蘆筍皮中黃酮類化物丙酮提取方法研究

鄒春文

（福建省連城縣農(nóng)業(yè)局， 福建 龍巖 364000）

蘆筍皮中黃酮類化物丙酮提取方法研究

鄒春文

（福建省連城縣農(nóng)業(yè)局， 福建 龍巖 364000）

通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),探討了丙酮提取法對蘆筍皮中黃酮類物質(zhì)提取量的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：試驗(yàn)中對蘆筍皮中黃酮類化合物提取率的影響依料液比和提取溫度、提取時間、提取溶劑濃度的不同提取2次而改變。其中料液比具有較大的影響，提取的溫度和提取溶劑濃度具有同等的影響，而提取的時間影響不大。結(jié)果表明，料液比1：40，提取溫度50℃，提取2h，提取溶液濃度60%，提取率最佳。

蘆筍皮；黃酮類化合物；提取

蘆筍（Aspanagus officinalls linn）學(xué)名石刁柏，系百合科天門冬屬宿根性草本植物，是一種食藥兩用的保健食品，它不僅對全身倦怠、食欲不振、心悸、心力衰竭、糖尿病、結(jié)石癥及膀胱炎等多種病癥有一定的治療效果，而且具有抗腫瘤、抗衰老、耐疲勞、耐缺氧、降血脂、升白細(xì)胞、保肝解毒及免疫調(diào)節(jié)的作用。而蘆筍皮中的黃酮類化合物是一類低分子天然植物成分，具有消炎、消腫、降壓、降血脂、以及清除自由基等多種重要的生物活性，是植物經(jīng)過光合作用產(chǎn)生的一大類化合物，是以黃酮（2—苯基色原酮）為母核的一類黃色素，其中包括黃酮的同分異構(gòu)體（異黃酮）及其原產(chǎn)物（黃烷酮）。許多黃酮類物質(zhì)已在食品、藥品、化妝品等產(chǎn)品中得到應(yīng)用，但目前尚未見以蘆筍皮為原料提取天然黃酮類物質(zhì)的報(bào)道。

文章以蘆筍皮為原料，從綠色保健以及經(jīng)濟(jì)價值等方面考慮，以正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法考察了提取條件對黃酮類物質(zhì)提取率的影響，旨在為天然黃酮類物質(zhì)的最優(yōu)提取工藝條件提供一些有益的參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和設(shè)備

高速萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；100目標(biāo)準(zhǔn)分樣篩；A型電子天平（常熟市百靈天平儀器有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；SHB—Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；80-2離心機(jī)（上海浦東物理光學(xué)儀器廠）。

1.2 材料和試劑

蘆筍原料（漳州市農(nóng)貿(mào)市場）；實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純試劑：丙酮、95%乙醇（汕頭市達(dá)濠精細(xì)化學(xué)品公司），Al(NO3)3（廣東西隴化工廠），NaOH（浙江省溫州市精細(xì)化工公司）。實(shí)驗(yàn)用水由蒸餾水經(jīng)純化器純化所得。

40%(60%、80%)丙酮溶液；5%NaNO2溶液；10%Al(NO3)3溶液；4%NaOH溶液；30%乙醇溶液。

1.3 實(shí)驗(yàn)流程

蘆筍皮干燥樣→粉碎→過篩→浸提（依條件）→抽濾→定容→離心→取2ml上清液→加1ml5%NaNO2→靜置6min加1ml10%Al(NO3)3→靜置6min加10ml5%NaOH再用30%乙醇定容至25ml→靜置10min后于510nm處測吸光度

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

取干燥粉碎后已過100目篩的蘆筍皮粉末0.5000±0.0002g置于比色管中，根據(jù)不同浸提條件提取，再用循環(huán)水式多用真空泵抽濾，取其濾液于50ml容量瓶中定容，搖均。再取出部分于離心管中在離心機(jī)3000轉(zhuǎn)10min離心。取其上清夜2ml于比色管中，加入1ml5%NaNO2靜置6min，加1ml10%Al(NO3)3再靜置6min，之后加入10ml5%NaOH再用30%乙醇定容至25ml，置10min后于510nm處測吸光度，得出結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 適當(dāng)浸提條件的確定

2.1.1 料液比的確定

根據(jù)料液比1：10、1：20、1：30、1：40的量加入100%丙酮混均，于40℃恒溫水浴鍋中1h浸提，結(jié)果于510nm處測吸光度，同時做2份平行樣，所得數(shù)據(jù)如表1，實(shí)驗(yàn)表明料液比1：40的吸光度最高。

表1 不同料液比的吸光度情況

2.1.2 溫度的確定

根據(jù)料液比1：40的量加入100%丙酮，分別于40℃和20℃的恒溫水浴鍋中1h浸提，結(jié)果于510nm處測吸光度，同時做2份平行樣，所得數(shù)據(jù)如表2，實(shí)驗(yàn)表明40℃條件下的吸光度最高。

表2 不同溫度的吸光度情況

2.1.3 時間的確定

根據(jù)料液比1：40的量加入100%丙酮，于40℃的恒溫水浴鍋中靜置30、60、90、120min浸提，結(jié)果于510nm處測吸光度，同時做2份平行樣，所得數(shù)據(jù)如表3, 實(shí)驗(yàn)表明90min條件下的吸光度最高。

表3 不同時間的吸光度情況

2.1.4 丙酮濃度的確定

根據(jù)料液比1：40的量分別加入濃度為40%、60%、80%、100%丙酮混均，于40℃的恒溫水浴鍋中靜置90min浸提，結(jié)果于510nm處測吸光度，同時做2份平行樣，所得數(shù)據(jù)如表4，實(shí)驗(yàn)表明100%丙酮溶液中吸光度最高。

表4 不同溶劑濃度的吸光度情況

2.2 正交實(shí)驗(yàn)

為了進(jìn)一步優(yōu)化丙酮提取蘆筍中黃酮類化合物的實(shí)驗(yàn)條件，按 L934正交表安排實(shí)驗(yàn)，影響因素為料液比、浸提溫度、浸提時間和浸提溶液丙酮濃度如表5。

表5 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

相同實(shí)驗(yàn)條件同一批次，同一批次平行處理2份樣品，以測得的吸光度值為指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果如表6。其中k1j、k2j和k3j分別為每個因素中水平1、水平2和水平3的吸光度之和；R為k1j、k2j和k3j中每個因素中最大值與最小值之差。根據(jù)各因素中k1j、k2j和k3j的大小來確定它們的最優(yōu)水平，根據(jù)R的大小來確定因素的主次。

3 結(jié)論

通過實(shí)驗(yàn)所獲得的數(shù)據(jù)在表6中可得知，蘆筍皮中用丙酮提取法提取黃酮類化合物的較優(yōu)水平為A2即料液比為1：40；由于溫度B中k1j和k3j所得結(jié)果相等,但根據(jù)B1與B3各自的吸光度相對來說B3＞B1,因此初步確定B中的較優(yōu)水平為B3，而由于結(jié)果也受料液比、浸提時間、浸提溶液丙酮濃度的影響，所以在溫度較優(yōu)水平的確定上有袋進(jìn)一步的研究。時間的較優(yōu)水平選擇上雖k2j和k3j相等，但根據(jù)生產(chǎn)效率方面考慮，最好時間越短越好，因此時間的較優(yōu)水平為C2；丙酮濃度的較優(yōu)水平為D1，在成本上損失的也小。整個方案的較優(yōu)水平為A2B3C2D1。

所得結(jié)果對進(jìn)一步改進(jìn)丙酮提取法的浸提條件以提高蘆筍皮中黃酮類化合物的提取率具有一定的參考價值。

表6 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

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TS201.2

A

1007-550X（2015）09-0052-03

10.3969/j.issn.1007-550X.2015.09.003

2015-

鄒春文（1977-），男，福建連城人，工程師，主要從事食品加工。