王威威
【摘要】近年來血細胞分析儀在技術和方法學上有許多顯著的改進。本文就其的進展及臨床應用進行探討。
【關鍵詞】血細胞分析;進展;臨床應用
【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2015)02-0085-01
早在20世紀50年代美國庫爾持先生首先發(fā)明了電阻式血細胞分析儀,開創(chuàng)了血細胞分析的新紀元。進入80年代庫爾特公司又利用電阻(測體積)、激光(測核形態(tài))、高能電磁波等幾項技術共同檢測、綜合分析,使血細胞分析的結果更加準確。與此同時,也有人利用粒細胞所具有的大量過氧化物酶,而單核細肥此酶較少,淋巴細胞則無此酶存在的特點,把化學染色與激光分析相結合進行細胞分類,從此細胞從單一技術進入高科技發(fā)展的新階段。90年代初又有人從細胞膜的結構差異進行分類,比如幼稚細胞膜上的脂類多,結合的硫化氨基酸多,對膜的保護性強,溶血劑不易破壞,成熟細胞則反之。
目前,發(fā)達國家的半自動血細胞分析儀已經(jīng)淘汰,取而代之的是不同功能的全自動,甚至幾種儀器聯(lián)合使用,電腦控制。Sysmex將血細胞分析儀,網(wǎng)織紅細胞計數(shù),推片機全部聯(lián)在一起,通過儀器識別,然后根據(jù)紅細胞的多少決定是否計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,又根據(jù)HCT的高低決定推片的角度,根據(jù)立方圖的形態(tài)決定是否需要鏡檢,同時還設置了自動加樣和真空采血裝置,從而大大提高了結果的準確性和工作效率。
一、細胞分析儀原理簡介
血細胞分析儀的主要分析原理:根據(jù)血細胞非傳導的性質.在浸入電解質的微孔管內(nèi)外各有一個電極,當電流接通后,兩電極形成電流、動力泵產(chǎn)生負壓、開始充量吸樣,由于細胞為不良導體,在經(jīng)過微孔的一瞬間,電阻增大,產(chǎn)生相應的脈沖傳導(電壓),稱為通過脈沖,此時電壓增加和變化的程度取決于非傳導性細胞占據(jù)小孔感應區(qū)的體積,即細胞體積越大,引起的脈沖越大,所產(chǎn)生的脈沖振幅越高,再經(jīng)過放大,閾值調節(jié),甄別,整形,計數(shù),得出結果。
(一)血細胞分析
由于細胞為不良導體,以電解質溶液中懸浮顆粒在通過小孔時引起的電阻變化為基礎,進行血細胞計數(shù)和體積測定,這種方法稱電阻法,也被稱為庫爾特原理。把經(jīng)過電解質溶液稀釋的細胞懸液倒入一個不導電的容器中(塑料杯),把小孔管插入細胞懸液中,小孔管的內(nèi)側充滿了稀釋液,并有一個內(nèi)電極,外側細胞懸液中有一個外電極,當電流接通后小孔內(nèi)外側的電極形成穩(wěn)定的電流,稀釋液通過小孔向內(nèi)部流動,當細胞通過小孔時,瞬時引起了電壓變化而出現(xiàn)一個脈沖傳導,稱為通過脈沖、再經(jīng)過以下步驟得出結果:
1.放大 細胞通過小孔時所產(chǎn)生的脈沖傳導微弱,難以直接觸發(fā)計數(shù)電路。必須經(jīng)電子放大器把微伏信號放大成伏級信號。
2閾值調節(jié) 在一定范團內(nèi)調節(jié)參考電平大小,使計數(shù)結果更加符合實際。
3甄別 各種微粒通過微孔時均可產(chǎn)生訊號、訊號電平(脈沖幅度)與微粒子大小成正比,所為甄別就是根據(jù)閾值調節(jié)器提供的參考電平,把低于參考電平的假訊號去掉,以提高準確性。
4整形 經(jīng)放大和甄別的波形不—致,須經(jīng)過整形器調整為形狀—致標淮的平頂波后才能觸發(fā)電路,送入計數(shù)系統(tǒng),得出計數(shù)結果。
5.計數(shù)得出結果。
(二)紅細胞檢測原理
絕大多數(shù)血細胞分析儀都使用電阻法進行紅細胞計數(shù)和紅細胞比積測定,原理同白細胞,其中計數(shù)結果包括白細胞。由于紅、白細胞比例為750:1,故白細胞因素可忽略不計,當有白血病或貧血伴有核紅細胞增加時,應減去白細胞或有核紅細胞。
(三)Hb含量檢測
經(jīng)稀解的血液加入溶血劑后,使細胞溶解釋放出血紅蛋白,與溶血劑的有關成分結合形成血紅色的衍生物,再進入Hb檢測系統(tǒng),在530—550nm波長下比色.吸光度的變化與Hb含量成正比。
二、血細胞直方圖與疾病診斷
先進的血細胞分析儀不僅能檢測更多的實驗參數(shù),而且還能提供相應的直方圖,立方圖的變化對分析實驗結果的準確性、加強質量控制及臨床診斷有重要意義。此外,各類參數(shù)在疾病的診斷中也有重要意義,如:RDW:是反映紅細胞體積異質性改變的參數(shù),能客觀地反映紅細胞大小不等的程度。用途:①缺鐵性貧血的診斷和療效觀察;缺鐵性貧血和地中海貧血的鑒別診斷;有助于貧血的病因學分類。MPV:鑒別血小板減少的病因和評價骨髓增生情況。PCT:反映血小板的總數(shù)量是PLT MPV的綜合評價指標。
(一)白細胞直方圖變化的臨床意義
在進行白細胞計數(shù)時,細胞根據(jù)體積大小分配在不同計算機通道中,從而得到白細胞體積分布直方圖。反之從圖形的變化可以看出被測血液中細胞解體的變化。這種變化細胞圖形并無特異性。比如中間細胞群可包括大淋巴細胞、原始細胞、幼稚細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞,其中任何一類細胞的增多,均可使直方圖產(chǎn)生相似變化,只是提示檢查者粗略地判斷細胞比例變化或有無明顯的異常細胞出現(xiàn),進而在顯微鏡下檢查中注意這些變化或在正常人體檢中,篩選是否需要進一步作血涂片檢查??梢钥闯觯M管引起血液學變化的病因不同、細胞動態(tài)變化不同,但直方圖形很相似,說明白細胞直方圖形變化并天特異性。
(二)紅細胞體積直方圖的臨床意義
與本溪吧直方圖意義不同,某些貧血紅細胞體積直方圖有其特點,此種圖形變換再結合其他參數(shù)進行分析,對鑒定診斷頗有價值。分析時,要注意觀察圖形的位置、峰底的寬度、峰頂?shù)男螒B(tài)及有無雙峰出現(xiàn)。
不同型號儀器其特點及使用稀釋液不同,紅細胞直方圖的形態(tài)亦異常,但反映病理變
化基本特征是相同的,不同實驗室應根據(jù)本室儀器的圖形進行對比分析。
(三)血小板立方圖的變化
血小板測量結果是根據(jù)血小板直方圖得出的,微機根據(jù)直方圖形態(tài),繪出擬合曲線,決定大血小板數(shù)目的補償并計算MPV、PCT、PSW各項參數(shù)。當被測標本中小細胞增多或出現(xiàn)細胞碎片或血小板凝聚時影響實驗結果,血小板體積直方圖均能反映這些變化。因此在發(fā)出血小板報告之前,首先要觀察其圖形是否正常,如為異常的圖形,均為檢查血液中有血小板凝聚,必要時作血涂片檢查是否有小紅細胞或大血小板增多現(xiàn)象。
參考文獻:
[1]傅麗云,馮有才.血細胞分析儀的臨床應用[J].山西職工醫(yī)學院學報,2008(04).
[2]朱蕓.不同血液分析儀試劑使用的比較[J];河北醫(yī)藥.2000(11).
[3]安邦權,凌曉午,張燕,周湘紅,葉艾竹,張建,費蓉.ADVIA 120型血液分析儀異常報警參數(shù)及其可靠性分析[J].檢驗醫(yī)學;2006(05).