正交試驗(yàn)優(yōu)選藏藥六味大托葉云實(shí)散中揮發(fā)油的包合工藝

馬宏偉+田汝芳+魏愛云

【摘 要】 目的：探討六味大托葉云實(shí)散中肉桂、豆蔻和蓽茇的混合揮發(fā)油包合工藝。方法：采用正交設(shè)計(jì)，以包合物收率和包合率綜合評(píng)分為指標(biāo)，考察揮發(fā)油與β-環(huán)糊精比例、包合溫度、包合時(shí)間等3個(gè)因素對(duì)包合工藝的影響。結(jié)果：最佳包合工藝為揮發(fā)油與β-環(huán)糊精的比例為1∶ 6（V∶ m），40℃攪拌包合90min。結(jié)論：優(yōu)選的包合工藝合理、可行，可為六味大托葉云實(shí)散的二次開發(fā)提供參考。

【關(guān)鍵詞】 六味大托葉云實(shí)散；揮發(fā)油；β-環(huán)糊精；包合工藝

【中圖分類號(hào)】R283-6 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）18-0023-02

Optimization of the Inclusion Technology for Volatile Oil from Liuwei Datuoyeyunshi Powder By Orthogonal Experment

MA Hongwei1 TIAN Rufang2 WEI Aiyun1

1-Shandong Arura Pharmceutical Research & Development Co.， Ltd.， Jinan 250101， China；

2-Shandong Health Pharmaceutical Co.，Ltd.， Jinan 250021，China

Abstract：Objective To optimize the inclusion technology of volatile oil compounds of Cinnamomi cortex， Amomi fructus rotumdus and Piperis longi fructus in Liuwei Datuoyeyunshi Povder.Methods The inclusion technology was optimized by orthogonal design with the ratio of volatile oil to β-cyclodextrin， inclusion temperature and inclusion time as factors using utilization ratio of volatile oil and the yield of inclusion compound as index. Results The optimal inclusion conditions were： applying the saturated aqueous solution method，the proportion of volatile oil to β-cyclodextrin was 1∶ 6（V∶ m）， lasting 90 minutes at 40℃. Conclusion The inclusion technology of volatile oil is reasonable， feasible， and suitable for industrial production.

Keywords：Liuwei Datuoyeyunshi Power； volatile oil；β-cyclodextrin； inclusion technique

六味大托葉云實(shí)散是藏醫(yī)治療婦科病的常用制劑[1]，由大托葉云實(shí)、石榴籽、肉桂、紅花、豆蔻、蓽茇組成。但產(chǎn)品的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單落后，為提高產(chǎn)品質(zhì)量，對(duì)該產(chǎn)品進(jìn)行了二次開發(fā)。揮發(fā)油是方中的主要藥效成分，其中肉桂含揮發(fā)油1-2%，豆蔻含揮發(fā)油5-0%[2]，蓽茇含揮發(fā)油1-0%[3]。為防止揮發(fā)油的揮發(fā)、氧化，掩蓋不良?xì)馕叮岣叻€(wěn)定性以及便于制劑，現(xiàn)對(duì)β-環(huán)糊精包合六味大托葉云實(shí)散中肉桂、豆蔻和蓽茇?fù)]發(fā)油工藝進(jìn)行優(yōu)化，為六味大托葉云實(shí)散的二次開發(fā)提供參考。

1 儀器與材料

1-1 儀器 揮發(fā)油提取器（四川蜀玻集團(tuán)）；BT123D電子分析天平（德國(guó)·賽多利斯）；KDM型控溫電熱套（鄄城華魯電熱儀器有限公司）；DF-101S恒溫磁力攪拌器（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；101型電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）。

1-2 材料 肉桂（批號(hào)：20141003）、豆蔻（批號(hào)：20141112）、蓽茇（批號(hào)：20140801）均由金訶藏藥股份有限公司提供；β-環(huán)糊精（β-CD，北京索萊寶科技有限公司）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2-1 揮發(fā)油的提取與純化[4-5] 按照處方比例稱取肉桂、豆蔻、蓽茇，浸泡1h，然后用水蒸汽蒸餾法提取6 h，得芳香水。將所得芳香水用石油醚（30～60℃）萃取，加無(wú)水硫酸鈉脫水，揮干石油醚，得揮發(fā)油（ρ=0-975g/ml），密閉保存。

2-2 揮發(fā)油包合工藝研究

2-2-1 因素水平的選擇 根據(jù)揮發(fā)油性質(zhì)及預(yù)試驗(yàn)，選取揮發(fā)油與β-CD的比例，包合溫度，包合時(shí)間為影響因素，按L9（34）正交表設(shè)計(jì)試驗(yàn)，以揮發(fā)油包合率和包合物收率作為考察指標(biāo)[6]，優(yōu)選揮發(fā)油包合工藝。因素水平見表1。

表1 因素水平表

2-2-2 包合物的制備 采用飽和水溶液法包合揮發(fā)油。精密量取揮發(fā)油2 ml，加無(wú)水乙醇制成揮發(fā)油的50%（V/V）無(wú)水乙醇溶液。按表1要求，制備規(guī)定溫度下的β-CD的飽和水溶液，在一定轉(zhuǎn)速下，緩慢加入揮發(fā)油的50%無(wú)水乙醇溶液，邊加邊攪拌至規(guī)定時(shí)間[7]，在0～4℃冷藏放置24 h，抽濾，再加適量石油醚（30～60℃）、水分別洗滌至無(wú)揮發(fā)油味、抽濾，40℃恒溫干燥1 h，即得包合物。

2-2-3 揮發(fā)油空白回收試驗(yàn) 取揮發(fā)油的50%（V/V）無(wú)水乙醇溶液（油∶ 醇=1∶ 1）2 ml，置250 ml圓底燒瓶中，加蒸餾水100 ml，水蒸汽蒸餾法提取至揮發(fā)油量不再增加。測(cè)得提取的揮發(fā)油量為0-98 ml（n=3），揮發(fā)油的空白回收率為98%。

2-2-4 包合物含油量的測(cè)定 取揮發(fā)油包合物，置于250 ml圓底燒瓶中，加入蒸餾水100ml，水蒸汽蒸餾法提取揮發(fā)油至揮發(fā)油量不再增加。測(cè)量揮發(fā)油量，按實(shí)驗(yàn)號(hào)依次為1-49、1-63、1-59、1-55、1-58、1-60、1-51、1-64、1-75 ml。

2-2-5 包合物收率和揮發(fā)油包合率的測(cè)定 取“2-2-2”項(xiàng)下的揮發(fā)油包合物，精密稱定重量，置500 ml圓底燒瓶中，加入蒸餾水250 ml，水蒸汽蒸餾法測(cè)定揮發(fā)油的實(shí)際含量[2]。

包合物收得率[8]=包合物重量/（β-CD重量+投油量）×100%

揮發(fā)油包合率[8]=包合物實(shí)際含油量/（投油量×空白回收率）×100%

揮發(fā)油的包合率和包合物收率都是揮發(fā)油包合時(shí)的重要指標(biāo)。包合率反映了包合效果的好壞，收得率對(duì)實(shí)際生產(chǎn)具有重要的指導(dǎo)意義，因此，將包合物收得率和揮發(fā)油包合率的權(quán)重系數(shù)均定為0-5，對(duì)2個(gè)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析見表3。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析表

注：P0-05（2，2）=19-00

由表2、3可知，三種因素對(duì)包合工藝的影響由大到小的順序?yàn)椋喊蠝囟?gt;油與β-CD的比例>包合時(shí)間，其中包合溫度和油與β-CD的比例為顯著性因素，直觀最佳工藝為A3B2C2，但A2為A3的98-37%，從經(jīng)濟(jì)角度考慮，優(yōu)選工藝為A2B2C2，即油與β-CD的比例為1∶ 6（V∶ m），40℃控溫?cái)嚢?0min。

2-2-5 驗(yàn)證試驗(yàn) 根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，分別以直觀最佳工藝和優(yōu)選工藝對(duì)包合工藝進(jìn)行驗(yàn)證，各平行做3份，結(jié)果直觀最佳工藝揮發(fā)油包合率分別為：89-05%、90-31%、89-70%，包合物收得率分別為84-97%、84-65%、84-48%，優(yōu)選工藝揮發(fā)油包合率分別為：89-50%、89-98%、89-67%，包合物收得率分別為84-66%、84-20%、84-43%，直觀最佳工藝與優(yōu)選工藝的值沒有差異，且與正交試驗(yàn)的結(jié)果吻合，說(shuō)明優(yōu)選工藝是合理、穩(wěn)定、可行的。

3 討論

揮發(fā)油的β-CD包合技術(shù)是中藥制劑的常用技術(shù)。六味大托葉云實(shí)散處方中肉桂和豆蔻含有大量揮發(fā)油，在散劑中容易散失或氧化，對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行提取和β-CD包合后，可以提升產(chǎn)品質(zhì)量，提高療效；蓽茇有辛辣味，導(dǎo)致產(chǎn)品順應(yīng)性差，對(duì)蓽茇?fù)]發(fā)油進(jìn)行包合后，產(chǎn)品口感有了很大改觀；脂溶性的揮發(fā)油被包合后，其在水中的溶解性也大大改善[9-10]。

六味大托葉云實(shí)散是藏醫(yī)治療腎寒、胃寒引起的月經(jīng)不調(diào)、白帶異常的常用藥物，但原制劑工藝以藥材全粉入藥，長(zhǎng)期保存會(huì)導(dǎo)致制劑泛油，影響藥物的療效。實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)六味大托葉云實(shí)散的揮發(fā)油成分進(jìn)行β-CD包合工藝的研究，可以對(duì)制劑的質(zhì)量有所改善，并提高原制劑的療效，為六味大托葉云實(shí)散的二次開發(fā)提供參考。參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（藏藥第一冊(cè)）[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，1995：285.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[3]李辛，趙國(guó)虎，趙軍，等.蓽茇?fù)]發(fā)油提取工藝優(yōu)化及動(dòng)力學(xué)模型研究[J].應(yīng)用化工，2009，38（3）：386-388.

[4]劉紅淼，姜少灝，張振杰，等.正交試驗(yàn)優(yōu)選香桂化濁膠囊中揮發(fā)油的包合工藝[J].中國(guó)藥房，2010，21（47）：4449-4450.

[5]宋寧寧，許揚(yáng)彪.正交試驗(yàn)優(yōu)選復(fù)方魚腥草顆粒中連翹揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合工藝[J].中國(guó)藥房，2012，23（11）：997-998.

[6]朱纓，俞迪佳，吳健.正交試驗(yàn)優(yōu)選草果揮發(fā)油羥丙基-β-環(huán)糊精包合工藝[J].中國(guó)藥房，2012，23（35）：3302-3305.

[7]姜麗紅，田汝芳，馬宏偉，等.正交試驗(yàn)優(yōu)選藏茴香揮發(fā)油的提取與包合工藝[J].中國(guó)藥房，2014，25（23）：2139-2141.

[8]施明毅，李建利，謝燕，等.冠心康膠囊揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備工藝優(yōu)選[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（1）：47-50.

[9]張生潭，張帆，汪鐵山，等.正交試驗(yàn)優(yōu)選春砂仁揮發(fā)油羥丙基-β-環(huán)糊精包合工藝[J].中國(guó)藥房，2011，22（3）：225-228.

[10]李羅清，黃慧，田素英.辛蒼鼻舒膠囊中揮發(fā)油成分的提取與包合工藝研究[J].中國(guó)藥房，2012，23（23）：2137-2139.

（收稿日期：2015-06-09）