(qū)間，這樣才能保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4盡管專家已不斷呼吁在血細胞分析中應(yīng)使用靜脈抗凝血標(biāo)本全血模式測定，但在實際工作中仍有部分醫(yī)院在使用末梢血標(biāo)本，特別是兒科，許多情況下是先準(zhǔn)備好稀釋液去病房或門診采集末梢血，經(jīng)過一段時間后才拿回實驗室進行測定，因此對某些測定結(jié)果產(chǎn)生了影響，出現(xiàn)一定的偏差，由此就會影響臨床醫(yī)師對某些疾病的診斷或者鑒別診斷，故筆者認為使用血細胞分析儀時盡量采用靜脈抗凝血全血模式測定（筆者已實驗證實本儀器對靜脈抗凝血標(biāo)本全血模式測定至少在8 h內(nèi)結(jié)果都穩(wěn)定可靠），也有報道血細胞計數(shù)標(biāo)本在常溫下24 h內(nèi)檢測結(jié)果可靠［5］，如采用末梢血測定時，BC-5380全自動血液細胞分析儀測定稀釋標(biāo)本放置時間不應(yīng)超過20 min，如超過20 min后測定，只有WBC、RBC、HGB、MCH、PLT可報告臨床，其他參數(shù)，特別是MCV、MCHC及白細胞分類不可發(fā)報告。

［1］呂斌斌.預(yù)稀標(biāo)本放置時間對血細胞分析儀測定結(jié)果的影響［J］.臨床檢驗雜志，1997，15（1）：32-33.

［2］張秀梅.時間放置對預(yù)稀法測定血常規(guī)結(jié)果的影響［J］.江西醫(yī)學(xué)檢驗，2004，22（6）：567-571.

［3］李丙成，趙晉寧，劉吉杰，等.時間和溫度對F-820血細胞分析儀檢測值的影響觀察［J］.臨床檢驗雜志，1996，14（6）：320.

［4］趙元青.預(yù)稀釋末梢血標(biāo)本放置時間對血細胞分析儀測定結(jié)果的影響［J］.青海醫(yī)藥雜志，2001，31（12）：49-50.

［5］李清澤.血常規(guī)標(biāo)本存放條件對血細胞計數(shù)的影響［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（18）：2179-2182.

R446.1

B

1671-8194（2015）27-0165-02